药敏试验ppt课件.ppt
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1、抗菌药物敏感性试验抗菌药物敏感性试验Antimicrobial Sensitivity Test1药敏试验的概述第 一 章2第一节第一节 药敏试验的定义药敏试验的定义药敏试验简称药物敏感试验(或耐药试验)。旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度,以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。一种抗生素如果以很小的剂量便可抑制、杀灭致病菌,则称该种致病菌对该抗生素“敏感”。反之,则称为“不敏感”或“耐药”。定义3当前,“对症下药”已经变得难以奏效。首先,致病菌的种类发生了改变,一种疾病可以由多种病原菌所引起,包括致病菌和条件致病菌;其次,感染人群发生变化,从健康人群到老年人、长期使用激
2、素、免疫抑制剂及放疗、化疗的人群,临床症状常常不典型;最后,早期不规范使用抗生素,也会导致临床症状不典型。 对症下药第二节第二节 还能轻松对症下药吗?还能轻松对症下药吗?与此同时,“对菌下药”又难以获得满意效果。耐药菌尤其是多重耐药菌的出现,使临床医师按照抗生素的作用机制选择12种抗菌药物不能覆盖常见的病原菌。因此,药敏试验成为临床工作的重要手段之一。对菌下药4第三节第三节 药敏试验的意义药敏试验的意义BDAC 指导临床医生合理选择抗生指导临床医生合理选择抗生素素,ASTAST的结果为的结果为“耐药耐药”,则,则应更换药物应更换药物。 监测耐药性,分析耐药菌变监测耐药性,分析耐药菌变迁,掌握耐
3、药菌感染病流行病学,迁,掌握耐药菌感染病流行病学,控制和预防耐药菌感染发生和流控制和预防耐药菌感染发生和流行。行。 提供所选择药物的依据;提供所选择药物的依据; 可预测抗菌药物治疗的效可预测抗菌药物治疗的效果果, “ “敏感敏感”治疗可能有效;治疗可能有效;“耐药耐药” ” 可能失败;可能失败;5药敏试验常用方法第 二 章6第一节第一节 药敏试验常用方法药敏试验常用方法01Kirby-Bauer法(法(K-B纸片琼脂扩散法)和纸片琼脂扩散法)和 直接纸片药敏法直接纸片药敏法纸片扩散法02 琼脂稀释法和肉琼脂稀释法和肉汤稀释法。汤稀释法。稀释法03抗生素浓度梯度法抗生素浓度梯度法-E 试试 验(
4、验(E-test)抗生素浓度梯度法7为了解致病菌对哪种抗菌素敏感,以合理用药,减少盲目性,往往应进行药物敏感试验。其大致方法是:从病人的感染部位采取含致病菌的标本,接种在适当的培养基上,于一定条件下培养;同时将分别沾有一定量各种抗生素的纸片贴在培养基表面(或用不锈钢圈,内放定量抗生素溶液),培养一定时间后观察结果。由于致病菌对各种抗生素的敏感程度不同,在药物纸片周围便出现不同大小的抑制病菌生长而形成的“空圈”,称为抑菌圈。抑菌圈大小与致病菌对各种抗生素的敏感程度成正比关系。于是可以根据试验结果有针对性地选用抗生素。YAO MIN SHI YAN DA ZHI FANG FAYAO MIN SH
5、I YAN DA ZHI FANG FA 第二节第二节 药敏试验大致方法药敏试验大致方法8试验原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中水分,溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC值愈小一、纸片扩散法一、纸片扩散法9判定标准一、药敏实验的结果,应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。 表一 药敏试验判定标准 具体对于不同的菌株,及不同的抗生素纸片需参照NCCLs
6、的标准或者CLSI标准。二、药物敏感实验判定标准参考表1,多黏菌素抑菌圈;在9毫米以上为高敏,69毫米为低敏,无抑菌圈为不敏。抑菌圈直径(毫米)抑菌圈直径(毫米)敏感度敏感度20以上极敏1520高敏1014中敏10以下低敏0不敏10试验原理 将药物混匀于琼脂培养基中,配制含不同浓度药物平板,使用多头接种器接种细菌,经孵育后观察细菌生长情况,以抑制细菌生长的琼脂平板所含药物浓度测得MIC。MIC:稀释法所测得的某抗菌药物能抑制被检菌肉眼可见生长的最低浓度二、稀释法二、稀释法11试验原理 E试条是一条 5mm50mm的无孔试剂载体,一面固定有预先制备的,浓度呈连续指数增长稀释抗生素,另一面有读数和
7、判别的刻度。将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上,经孵育过夜,围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈,圈的边缘与试条交点的刻度浓度即为抗生素抑制细菌的最低浓度。 三、三、抗生素浓度梯度法抗生素浓度梯度法-E 试试 验验12 结果判断和报告结果判断和报告 读取椭圆形抑菌读取椭圆形抑菌 圈与圈与E试验试条试验试条 的交界点值,即的交界点值,即 为为MIC值值13三种方法的比较三种方法的比较纸片扩散法纸片扩散法稀释法稀释法E-Test优点优点缺点缺点操作简单,重复性好;操作简单,重复性好;成本较低;无需特殊设备;成本较低;无需特殊设备;灵活选择抗菌药物;灵活选择抗菌药物;结果容易理解结果容易理解标准化方法,结果
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