抗菌药物的敏感性试验及报告解读课件.ppt
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- 抗菌 药物 敏感性 试验 报告 解读 课件
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1、Company name1抗菌药物的敏感性试验及抗菌药物的敏感性试验及报告解读报告解读Company name2 2什么是抗菌药物的敏感性试验?什么是抗菌药物的敏感性试验? 测测定抗菌药物在体外抑制病原微定抗菌药物在体外抑制病原微生物生长的效力,称抗菌药物对细菌生物生长的效力,称抗菌药物对细菌的抑菌试验,的抑菌试验,或或称细菌对药物的敏感称细菌对药物的敏感性试验。性试验。Company name3 3抗菌药物敏感性试验抗菌药物敏感性试验(antimicrobial susceptibility test)antimicrobial susceptibility test)意义:意义:药敏试验常
2、规抗菌药物的选择:药敏试验常规抗菌药物的选择: 我国根据美国我国根据美国CLSICLSI(National committee for clinical National committee for clinical laboratory standarslaboratory standars,)制定的标准进行,抗生素分成,)制定的标准进行,抗生素分成四组:四组:A A组:组:一级试验并常规首选报告的抗微生物药物。一级试验并常规首选报告的抗微生物药物。B B组:一级试验,临床使用的主要抗生素(尤其在院组:一级试验,临床使用的主要抗生素(尤其在院 内感染时)有选择报告的药物。内感染时)有选择报告
3、的药物。C C组组:补充试验,有选择报告的药物:补充试验,有选择报告的药物U U组:补充试验,仅用于泌尿道感染细菌的抗微生物药物。组:补充试验,仅用于泌尿道感染细菌的抗微生物药物。 Company name4 4关于细菌感染药物敏感试验应该知道什么?关于细菌感染药物敏感试验应该知道什么?u天然耐药的抗菌药物天然耐药的抗菌药物(肯定无效)(肯定无效)u可以选择的抗菌药物可以选择的抗菌药物(可能有效)(可能有效)u细菌药敏试验可以提供哪些信息?细菌药敏试验可以提供哪些信息?u如何解读细菌药敏试验结果?如何解读细菌药敏试验结果?Company name5 5为什么要做药物敏感性试验?为什么要做药物敏
4、感性试验?供临床医师选用抗菌药物时的参考供临床医师选用抗菌药物时的参考细菌耐药性监测和耐药性变迁细菌耐药性监测和耐药性变迁评价新抗菌药物的药效学特征评价新抗菌药物的药效学特征对细菌耐药谱分析和分型有助于某些菌种对细菌耐药谱分析和分型有助于某些菌种的鉴定的鉴定作为医院内感染流行病学调查的手段之一作为医院内感染流行病学调查的手段之一Company name6 6有关抗菌药物合理应用法规、规章、制度有关抗菌药物合理应用法规、规章、制度20112011年年7575号文要点(一)号文要点(一)7575号文共号文共6 6章章5353条,要点如下:条,要点如下:抗菌药物合理应用成为卫生行政部门直接职责,明确
5、医疗机构抗菌药物合理应用成为卫生行政部门直接职责,明确医疗机构负责人是第一责任人(第负责人是第一责任人(第8 8条)条)明确提出抗菌药物临床应用明确提出抗菌药物临床应用分级权限分级权限与与管理管理(第(第6 6条第条第1919条条5050种与种与3535种)种)明确各级医院均须成立抗菌药物管理工作组及职责(第明确各级医院均须成立抗菌药物管理工作组及职责(第1010条及条及第第1111条)条)明确提出在二级以上医院设立明确提出在二级以上医院设立感染科与感染临床药师(第感染科与感染临床药师(第1212、1313条),及临床微生物室(第条),及临床微生物室(第1414条)条)Company name
6、7 7概况和制定过程概况和制定过程共六章共六章5353条条第六章第六章 附则附则第五章第五章 法律责任法律责任第四章第四章 监督管理监督管理第三章第三章 抗菌药抗菌药物临床应用管理物临床应用管理第一章第一章 总总则则第二章第二章 组织机组织机构和职责构和职责 组织医院管理、临床、药学组织医院管理、临床、药学、微生物检验、感染等方面、微生物检验、感染等方面专家起草专家起草抗菌药物临床应抗菌药物临床应用管理办法用管理办法 4 4月月1111日起征求全国意见日起征求全国意见 制定制定抗菌药物临床应用分抗菌药物临床应用分级管理目录级管理目录 4 4月月1515日期征求全国意见日期征求全国意见Compa
7、ny name8 8第三章第三章 抗菌药物临床应用管理抗菌药物临床应用管理 三级医院三级医院 不得超过不得超过5050种,种,二级医院二级医院 不得超过不得超过3535种种 同一通用名称药品的品种,同一通用名称药品的品种,注射剂型和口服剂型各不得超过注射剂型和口服剂型各不得超过2 2种,处方组成种,处方组成类同的复方制剂类同的复方制剂1-21-2种。种。 具有相似或相同药学特征的药品不得重复采购。具有相似或相同药学特征的药品不得重复采购。 对三代及四代头孢菌素、氟喹诺酮类抗菌药物、深部抗真菌类抗菌药物进行对三代及四代头孢菌素、氟喹诺酮类抗菌药物、深部抗真菌类抗菌药物进行了限定。了限定。 三代及
8、四代头孢菌素(含复方制剂)类抗菌药物口服剂型不得超过三代及四代头孢菌素(含复方制剂)类抗菌药物口服剂型不得超过 5 5个品规,个品规,注射剂型不得超过注射剂型不得超过8 8个品规个品规 碳青霉烯类抗菌药物注射剂型不得超过碳青霉烯类抗菌药物注射剂型不得超过3 3个品规个品规 氟喹诺酮类抗菌药物口服剂型和注射剂型各不得超过氟喹诺酮类抗菌药物口服剂型和注射剂型各不得超过4 4个品规个品规 深部抗真菌类抗菌药物不得超过深部抗真菌类抗菌药物不得超过5 5个品规。个品规。Company name9 9n 建立抗菌药物临床应用和建立抗菌药物临床应用和细菌耐药监测体系细菌耐药监测体系细菌耐药率相应的措施超过超
9、过30%30%及时将预警信息通报医务人员及时将预警信息通报医务人员超过超过40%40%慎重经验用药慎重经验用药超过超过50%50%参照药敏试验结果选用参照药敏试验结果选用超过超过75%75%暂停临床应用,追踪细菌耐药监测结果,暂停临床应用,追踪细菌耐药监测结果,再决定是否恢复临床应用再决定是否恢复临床应用 30%第三章第三章 抗菌药物临床应用管理抗菌药物临床应用管理Company name1010药敏试验可以提供哪些信息药敏试验可以提供哪些信息药物种类的选择药物种类的选择(天然耐药的抗菌药物(天然耐药的抗菌药物 不做药敏药敏试验)不做药敏药敏试验)检测耐药机制,根据耐药机制提示对其检测耐药机制
10、,根据耐药机制提示对其 他抗菌药物的敏感性他抗菌药物的敏感性 检测标志性药物,提示对其他抗菌药物检测标志性药物,提示对其他抗菌药物 的敏感性的敏感性 检测试验抗菌药物的敏感性检测试验抗菌药物的敏感性Company name1111如何进行药物敏感性试验?如何进行药物敏感性试验?稀释法稀释法试管稀释法(肉汤稀释法)试管稀释法(肉汤稀释法)平板稀释法(琼脂稀释法)平板稀释法(琼脂稀释法)扩散法(纸片法)扩散法(纸片法)Kirby-baure(K-B)Kirby-baure(K-B)法法StockesStockes法法E-TestE-TestCompany name1212纸片法药敏和纸片法药敏和M
11、ICMIC法的相关性法的相关性Log2MICMIC7128最最664532低低41638抑抑2412菌菌01-10.5浓浓-20.25-30.125度度-40.06-50.03-60.0156101418222630343842抑菌圈直径抑菌圈直径耐药耐药中敏中敏高敏高敏100100株临床菌株株临床菌株100100对对MICMIC和抑菌圈直径和抑菌圈直径负相关(负相关(r =-0.9r =-0.9)中敏:中敏:12-20mm12-20mmCompany name1313微生物室自动化微生物室自动化按仪器厂商的要求进行血培养仪按仪器厂商的要求进行血培养仪细菌鉴定及药敏检测仪细菌鉴定及药敏检测仪V
12、ITEK 2VITEK 2BacT/ALERT 3D 240BacT/ALERT 3D 240Company name1414纸片扩散法纸片扩散法Company name1515扩散法:扩散法:K-BK-B操作:操作:无菌棉签蘸取菌液,在管壁内将多余菌液旋无菌棉签蘸取菌液,在管壁内将多余菌液旋转挤去后,在琼脂表面均匀涂布接种转挤去后,在琼脂表面均匀涂布接种3 3次,次,每次旋转平板每次旋转平板6060度,最后沿平板内缘涂抹度,最后沿平板内缘涂抹1 1周。周。室温干燥或室温干燥或3535干燥干燥5-155-15分钟分钟用纸片分配器或无菌镊子将药物纸片紧贴于用纸片分配器或无菌镊子将药物纸片紧贴于琼
13、脂表面琼脂表面纸片间距纸片间距 20mm 20mm 纸片离平板内缘纸片离平板内缘 15mm15mm 原理:原理:将浸有抗菌药物的纸将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板片贴在涂有细菌的琼脂平板上,抗菌药物在琼脂内向四上,抗菌药物在琼脂内向四周扩散,因此敏感细菌在纸周扩散,因此敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受片周围一定距离内的生长受到抑制,根据抑菌圈的大小到抑制,根据抑菌圈的大小即可推知该药物的最低抑菌即可推知该药物的最低抑菌浓度(浓度(MICMIC)。)。Company name1616抗生素药敏试验质控抗生素药敏试验质控纸片法纸片法 新批号药做;一般每周做;新批号药做;一般每周做;
14、失控时天天做,连续失控时天天做,连续3030天,准确度和精确天,准确度和精确 度达到后才恢复每天做;度达到后才恢复每天做; 一个药物失控时,重新测一个药物失控时,重新测5 5天天。稀释法稀释法 琼脂法、微量肉汤法每次同时做质控琼脂法、微量肉汤法每次同时做质控Company name1717Company name1818培养基:培养基:肠杆菌科细菌、假单胞菌属、不动杆菌属等肠杆菌科细菌、假单胞菌属、不动杆菌属等Mueller-HintonMueller-Hinton(MHMH)琼脂或)琼脂或ISO-sensitestISO-sensitest琼脂琼脂葡萄球菌属葡萄球菌属Mueller-Hint
15、onMueller-Hinton(MHMH)琼脂)琼脂链球菌属链球菌属5%5%脱纤维羊血(马血、兔血)脱纤维羊血(马血、兔血)MHMH或或Columbia Blood AgarColumbia Blood Agar嗜血杆菌属嗜血杆菌属1%1%血红蛋白和血红蛋白和1%X1%X、V V因子复合物因子复合物MHMH或或Haemophilus Test Haemophilus Test MediumMedium(HTMHTM),添加),添加SR158SR158。Company name1919菌液制备菌液制备试管法:试管法:10105 5CFU/mlCFU/ml平板法:平板法:10107 7CFU/m
16、lCFU/ml(10104 4CFU/spotCFU/spot)扩散法:扩散法:0.5MacFarland Standard0.5MacFarland Standard(1.1.5 510108 8CFU/mlCFU/ml)E-Test:E-Test:同上同上Company name2020培养条件(一)培养条件(一) 需氧菌:需氧菌: 35 35 2 2 ,16-1816-18小时小时嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌:嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌:20-2420-24小时小时葡萄球菌:葡萄球菌:33-35 33-35 ,OXAOXA、METMET、NAFNAF、VAN24VAN24小
17、时小时肠球菌:肠球菌:VAN 24VAN 24小时小时溶血性链球菌、肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等:溶血性链球菌、肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等:20-2420-24小时小时Company name2121培养条件(二)培养条件(二)苛养菌:苛养菌: 35 35 2 2 ,5%-10%CO25%-10%CO2溶血性链球菌、肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等:溶血性链球菌、肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等:20-2420-24小时小时流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌16-1816-18小时小时厌氧菌:厌氧菌: 35 35 2 2 ,厌氧环境(,厌氧环境(80%-85%N80%-85%N2 2,5%-10%CO5%-10%CO2 2,
18、10%10%H H2 2),),18-2418-24小时小时真菌:真菌: 35 35 2 2 ,2424小时小时新型隐球菌:新型隐球菌:48-7248-72小时小时有关药敏试验的中的质控要求参见有关药敏试验的中的质控要求参见“临床微生物实验室的临床微生物实验室的质量控制及存在问题质量控制及存在问题”Company name22222525培养菌丝型培养菌丝型3535培养酵母型培养酵母型Company name2323如何阅读结果(纸片法)如何阅读结果(纸片法)工具:游标卡尺,尺子工具:游标卡尺,尺子光源:反射光、透射光光源:反射光、透射光阅读:阅读: 药敏平皿背衬不反光的黑色背景用药敏平皿背衬
19、不反光的黑色背景用 肉眼观察也可用肉眼观察也可用BIOMICBIOMIC机器阅读机器阅读(结果阅读具体规则见(结果阅读具体规则见“药敏试验中的抗菌药药敏试验中的抗菌药物选择和物选择和CLSICLSI规范(规范(20112011)” ” )Company name2424Company name2525Company nameTHANK YOUSUCCESS2022-5-23可编辑Company name2727什么时候可以使用E-试验?临床治疗要求了解某种抗菌药物确切的临床治疗要求了解某种抗菌药物确切的MICMIC值以及值以及MICMIC的范围的范围当某种抗菌药物对某种细菌的纸片法药敏结果不可
20、靠时当某种抗菌药物对某种细菌的纸片法药敏结果不可靠时要核实常规方法获得的药敏结果正确性要核实常规方法获得的药敏结果正确性苛养菌苛养菌肺炎链球菌肺炎链球菌-溶血性链球菌溶血性链球菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌厌氧菌 丝状真菌:丝状真菌:曲霉菌曲霉菌 、烟曲霉、马尔尼菲青霉、烟曲霉、马尔尼菲青霉Company name2828放试条时,操作要稳妥,试放试条时,操作要稳妥,试条一旦接触琼脂则勿再移动。条一旦接触琼脂则勿再移动。作苛养菌或极敏感菌株药敏作苛养菌或极敏感菌株药敏时,时,150mm 150mm 平皿上只能放置平皿上只能放置4 4 5 5 个试条,个试条,90mm90mm平皿只放平皿只放1 1个
21、试条。个试条。将试条放置平板上的方法有将试条放置平板上的方法有用手指,镊子,用手指,镊子,Etest Etest 加样加样器或真空笔。器或真空笔。 如果试条放到非正常位置,如果试条放到非正常位置,勿移动试条,维持原状判读勿移动试条,维持原状判读结果。结果。Etest Etest 试条模板的应用试条模板的应用Company name2929E-testE-test试验结果阅读试验结果阅读忽略溶血,读取生长完忽略溶血,读取生长完全被抑制处全被抑制处MIC 0.032ug/mlMIC 0.032ug/ml杀菌型药物如氨基糖杀菌型药物如氨基糖苷类产生苷类产生“干脆利落干脆利落”椭圆球椭圆球 MIC 0
22、.064ug/mlMIC 0.064ug/ml试条两边产生不同的试条两边产生不同的交界点,读取较高数交界点,读取较高数值侧的值侧的MICMIC。如果两侧。如果两侧差差1 1个稀释度,则须个稀释度,则须重复试验。重复试验。 MIC 0.5ug/mlMIC 0.5ug/ml忽略变形杆菌的迁忽略变形杆菌的迁延现象,延现象,MIC 0.064ug/mlMIC 0.064ug/mlCompany name3030不可能出现的药敏结果不可能出现的药敏结果 同一株细菌不可能出现的矛盾的药敏结果同一株细菌不可能出现的矛盾的药敏结果金葡菌:青霉素金葡菌:青霉素S S,苯唑西林,苯唑西林R R;万古霉素;万古霉素
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