端粒和端粒酶课件.ppt

1、文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 早在早在30年代，两名遗传学家年代，两名遗传学家Muller和和Mcclintock分别在不同的实验室用不同的分别在不同的实验室用不同的生物做生物做实验实验发现染色体末端结构对保持发现染色体末端结构对保持染色体的稳定十分重要，染色体的稳定十分重要，Muller将这一将这一结构命名为结构命名为端粒（端粒（telomere）。直到直到1985年年Greider等从四膜虫中真正证实了端粒等从四膜虫中真正证实了端粒的结构为极简单的的结构为极简单的6个核苷酸个核苷酸TTAGGG序序列的多次重复后发现了列的多次重复后发现了端粒

2、酶端粒酶(telomerase TRAP-eze) 。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒与端粒酶是当今生物学研究的热点。端粒与端粒酶是当今生物学研究的热点。 端粒是位于真核细胞染色体末端的核端粒是位于真核细胞染色体末端的核酸蛋白复合体酸蛋白复合体,其功能在于维持染色体的其功能在于维持染色体的稳定性和完整性。稳定性和完整性。 端粒酶是一种核酸核蛋白酶端粒酶是一种核酸核蛋白酶,能以自身能以自身的的RNA为模板合成端粒的重复序列为模板合成端粒的重复序列,以维持以维持端粒长度的稳定性。端粒长度的稳定性。 许多研究表明许多研究表明,端粒、端粒酶的功能失

3、端粒、端粒酶的功能失调将影响细胞的生物学行为，包括细胞周调将影响细胞的生物学行为，包括细胞周期的稳定性、细胞增殖、癌变、凋亡、衰期的稳定性、细胞增殖、癌变、凋亡、衰老。老。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒与端粒酶端粒与端粒酶一、端粒的结构与功能一、端粒的结构与功能 1972年年James Watson提出了提出了“复制末端问复制末端问题题”，复制，复制DNA的的DNA多聚酶并不能将线性染色多聚酶并不能将线性染色体末端的体末端的DNA完全复制。也就是说在线性完全复制。也就是说在线性DNA复复制时，制时，DNA多聚酶留下染色体末端一段多聚酶留下

4、染色体末端一段DNA（一一段端粒）不复制。段端粒）不复制。 端粒端粒DNA复制的特点是在每次复制的特点是在每次DNA 复制中，复制中，每条染色体的每条染色体的3端均有一段端均有一段DNA无法得到复制，无法得到复制，随着细胞每次分裂，染色体随着细胞每次分裂，染色体3一末端将持续丧失一末端将持续丧失50-200bp的的DNA，因而细胞分裂具有一定的限度，因而细胞分裂具有一定的限度，即分裂寿命。所以端粒的长度可作为细胞的即分裂寿命。所以端粒的长度可作为细胞的“分分裂时钟裂时钟”，反映细胞分裂能力。，反映细胞分裂能力。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 真核

5、细胞染色体末端会随着细胞分裂而真核细胞染色体末端会随着细胞分裂而缩短，这个缩短的端粒再传给子细胞后，缩短，这个缩短的端粒再传给子细胞后，随细胞的再次分裂进一步缩短。随着每次随细胞的再次分裂进一步缩短。随着每次细胞分裂，染色体末端逐渐缩短，直至细细胞分裂，染色体末端逐渐缩短，直至细胞衰老。人类体细胞遵循这个规则从细胞胞衰老。人类体细胞遵循这个规则从细胞出生到衰老，单细胞生物遵循这个规则分出生到衰老，单细胞生物遵循这个规则分裂后定有其它机制保持单细胞生物传代存裂后定有其它机制保持单细胞生物传代存活，生殖细胞亦如此。活，生殖细胞亦如此。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系

6、网站或本人删除。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。端粒端粒：是真核细胞线性染色体末端特殊结构。是真核细胞线性染色体末端特殊结构。 由端粒由端粒DNA和端粒相关蛋白组成。和端粒相关蛋白组成。 端粒端粒DNA：为不含功能基因的简单、高度重复序列为不含功能基因的简单、高度重复序列, 在生物进化过程中具有高度保守性。在生物进化过程中具有高度保守性。 不同物种的端粒不同物种的端粒DNA 序列存在差异序列存在差异。 人类及其它脊椎动物染色体端粒的结构是5TTAGGG3的重复序列, 长约15kb。体细胞的端粒有限长度（telomere restriction fr

7、agments TRFS）大多数明显短于生殖细胞，青年人的TRFs又显著长于年长者，提示TRFs随着细胞分裂或衰老，在不断变短，主要是由于DNA聚合酶不能完成复制成线性DNA末端所致。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒端粒DNA由两条互相配对的由两条互相配对的DNA 单链组成单链组成, 其其双链部分通过与端粒结合蛋白质双链部分通过与端粒结合蛋白质TRF1和和TRF2 结合结合共同组成共同组成t环环(t loops)。这种这种t 环特殊结构可维持染色环特殊结构可维持染色体末端的稳定体末端的稳定,保持染色体及其内部基因的完整性保持染色体及其内部基因

8、的完整性,从从而使遗传物质得以完整复制。缺少端粒的染色体不而使遗传物质得以完整复制。缺少端粒的染色体不能稳定存在。能稳定存在。 端粒端粒DNA与结构蛋白形成的复合物如同染色体与结构蛋白形成的复合物如同染色体的一顶的一顶“帽子帽子”，它既可保护染色体不被降解，又，它既可保护染色体不被降解，又避免了端粒对端融合（避免了端粒对端融合（end-end fusion）以及染色体以及染色体的丧失，同时端粒能帮助细胞识别完整染色体和受的丧失，同时端粒能帮助细胞识别完整染色体和受损染色体。在生理情况下，端粒作为细胞损染色体。在生理情况下，端粒作为细胞“分裂时分裂时钟钟”能缩短，最终导致细胞脱离细胞周期。能缩短

9、，最终导致细胞脱离细胞周期。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。端粒的结构特点GT链的5 3总是指向染色体的末端。重复次数不保守。 链区内有缺口即游离的3-端羟基存在。 DNA的最末端不能进行末端标记，推测其分子是一个回折结构。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。二、端粒酶的结构与功能二、端粒酶的结构与功能 在端粒被发现以前，人们就推测生殖细胞之所在端粒被

10、发现以前，人们就推测生殖细胞之所以能世代相传，其中可能存在一种维持端粒长度的以能世代相传，其中可能存在一种维持端粒长度的特殊机制，体细胞可能正是由于缺乏这种机制，它特殊机制，体细胞可能正是由于缺乏这种机制，它的染色体末端才面临着致死性缺失（的染色体末端才面临着致死性缺失（deletion）的危的危险 。 因 此 在 正 常 人 体 细 胞 间 永 生 化 细 胞险 。 因 此 在 正 常 人 体 细 胞 间 永 生 化 细 胞（immortalized cells）及肿瘤细胞的转化过程中可及肿瘤细胞的转化过程中可能也存在着与生殖细胞类似的机制。这些细胞怎样能也存在着与生殖细胞类似的机制。这些细

11、胞怎样保持细胞具有继续分裂或长期分裂的能力呢？科学保持细胞具有继续分裂或长期分裂的能力呢？科学家们发现端粒确实随着每次分裂而缩短，但也会被家们发现端粒确实随着每次分裂而缩短，但也会被新合成的端粒片断再延长。科学家们怀疑，可能尚新合成的端粒片断再延长。科学家们怀疑，可能尚有末被发现的酶，该酶具有标准的有末被发现的酶，该酶具有标准的DNA多聚酶所不多聚酶所不具备的功能，能使已缩短的端粒延长，使科学家们具备的功能，能使已缩短的端粒延长，使科学家们兴奋的是到兴奋的是到1984年首先在四膜虫中证实了这种能使年首先在四膜虫中证实了这种能使端粒延长的酶端粒延长的酶端粒酶的存在。端粒酶的存在。 文档仅供参考，

12、不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒酶的结构端粒酶的结构 端粒酶在结构上为一核糖核蛋白复合体端粒酶在结构上为一核糖核蛋白复合体, ,由由RNA RNA 和和结合的蛋白质组成结合的蛋白质组成, ,是是RNARNA依赖的依赖的DNA DNA 聚合酶。它是一种聚合酶。它是一种特殊的能合成端粒特殊的能合成端粒DNADNA的酶的酶, ,通过明显的模板依赖方式每通过明显的模板依赖方式每次添加一个核苷酸。次添加一个核苷酸。 端粒酶实质上是一种特殊的逆转录酶端粒酶实质上是一种特殊的逆转录酶 端粒酶端粒酶RNA(hTR)RNA(hTR) 端粒酶逆转录酶（端粒酶逆转录酶（TERT

13、TERT） 端粒酶结合蛋白端粒酶结合蛋白（TEP） 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。端粒酶端粒酶RNA(hTR)RNA(hTR)端粒酶逆转录酶（端粒酶逆转录酶（TERTTERT）端粒酶结合蛋白（端粒酶结合蛋白（TEP）端粒酶端粒酶RNARNA是第一个被克隆的端粒酶是第一个被克隆的端粒酶组分。组分。端粒酶端粒酶RNARNA含有与同源端粒含有与同源端粒DNADNA序列序列TTAGGGTTAGGG的互补序列的互补序列, ,核糖核酸酶核糖核酸酶H H切割此模板区切割此模板区, ,能使体外消除端粒酶能使体外消除端粒酶延长端粒的功能。延长端粒的功能。人类人类T

14、ERTTERT（hTERThTERT）基因为一单拷贝基因基因为一单拷贝基因, ,定位于定位于5 5p15. 33 ,p15. 33 ,具有具有7 7个保守序列结构域单元和端粒酶特异性结构域单元个保守序列结构域单元和端粒酶特异性结构域单元T T。破坏破坏TERT TERT 将消除端粒酶活性并致端粒缩短。将消除端粒酶活性并致端粒缩短。TEP1TEP1、生存动力神经细胞基因生存动力神经细胞基因( (SMN) SMN) 产物产物、 hsp90hsp90 、 PinX1PinX1、 Est1p Est1p 和和Est3pEst3p 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人

15、删除。 端粒酶是在染色体末端不断合成端粒序端粒酶是在染色体末端不断合成端粒序列的酶，它可以维持端粒的长度，维持细胞列的酶，它可以维持端粒的长度，维持细胞增殖潜能。端粒酶以自身增殖潜能。端粒酶以自身RNA为模板合成端为模板合成端粒酶重复序列，具有粒酶重复序列，具有逆转录酶活性逆转录酶活性，它的活，它的活性不依赖于性不依赖于DNA聚合酶，对聚合酶，对RNA酶、蛋白酶酶、蛋白酶和高温均敏感。端粒酶活性表达能稳定端粒和高温均敏感。端粒酶活性表达能稳定端粒的长度，抑制细胞的衰老，在生殖细胞和干的长度，抑制细胞的衰老，在生殖细胞和干细胞中可检测到高水平的端粒酶活性。细胞中可检测到高水平的端粒酶活性。 文档

16、仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒酶的两个主要功能端粒酶的两个主要功能 一 是端粒酶能自主地对端粒DNA富含G的链进行延长，而富含G的链又能通过GC配对使其终端回折形成特殊的发卡结构，这样DNA复制时新链5端缺失就可以得到补齐，这就为真核生物解决了DNA末端复制问题。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。末端补齐机制末端补齐机制：55G-C配对回折35文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 另

17、一功能 是修复断裂的染色体末端，从而避免了外切酶对染色体DNA更多的切割，维护了基因组遗传的稳定性。断裂染色体末端即使没有完整的端粒重复序列存在，但如有富含G、T的DNA存在，它也能被端粒酶作为引物DNA并为之延伸端粒序列，从而修复染色体断裂末端。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。端粒端粒酶对细胞死亡和细胞永生化的影响端粒端粒酶对细胞死亡和细胞永生化的影响 GryfeR等于1997年提出了关于细胞衰老和永生学说，认为人的正常体细胞分裂次数达到界限时，染色体端粒长度缩短到一定程度，有丝分裂便不可逆地被阻断在细胞周期的G1期和G2/M期之间的某个时期，这

18、时的细胞便进入了老化期，随后死亡. 如果细胞被病毒感染，或p53、RB、p16INK4、ATM、APC等肿瘤抑制基因发生突变，或K ras等原癌基因被激活，或DNA错配修复基因(如hMSH2等)发生突变，或某些基因DNA序列发生了高度甲基化，或仅发生了低度甲基化，从而(在未发生核甘酸突变的情况下)改变了该基因的表达，此时细胞便能越过阻断点继续进行有丝分裂。随着有丝分裂进行，端粒长度不断缩短，缩短到一定程度时，染色体发生结构畸变，大部分细胞便死亡，少部分细胞激活了端粒酶活性，不断合成端粒DNA补充端粒的长度，端粒不再缩短，细胞便获得无限分裂增生能力而成为永生化细胞。这说是端粒-端粒酶假说。文档仅

19、供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 “端粒端粒酶假说端粒端粒酶假说”认为端粒酶的激活与细胞永认为端粒酶的激活与细胞永生化和恶性肿瘤的发生、发展密切相关。染色体末端的生化和恶性肿瘤的发生、发展密切相关。染色体末端的端粒端粒DNADNA进行性的缩短是限制人细胞寿命的先决条件。进行性的缩短是限制人细胞寿命的先决条件。相对地相对地, ,端粒酶的激活端粒酶的激活, ,合成端粒的合成端粒的DNADNA被认为是细胞永被认为是细胞永生化和癌症发展必需的一步。目前的资料证实生化和癌症发展必需的一步。目前的资料证实, ,端粒酶端粒酶对长期成活的组织和长期进行有丝分裂的细胞是必

20、需的。对长期成活的组织和长期进行有丝分裂的细胞是必需的。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 细胞的死亡过程分为两个阶段细胞的死亡过程分为两个阶段, , 当端粒缩短至一当端粒缩短至一关键性长度关键性长度2 2kb-4kb kb-4kb 时时, ,染色体的稳定性就会遭到破坏染色体的稳定性就会遭到破坏, ,细胞开始衰老进入细胞开始衰老进入M M1期期（mortality stage1 M M1）。在）。在M1期细胞对生长因子等失去反应，产生期细胞对生长因子等失去反应，产生DNA合成蛋白抑合成蛋白抑制因子，细胞周期检查点（制因子，细胞周期检查点（cell

21、cycle checkpoints）发发送周期停止信号，送周期停止信号，DNA合成停止，合成停止，DNA DNA 断裂断裂, ,导致细导致细胞胞G1G1期生长停滞期生长停滞, ,最终走向死亡最终走向死亡。如果这一过程中一些。如果这一过程中一些癌基因癌基因SV40T抗原、抗原、PRB ,p53 ,p16 PRB ,p53 ,p16 等抑癌基因失活等抑癌基因失活, ,丧失正常功能丧失正常功能, , 均能使均能使M1期的机制被抑制使细胞逃逸期的机制被抑制使细胞逃逸M1期，继续生长获得额外的增殖能力，此时端粒酶仍期，继续生长获得额外的增殖能力，此时端粒酶仍为阴性，端粒继续缩短，经过为阴性，端粒继续缩短

22、，经过20-30次分裂后，最终到次分裂后，最终到达达M2期期。细胞由于端粒过短。细胞由于端粒过短, ,基因不稳定基因不稳定, ,绝大多数细绝大多数细胞死亡胞死亡, ,只有极少数细胞由于端粒酶活性的上调或重新只有极少数细胞由于端粒酶活性的上调或重新激活激活, ,端粒的功能得到恢复端粒的功能得到恢复, ,基因重获稳定基因重获稳定, ,使细胞超越使细胞超越M M2期期, ,成为永生化细胞。成为永生化细胞。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒酶被抑制端粒酶被抑制 正常人体细胞正常人体细胞 端粒丢失端粒丢失 M1期阻滞期阻滞 SV40T抗原抗原 细胞分裂

23、停止细胞分裂停止 Rb、P53与病毒蛋白结合、突变与病毒蛋白结合、突变 M1M2期间隔期间隔 永生化永生化 双着丝粒形成双着丝粒形成 M2期退化期退化 染色体失稳染色体失稳 端粒酶被激活端粒酶被激活 细胞凋亡细胞凋亡 端粒酶在人体细胞永生性转化端粒酶在人体细胞永生性转化中中文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 在年老患者中有一个过早的端粒缩短，在年老患者中有一个过早的端粒缩短，进而缩短的端粒允许染色体融合，这些现进而缩短的端粒允许染色体融合，这些现象与年老患者的细胞中或培养的老化细胞象与年老患者的细胞中或培养的老化细胞中染色体组型衰老异常的高发生率密切

24、相中染色体组型衰老异常的高发生率密切相关。既然端粒酶活性表达能稳定端粒的长关。既然端粒酶活性表达能稳定端粒的长度，使端粒在细胞复制过程中不会丢失，度，使端粒在细胞复制过程中不会丢失，细胞衰老的进程也能被阻止，从而寿命延细胞衰老的进程也能被阻止，从而寿命延长长这正是人们研究的端粒酶与抗衰老这正是人们研究的端粒酶与抗衰老关系的新热点。关系的新热点。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒酶延长端粒长度以减慢细胞衰老最早端粒酶延长端粒长度以减慢细胞衰老最早的证据来自的证据来自BodnarBodnar等的研究，等的研究，19981998年其在年其在Scien

25、ceScience上刊文报道：将人的端粒酶基因导入上刊文报道：将人的端粒酶基因导入端粒酶阴性的正常人体细胞中激活其表达并培端粒酶阴性的正常人体细胞中激活其表达并培养细胞，然后与未导入该基因的细胞比较，发养细胞，然后与未导入该基因的细胞比较，发现前者端粒明显增长，细胞分裂旺盛，细胞寿现前者端粒明显增长，细胞分裂旺盛，细胞寿命比后者大大延长，更令人关注的是细胞并无命比后者大大延长，更令人关注的是细胞并无肿瘤样改变。肿瘤样改变。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 端粒酶活化是肿瘤的显著特征端粒酶活化是肿瘤的显著特征 尽管有研究认为端粒长度维持还可以借助于

26、非尽管有研究认为端粒长度维持还可以借助于非端粒酶依赖模式，即端粒替代延长（端粒酶依赖模式，即端粒替代延长（altematire altematire Lengthening of telomere ALTLengthening of telomere ALT）机制，但其存在机制，但其存在上并不能否认永生化细胞中端粒酶的重要作用。自上并不能否认永生化细胞中端粒酶的重要作用。自从从19941994年年KimKim等创立等创立TRAPTRAP法检测端粒酶活性以来，法检测端粒酶活性以来，越来越多的文献证明端粒酶活性在大多数人类原发越来越多的文献证明端粒酶活性在大多数人类原发性肿瘤标本及肿瘤衍生细胞系中

27、可被检测到。美国性肿瘤标本及肿瘤衍生细胞系中可被检测到。美国学者在学者在400多例来源于多例来源于12 种不同组织的原发肿瘤病种不同组织的原发肿瘤病例中，肿瘤组织的端粒酶阳性率高达例中，肿瘤组织的端粒酶阳性率高达84.8，而肿，而肿瘤周围组织或良性病变中阳性率仅为瘤周围组织或良性病变中阳性率仅为4.4。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 附表附表 人体组织中端粒酶活性人体组织中端粒酶活性 肿瘤部位/类型 与肿瘤邻近正常组织/良性病变 肿瘤组织（%）肺3/68（4.4%）109/136（80.1%）乳腺2/28（7.1%）19/24（79.6%）前列腺

28、1/18（5.6%）23/27（85.1%）结肠0/45（0）22/23（95.6%）肝1/1（100%）卵巢0/8（0）7/7（100%）肾0/55（0）40/55（72.7%）神经母细胞瘤 0/17（0）94/100（94%）血液（淋巴瘤，CLL ALL） 21/23（91.3%）脑6/8（75%）其它（头顶部，Wilms瘤） 8/93（8.6%） 24/26 (92.3) 合计 14/332 （4.2%） 365/430 (84.8)文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 以端粒酶为靶标的抗癌药物研究以端粒酶为靶标的抗癌药物研究 在在85%85%以

29、上的肿瘤细胞和组织中高度表达端粒酶，以上的肿瘤细胞和组织中高度表达端粒酶，因此端粒酶是一个较理想的抗肿瘤药物靶标。因此端粒酶是一个较理想的抗肿瘤药物靶标。(1)(1)使用端粒酶抑制剂后使用端粒酶抑制剂后, ,肿瘤细胞端粒缩短直至足肿瘤细胞端粒缩短直至足以对增殖产生负面效应；以对增殖产生负面效应；(2)(2)端粒酶抑制剂对人表达端粒酶的体细胞可能有作端粒酶抑制剂对人表达端粒酶的体细胞可能有作用用, ,例如造血干细胞、生殖细胞、表皮基层细胞和肠例如造血干细胞、生殖细胞、表皮基层细胞和肠腺管细胞腺管细胞, ,但这种作用可能很小但这种作用可能很小, ,因为新生组织的干因为新生组织的干细胞比肿瘤细胞的端

30、粒要长得多。在细胞静止期细胞比肿瘤细胞的端粒要长得多。在细胞静止期, ,端端粒不缩短粒不缩短, ,端粒酶几乎没有活性。端粒酶几乎没有活性。端粒酶抑制剂对肿端粒酶抑制剂对肿瘤细胞和端粒酶阳性的正常细胞的作用是不同的瘤细胞和端粒酶阳性的正常细胞的作用是不同的:肿肿瘤细胞对端粒酶抑制剂很敏感瘤细胞对端粒酶抑制剂很敏感,作用一定时间后细胞作用一定时间后细胞出现生长抑制或凋亡出现生长抑制或凋亡;生殖细胞在端粒酶抑制剂的作生殖细胞在端粒酶抑制剂的作用下用下,端粒长度稍有缩短端粒长度稍有缩短,然后继续生长然后继续生长,端粒不再缩端粒不再缩短。短。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系

31、网站或本人删除。端粒酶抑制剂的研究进展端粒酶抑制剂的研究进展一、以粒酶酶一、以粒酶酶RNA为靶标为靶标通过阻断端粒酶通过阻断端粒酶RNA的模板作用对端粒酶活性的抑的模板作用对端粒酶活性的抑制制 1、反义寡核苷酸是端粒酶抑制剂研究领域中的热点,它是与靶RNA 配对的一段短链DNA。按碱基配对原理与靶RNA 形成杂合体,被动和主动地抑制RNA 的逆转录。 2、核酶对端粒酶活性的抑制，核酶是具有特殊核酸内切酶活性的小分子RNA，通过催化中心的反义序列识别靶位。核酶有望成为广谱，低毒，高效的抗癌新药。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。二、抑制端粒酶逆转录酶

32、活性二、抑制端粒酶逆转录酶活性1、hTERT 突变突变 在体内和体外实验中,hTERT 突变后端粒酶活性均明显被抑制。2、逆转录酶抑制剂、逆转录酶抑制剂( reverse transcriptase inhibitors ,RTI) 由于端粒酶是RNA 依赖的DNA聚合酶,所以RTI可以成为肿瘤治疗药物。其中对于齐多夫定的研究最多。3 3、靶向、靶向hTERT mRNAhTERT mRNA的的ASODNASODN 针对hTERTmRNA 设计的ASODN 能选择性地与靶基因杂交,阻断靶基因的表达。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。三、三、G四联体的稳

33、定四联体的稳定 端粒3端突出链富含鸟苷,在体外可形成四链DNA 结构,称为G四联体。形成G四联体后端粒酶活性受到抑制。因此,能稳定G四联体的药物就可能是有效的端粒酶抑制剂。已发现很多此类化合物,这些药物可以抑制端粒酶,但尚无缩短端粒的报道。四、小分子抑制剂四、小分子抑制剂 通过分子结构模拟软件进行拟合分析，或通过其他高通量模式快速筛选端粒酶的小分子抑制剂是近年来发展较快的一个领域,此方法是基于化学结构的生物信息学策略去搜寻先导化合物,用这一策略已发现了几个端粒酶抑制剂(例如FJ5002) ,但其作用机制尚不清楚。 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。问

34、题与展望问题与展望 一、问题一、问题1、检测方法在临床的可操作性及稳定性；、检测方法在临床的可操作性及稳定性；2、缺乏灵敏度和特异性高的定量准确的检测方法；、缺乏灵敏度和特异性高的定量准确的检测方法；3、端粒和端粒酶新组分的克隆和鉴定；、端粒和端粒酶新组分的克隆和鉴定；4、肿瘤细胞的端粒维持及调控机制；、肿瘤细胞的端粒维持及调控机制；5、端粒酶动力学、端粒酶作用及调控的确切机制。、端粒酶动力学、端粒酶作用及调控的确切机制。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。二、研究展望二、研究展望 大量实验表明，端粒酶可有效地调控端粒的大量实验表明，端粒酶可有效地调控

35、端粒的长度，而端粒的长度直接对细胞的增殖或凋亡起作长度，而端粒的长度直接对细胞的增殖或凋亡起作用，从而决定人体寿命的长短。随着对端粒、端粒用，从而决定人体寿命的长短。随着对端粒、端粒酶结构和端粒酶激活及调节机制的深入研究酶结构和端粒酶激活及调节机制的深入研究, ,端粒端粒酶与人类衰老和肿瘤发生、发展的关系将进一步明酶与人类衰老和肿瘤发生、发展的关系将进一步明确确; ; 如何将端粒酶检测作为肿瘤诊断标记仍是今后如何将端粒酶检测作为肿瘤诊断标记仍是今后研究的方向。研究的方向。 同时进一步探讨端粒、端粒酶和衰老因素、长同时进一步探讨端粒、端粒酶和衰老因素、长寿因素之间的关系，以及开展克隆人端粒基因等科寿因素之间的关系，以及开展克隆人端粒基因等科研课题对于研究人体衰老与抗衰老有着十分重要的研课题对于研究人体衰老与抗衰老有着十分重要的意义。意义。文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。烦请各位智者慧者 耐心指教！