护骨素基因启动子区t950-c单核苷酸点突变多态性与骨密度及骨 代谢精品课件.ppt

1、myszjpwd-myxr-xm护骨素基因启动子区护骨素基因启动子区T950-C单核单核苷酸点突变多态性与骨密度及骨苷酸点突变多态性与骨密度及骨 代谢的关系代谢的关系 广州医学院第二附属医院核医学科 前言前言 护骨素(Osteoprotegerin,OPG)是近年来发现并克隆的三个肿瘤坏死因子受体及其配体家族新成员之一。OPG是目前已知唯一一个通过与定位于成骨细胞膜上的NF-kB受体活化剂配体(receptor activation of NF-kB ligand, RANKL)结合,从而封闭了成骨细胞诱导的破骨细胞分化成熟及其溶骨性骨吸收的可溶性饵受体 。前言OPG基因启动子区序列的变化可能

2、影响到OPG基因的转录和蛋白质表达水平 。因此, OPG基因是骨质疏松症的一个良好的候选基因。临床资料研究对象及入围标准: 134例广州地区居住十年以上无亲缘关系的汉族妇女作为研究对象,年龄48-81岁,平均62.76岁,自然绝经时间超过5年。 所有研究对象必须排除其它影响骨代谢的疾病和未有服用各种影响骨代谢药物。 临床资料诊断标准:WHO骨质疏松症诊断标准,即BMD低于正常人群平均峰值2.5个标准差 。分组:134例研究对象分为骨质疏松症组和对照组。其中骨质疏松症组73例,年龄49-81岁,平均64.59岁;对照组61例,年龄48-77岁,平均60.66岁。 实验方法 BMD测定: 双能X线

3、吸收骨密度测量仪测定股骨髋部股骨颈、Wards三角、大转子和腰椎24的BMD值(g/cm2),测量时将测量对象的出生年月日、身高和体重等参数输入计算机。 实验方法 骨代谢指标测定: 放射免疫分析法测实验对象外周血中降钙素、甲状旁腺素、雌激素和骨钙素水平。 实验方法 外周血提取基因组DNA,PCR扩增目的片段,扩增后的片段采用Hinc II限制性内切酶消化,1.5琼脂糖凝胶电泳确定基因型实验方法酶切位点的判断 有Hinc II酶切位点的纯合子-CC,显示129bp和126bp两条带;缺乏Hinc II酶切位点的野生型纯合子-TT,显示255一条带;杂合子-TC则显示上述三条带。 结果 OPG基因

4、启动子区T950-C基因型和等位基因频率分布 基因型 等位基因 分组 例数 TT TC CC T C骨质疏松症组 73 28(0.384) 39(0.534) 6(0.082) 95(0.651) 51(0.349) 绝经后正常妇女 61 29(0.475) 29(0.475) 3(0.049) 87(0.713) 35(0.287) X2=1.425,P=0.490 注明:等位基因在绝经后骨质疏松症汉族妇女群和绝经后正常妇女人群中的频率分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。 结果汉族妇女与高加索人种妇女汉族妇女与高加索人种妇女OPG基因启动子区基因启动子区T950-C基因型和等位

5、基因频率分基因型和等位基因频率分布的比较布的比较 基因型基因型 等位基因等位基因 分组分组 种种 例数例数 TT TC CC T C TT TC CC T C骨质疏骨质疏 汉族汉族 73 28(0.384) 39(0.534) 6(0.082) 95(0.651) 51(0.349) 73 28(0.384) 39(0.534) 6(0.082) 95(0.651) 51(0.349) 松症组松症组 高加索高加索 215 46(0.214)117(0.544)52(0.242215 46(0.214)117(0.544)52(0.242) 209(0.486) 221(0.514) ) 209

6、(0.486) 221(0.514) X2X2=13.010,=13.010,P=P=0.0010.001 X2X2=11.854,=11.854,P=P=0.0010.001绝经后正绝经后正 汉族汉族 61 29(0.475) 29(0.475) 3(0.049) 87(0.713) 35(0.287)61 29(0.475) 29(0.475) 3(0.049) 87(0.713) 35(0.287)常妇女常妇女 高加索高加索 256 53(0.244)142(0.534)61(0.229) 248(0.484)264(0.516) 256 53(0.244)142(0.534)61(0.

7、229) 248(0.484)264(0.516) X2X2=23.016,=23.016,P=P=0.0000.000 X2X2=20.686,=20.686,P=P=0.0000.000结果 骨质疏松症妇女各基因型之间BMD的比较 基因型 例数 L1 L2 L3 L4 股骨颈 wards区 大转子 TT 28 0.6640.099 0.7370.109 0.7770.114 0.8310.134 0.6960.084 0.5880.106 0.6110.071 TC 39 0.6960.068 0.7640.077 0.8140.089 0.8650.130 0.7020.085 0.59

8、40.105 0.6140.095 CC 6 0.7170.060 0.7530.072 0.7910.082 0.7640.105 0.6200.023 0.5070.068 0.5550.072 ANOVA 2.28/0.11 0.76/0.46 1.55/0.21 2.35/0.10 4.26/0.04 1.68/0.19 1.14/0.32结果 绝经后正常妇女各基因型之间BMD的比较 基因型 例数 L1 L2 L3 L4 股骨颈 wards区 大转子 TT 29 0.8780.084 0.9730.116 1.0090.106 1.0460.132 0.8060.090 0.7300.

9、102 0.7170.087 TC 29 0.9020.108 1.0250.145 1.0700.134 1.0950.129 0.8310.065 0.7600.096 0.7250.067 CC 3 0.9430.106 0.9830.126 1.1220.155 1.1060.156 0.8010.081 0.6780.083 0.6830.061 ANOVA 0.85/0.43 1.15/0.32 2.48/0.09 1.12/0.33 0.74/0.47 1.33/0.27 0.44/0.64 讨论讨论 广州地区134名绝经后汉族妇女OPG基因启动子区T950-C多态性等位基因频率

10、分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。基因型频率分布与高加索人种妇女明显差异。OPG基因启动子区T950-C基因多态性频率分布存在着种族差异。 OPG基因启动子区T950-C多态性不能作为预测中国汉族妇女一定发生骨质疏松症的遗传学标志。对于骨质疏松症妇女,CC基因型可预测骨质疏松症发生的程度。 现今医学分为传统医学、基于“生物-医学模式”近代发展起来的西医，20世纪西医又发展到“社会-心理-生物医学”或综合医学模式，后基因组时代系统生物学的兴起，形成了系统医学在全球的迅速发展，成为继传统医学、西医学之后中、西医学汇通的未来医学。当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学、华中科技大

11、学、郑州大学等学校。 中医即中国传统医药学，是形成于数千年前的中国，是建立在人们与疾病长期斗争的经验总结及阴阳五行、八纲脏腑辨证基础上，运用朴素辩证法及思辨推理方法，认识机体、自然、疾病三者关系，发展起来的一门以“功能人”包括功能脏器为概念的独特的医学哲学理论体系。在治疗上，除了药物外，还有针灸、推拿气功、耳针等特殊疗法，它是世界传统医学中最完善的一种医学理论体系。它为人类尤其为中国人民健康和民族繁衍做出了巨大贡献。 西医学是最近三四百年来建立在解剖学、生物学及现代科学技术基础上、发展起来的一门以“解剖人、肉体人”为概念的、新兴的现代医学科学理论体系。主要采用科学实验方法，从宏观到微观，直至目

12、前的分子基因层次水平，发展极为迅速，超过其它任何一门医学科学，成为世界医学史上的主流。 可见中西医学，一个是以“功能人”为概念的独特的哲学医学理论体系，一个是以“解剖人、肉体人”为概念的新兴的现代医学科学理论体系，二者都不是以完整人为研究对象的科学，从理论讲二者都不是科学的，势必影响各自发展。事实也证明这一切，中医长期停滞不前、疗效也不确实。西医尽管发展到目前的基因分子层次，但疾病发病率居高不下，对绝大部分疾病发病原因认识不清、发病机理弄不明白，治疗受到制约，在小小SARS、禽流感面前竟束手无策，在糖尿病、癌症、心脑血管疾病、尿毒症等相当多疾病面前更是不得不求助或借助中医治疗。一个是疗效不确实

13、，一个是有些甚至相当多疾病无法治疗，这就是中西医学结合的缘由。然而，由于二者是两套理论、两股道上跑的车，风马牛不相及，从理论上讲就没有结合的可能，只是形式上的融合罢了。故出现西医对治疗不了的疾病只好求助中医，而中医则往往采用西医诊断中医治疗，以及中西治疗法一块用的局面。 至于循证医学、比较医学、后现代医学、行为医学等所谓“医学”，都称不上一门独立的医学科学，关于这一点在灵魂医学有关章节中将有相关点评。 总之，目前以中西医学为主的世界各种医学科学都存在不完整性的瑕疵，即都是以不完整的人为研究对象的医学科学，故不能解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学史上一切疑难模糊问题，成为阻碍医学科学前进的羁

14、绊。的确，要解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学上一切疑难模糊问题，显然已完全超出了中西医学所涉及的范畴，我们必须跳出中西医学的理论框架，建立起一个新的医学理论体系 - 东方医学和西方医学（即西医）的融合形成现代系统医学。该体系所涉及的一切问题不管从广度上，还是从深度上，都应该远远超过现有的中西医学理论，并将现有中西医学理论纳入自己的理论框架范围之内。为了肩负起这一历史使命，原创人生、医学理论体系灵魂医学 soul medicine应运而生，她不但从宏观上或战略上圆满解释并解决了存在于人类医学及人文社会科学史上的一切疑难模糊问题，而且还能够使人们得以启迪人生，不得不重新认识人类自身、不得不重新认识人类赖以生存的这个多维世界。