复制转录和翻译-PPT课件.ppt
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1、蛋白质蛋白质翻译翻译转录转录逆转逆转录录复制复制复制复制DNARNADNA复制复制把亲代的遗传把亲代的遗传信息忠实地传递给子代。信息忠实地传递给子代。在子代通过在子代通过转录转录传递给传递给RNA,再通过,再通过翻译翻译生成生成Pr来表现生命活动。来表现生命活动。1 1、DNADNA的的半保留复制半保留复制2 2、DNADNA复制的复制的起点与方向起点与方向3 3、DNADNA的的半不连续复制半不连续复制4 4、DNADNA复制的复制的分子基础分子基础5 5、DNADNA复制的复制的过程过程6 6、DNADNA复制的复制的忠实性忠实性7 7、真核生物复制(、真核生物复制(端粒酶端粒酶)DNA的
2、的复复制制DNADNA的半保留复制的半保留复制DNA在复制时,两条链解在复制时,两条链解开分别作为模板,在开分别作为模板,在DNA聚合酶聚合酶的催化下的催化下按碱基互按碱基互补的原则补的原则合成两条与模板合成两条与模板链互补的新链,以组成新链互补的新链,以组成新的的DNA分子。分子。由于子代由于子代DNA分子中一条链来自亲分子中一条链来自亲代,另一条链是新合成的,代,另一条链是新合成的,这种复制方式称为半保留这种复制方式称为半保留复制。复制。DNA复制的复制的起始、方向起始、方向(5 3)环状环状 DNA复制时复制时所形成的所形成的结构结构起始点起始点复制叉的推进复制叉的推进复制叉复制叉起始点
3、起始点起始点起始点起始点起始点复制叉复制叉复制叉复制叉未复制未复制DNADNA单向复制单向复制双向复制双向复制 真核细胞真核细胞DNADNA多个起点复制多个起点复制(5 3 )起起点点起起点点起起点点起起点点起起点点起起点点复制起始点、复制子与复制叉(动画演示)复制起始点、复制子与复制叉(动画演示)以以35方向的亲代方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基链作模板的子代链在复制时基本上是本上是连续连续进行的,其子代链的聚合方向为进行的,其子代链的聚合方向为5 3,这,这一条链被称为一条链被称为前导链前导链(leading strand)。以以53方向的亲代方向的亲代DNA链为模板的子代链在复
4、制时则链为模板的子代链在复制时则是是不连续不连续的,其链的聚合方向也是的,其链的聚合方向也是5 3 ,这条链被称,这条链被称为为后随后随/滞后链滞后链(lagging strand)。前导链连续复制而后随链不连续复制,就是复制的前导链连续复制而后随链不连续复制,就是复制的半不半不连续性连续性。 DNADNA的半不连续复制的半不连续复制两条子链的合成方向都是两条子链的合成方向都是5353后随链是不连续合成的,后随链是不连续合成的,DNA在复制时,由在复制时,由后随链后随链所形成的一些子代所形成的一些子代DNA不连续的短片段不连续的短片段称为称为冈崎片冈崎片段段(Okazaki fragment)
5、。冈崎片段的大小,在原核生物中约为冈崎片段的大小,在原核生物中约为10002000个个核苷酸,而在真核生物中约为核苷酸,而在真核生物中约为100个核苷酸。个核苷酸。 DNADNA的半不连续复制的半不连续复制3 5 3 5 3 5 3 5 解链方向解链方向前导链前导链(leading strand)后随后随/滞后链滞后链(lagging strand)DNADNA的半不连续复制的半不连续复制3 5 冈崎片段冈崎片段(okazaki fragment)DNADNA复制的分子基础复制的分子基础 1. 底物底物 dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP) 2. 有关的酶有关的酶 拓扑异构酶、解
6、链酶、引物酶拓扑异构酶、解链酶、引物酶、聚合酶聚合酶(DNA聚合酶聚合酶I 、II、III)、)、DNA连接酶连接酶 3. 模板模板 单链的单链的DNA母链母链 4. 引物引物 寡核苷酸引物(寡核苷酸引物(RNA) 5. 其他蛋白质因子其他蛋白质因子 单链结合蛋白(单链结合蛋白(SSB维持模板维持模板处于单链状态,保护单链的完整)处于单链状态,保护单链的完整)(dNMP)n + dNTP (dNMP)n+1 +PPiDNA拓扑异构酶拓扑异构酶(解旋酶)解旋酶)v既能水解,又能打断碱基互补配对的氢键既能水解,又能打断碱基互补配对的氢键v打开超螺旋打开超螺旋DNA解链酶解链酶v解开双螺旋解开双螺旋
7、引物酶引物酶v是是RNA聚合酶聚合酶,合成一段,合成一段RNA引物引物3 HO53 5 3 5 引物酶催化合成短链引物酶催化合成短链RNARNA引物引物分子分子 引物引物引物引物酶酶引物引物是由引物酶催化合成的短链是由引物酶催化合成的短链RNA分子。分子。 3 5 3 5 3 5 3 5 解链方向解链方向前导链前导链(leading strand)后随后随/滞后链滞后链(lagging strand)DNADNA的半不连续复制的半不连续复制3 5 冈崎片段冈崎片段(okazaki fragment)引物引物RNA引物引物RNA引物引物RNA在原核生物中目前发现在原核生物中目前发现DNA聚合酶有
8、三种,分别命名为聚合酶有三种,分别命名为DNA聚合酶聚合酶(pol ),),DNA聚合酶聚合酶(pol ),),DNA聚合酶聚合酶(pol ),),这三种酶都属于具有多种酶活性的多这三种酶都属于具有多种酶活性的多功能酶。功能酶。参与参与DNA复制的主要是复制的主要是DNA聚合酶聚合酶 和和 DNA聚合酶聚合酶 种类和生理功能种类和生理功能 原核生物中的三种原核生物中的三种DNADNA聚合酶聚合酶 切除引物切除引物DNA聚合酶的活性聚合酶的活性 5至至3的聚合活性的聚合活性5 3方向方向链的延伸链的延伸 核酸外切酶活性核酸外切酶活性 5 3外切酶活性外切酶活性切除引物切除引物 3 5外切酶活性外
9、切酶活性校对功能校对功能参与参与DNA复制的复制的DNA聚合酶,必须以一段具有聚合酶,必须以一段具有3端自由羟基(端自由羟基(3-OH)的)的RNA作为作为引物引物(primer) ,才能开始聚合子代才能开始聚合子代DNA链。链。RNA引物的大小,在原核生物中通常为引物的大小,在原核生物中通常为50 100个个核苷酸,在真核生物中约为核苷酸,在真核生物中约为10个核苷酸。个核苷酸。RNA引引物的碱基顺序,与其模板物的碱基顺序,与其模板DNA的碱基顺序相配对的碱基顺序相配对 需要引物需要引物 5至至 3的聚合活性(的聚合活性( 5 3 )pp pp pppPPPOHOHOH55PPiN1N2N3
10、N1N2N3533 DNA-pol的核酸外切酶活性和及时校读的核酸外切酶活性和及时校读A:DNA-pol外切酶活性外切酶活性3 5切除错配碱基;并用切除错配碱基;并用其其聚合酶活性聚合酶活性5 3掺入正确配对的底物掺入正确配对的底物B:碱基配对正确,:碱基配对正确, DNA-pol不表现外切酶活性。不表现外切酶活性。3 5外切酶活性外切酶活性校对功能校对功能连连接接酶酶连连接接缺缺口口Mg2+连接酶连接酶ATPATPPPiPPiATCGPTTPPPAACCTGAPACPPPPOHTGGATCGPTTPPPAACCTGAPACPPPTGGP缺口缺口33555533模板链模板链模板链模板链3,5磷
11、酸二酯键磷酸二酯键DNADNA的复制过程的复制过程 (一)(一) 复制的起始复制的起始 (二)(二) 复制的延伸复制的延伸 (三)(三) 复制的终止复制的终止 起始的过程起始的过程打开打开DNA超螺链超螺链打开双螺旋打开双螺旋防止复螺旋防止复螺旋单链结合蛋白单链结合蛋白解链酶解链酶引引 物物引物酶引物酶拓扑异构酶拓扑异构酶合成合成引物引物DNA复制起始过程复制起始过程拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物DNA双链双链 5 3 5 3拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合
12、酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物DNA复制起始的过程复制起始的过程拓扑异构酶拓扑异构酶与与DNA双链双链结合,松弛结合,松弛超螺旋。超螺旋。 5 3 5 3拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物DNA复制起始过程复制起始过程解链酶解开解链酶解开DNA双螺旋双螺旋 5 3 5 3拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物单链结合蛋白单链结合蛋白防止复螺旋防止复螺旋 5 3 5 3DNA复制起始的过程
13、复制起始的过程拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物(RNA)DNA复制起始过程复制起始过程引物酶合成引物引物酶合成引物 5 3 5 3(二二)DNA复制的延伸复制的延伸DNA聚合酶聚合酶1. DNA聚合酶聚合酶把新生链的第一个脱氧核苷酸把新生链的第一个脱氧核苷酸加到加到引物的引物的3OH上,开始新生链的合成过程上,开始新生链的合成过程AG T AC T A A T DNA DNA 聚合酶聚合酶ACGACGTT引物引物AG T AC T A A T AGCGACGGTTT T 组成组成 DNA 的脱氧核糖
14、核苷酸一个个连接起来的脱氧核糖核苷酸一个个连接起来3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键引物引物AG T AC T A A T GCGACGGTTTTA引物引物AG T AC T A A T GCGACGTTGTTA引物引物AG T AC T A A T GCGACGTGTTAA引物引物AG T AC T A A T GCGACGGTTAA T引物引物AG T AC T A A T GCGACGGTTAA TA引物引物AG T AC T A A T GCGCGGTTAA TA T引物引物AG T AC T A A T GGCGGTTAA TA T C引物引物AG T AC T A A T GGCGGTT
15、AA TA T CDNADNA模板链模板链DNA新链新链引物引物2.半不连续复制半不连续复制与冈崎片段与冈崎片段前导链前导链滞后链滞后链冈崎片段冈崎片段 5 3 5 32.半不连续复制半不连续复制与冈崎片段与冈崎片段前导链、前导链、后随链后随链/滞后滞后链、链、半半不连续复制、不连续复制、冈崎片段冈崎片段。335533553355DNA连接酶3355DNA聚合酶聚合酶DNA聚合酶聚合酶5335( (三三) )复制的终止复制的终止 遇到遇到终止子终止子停止复停止复制制 DNA聚合酶聚合酶利利用用 5 3外切酶外切酶活性活性水解引物水解引物 DNA聚合酶聚合酶聚聚合活性合活性填补缺口填补缺口 DN
16、A连接酶连接酶连接连接缺口。缺口。33333333555555555原核细胞原核细胞DNADNA的的半不连续、半保半不连续、半保留复制过程留复制过程复制叉的复制叉的移动方向移动方向拓扑异拓扑异构酶构酶DNA聚合聚合酶酶III解链酶解链酶RNA引物引物引物体引物体DNA聚聚合酶合酶ISSB3 3 5 前导前导链链滞后滞后链链3 5 复制的起始、复制的起始、方向方向DNADNA链的合链的合成与延长成与延长DNADNA链合链合成的终止成的终止5 RNA引物引物3 3 DNA连连接酶接酶DNA聚聚合酶合酶复制的忠实性复制的忠实性 DNA复制过程是一个高度精确的过程,复制过程是一个高度精确的过程,据估计
17、,大肠杆菌据估计,大肠杆菌DNA复制复制109-1010碱基对仅碱基对仅出现一个误差,保证复制忠实性的原因主要出现一个误差,保证复制忠实性的原因主要有以下四点有以下四点:a、DNA聚合酶的高度专一性(严格遵循聚合酶的高度专一性(严格遵循 碱基配对原则)碱基配对原则)b、DNA聚合酶的校对功能(错配碱基被聚合酶的校对功能(错配碱基被3-5 外切酶切除)外切酶切除)c、起始时以、起始时以RNA作为引物作为引物d、DNA的损伤修复系统的损伤修复系统u基因表达包括基因表达包括转录转录和和翻译翻译两个过程,两个过程,转录的起始转录的起始是基是基因表达的第一步,也是基因因表达的第一步,也是基因表达调节的主
18、要控制点表达调节的主要控制点u 转录的概念转录的概念转录的概念和转录的概念和DNADNA的的模板模板链和链和编码编码链链转录是在转录是在DNADNA的指导下的指导下的的RNARNA聚合酶聚合酶的催化下,按的催化下,按照照碱基配对的原则碱基配对的原则,以,以四种四种NTPNTP为原料合成一条与模为原料合成一条与模板板DNADNA互补的互补的RNARNA的过程。的过程。RNARNA的转录从的转录从DNADNA模板的特模板的特定位点开始,并在一定的位点终止。此转录区域为定位点开始,并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。一个转录单位。启动子启动子 终止子终止子模板链模板链/ /无无义链义链编码
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