微生物及无菌知识培训PPT课件.pptx
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- 微生物 无菌 知识 培训 PPT 课件
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1、 2018-07-232022-5-141 简单的说,微生物就是微小的生物。是一群简单的说,微生物就是微小的生物。是一群个体微小个体微小、结结构简单构简单、肉眼不能肉眼不能直接看到,必须借助光直接看到,必须借助光学显微镜学显微镜或或电子电子显微镜显微镜放在几百倍、几千甚至几万倍才能看到的放在几百倍、几千甚至几万倍才能看到的微小生物微小生物。微生物的概念微生物的概念微小微小生物生物个体个体微小微小结构结构简单简单肉眼不肉眼不能看到能看到借助借助显微镜显微镜2022-5-142微生物的分类微生物的分类病毒病毒立克次体立克次体支原体支原体细菌细菌放线菌放线菌螺旋体螺旋体真菌真菌2022-5-143微
2、生物的五大共性微生物的五大共性分布广分布广种类多种类多体积小体积小面积大面积大吸收多吸收多转化快转化快生产旺生产旺繁殖快繁殖快适应强适应强易变异易变异2022-5-1442022-5-145微生物生长所需营养物质微生物生长所需营养物质水分水分碳源碳源氮源氮源无机无机盐类盐类生长生长因子因子2022-5-146影响微生物生长的因素影响微生物生长的因素1营养物质营养物质2温度温度3PH值值4渗透压渗透压5氧气氧气2022-5-147微生物的生长繁殖周期微生物的生长繁殖周期延迟期延迟期对数期对数期稳定期稳定期衰亡期衰亡期2022-5-148菌落的概念菌落的概念单个或少数细菌细胞生长繁殖后,会形成以母
3、细胞为中心的一堆肉眼可见、单个或少数细菌细胞生长繁殖后,会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团,这就是菌落有一定形态构造的子细胞集团,这就是菌落生长生长繁殖繁殖形态形态构造构造母细胞母细胞为中心为中心子细胞子细胞集团集团肉眼肉眼可见可见2022-5-149芽孢芽孢某些细菌某些细菌(杆菌)(杆菌),在其,在其生活的某一阶段可于细胞生活的某一阶段可于细胞浆内形成圆形或卵圆形的浆内形成圆形或卵圆形的特殊结构称为芽孢。芽孢特殊结构称为芽孢。芽孢对干燥、热和化学药品的对干燥、热和化学药品的抵抗力较强。抵抗力较强。2022-5-1410灭菌的概念灭菌的概念用物理或化学方法杀灭传用物
4、理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物,播媒介上所有的微生物,使其达到无菌。通常是指使其达到无菌。通常是指杀灭或除去全部活的微生杀灭或除去全部活的微生物(包括繁殖体和芽孢)物(包括繁殖体和芽孢)2022-5-1411无菌的概念无菌的概念是指物体或任一介质是指物体或任一介质中没有活的微生物的中没有活的微生物的存在,即无论用何种存在,即无论用何种方法,检不出活的微方法,检不出活的微生物生物2022-5-1412灭菌保证水平灭菌保证水平 灭菌保证水平灭菌保证水平 (SALSAL) 灭菌处理后单位产品上存在活微生物灭菌处理后单位产品上存在活微生物的概率,通常表示为的概率,通常表示为 1010-n-n
5、,本规范规,本规范规定为定为 10 10 -6-6 ,即经灭菌处理后,每件物,即经灭菌处理后,每件物品中有菌生长的概率是品中有菌生长的概率是 1/101/106 6 。 F0=8F0=8为残存概率法为残存概率法 F0=12F0=12为过度杀灭为过度杀灭2022-5-1413举例说明举例说明 例如例如: 1,000,000: 1,000,000个细菌个细菌 死亡率为死亡率为90%90%每分每分钟钟 1st min.- 900,000 / 100,000 1st min.- 900,000 / 100,000 2nd min.- 90,000 / 10,000 2nd min.- 90,000 /
6、 10,000 3rd min.- 9,000 / 1,000 3rd min.- 9,000 / 1,000 4th min.- 900 / 100 4th min.- 900 / 100 5th min.- 90 / 10 5th min.- 90 / 10 6th min.- 9 / 1 6th min.- 9 / 1 7th min.- 0 7th min.- 02022-5-1414无菌药品的概念无菌药品的概念是指法定药品标准是指法定药品标准中列有无菌检查项中列有无菌检查项目的制剂和原料药,目的制剂和原料药,包括无菌制剂和无包括无菌制剂和无菌原料药。菌原料药。2022-5-1415按
7、生产工艺按生产工艺无菌药品分类无菌药品分类1. 1. 采用最终灭菌工艺的为最终灭菌产品采用最终灭菌工艺的为最终灭菌产品。2. 2. 部分或全部工序采用无菌生产工艺的为非最终灭菌产品。部分或全部工序采用无菌生产工艺的为非最终灭菌产品。2022-5-1416两种灭菌方式比较两种灭菌方式比较最终灭菌最终灭菌非最终灭菌非最终灭菌通过物理、化学方法杀死微通过物理、化学方法杀死微生物生物 安全安全 更易于法规部门接受更易于法规部门接受 最好的选择最好的选择 需考虑药物降解需考虑药物降解 工艺过程稳定工艺过程稳定 相对容易进行验证相对容易进行验证 不是所有药品都适合不是所有药品都适合通过无菌技术避免微生通过
8、无菌技术避免微生物污染物污染 风险高风险高 法规部门仔细审查法规部门仔细审查 应用普遍应用普遍 药物稳定性不受影响药物稳定性不受影响 工艺过程多变工艺过程多变 相对较难进行控制相对较难进行控制 适合所有药品适合所有药品2022-5-1417无菌操作的概念无菌操作的概念 指在操作中,采用或控制一指在操作中,采用或控制一定条件,尽量避免产品污染定条件,尽量避免产品污染微生物的一种操作方法程序。微生物的一种操作方法程序。为此目的,所用的一切物品、为此目的,所用的一切物品、环境,均应事先灭菌,操作环境,均应事先灭菌,操作也应在无菌操作室中进行也应在无菌操作室中进行2022-5-1418无菌意识无菌意识
9、2022-5-1419常用的灭菌方法常用的灭菌方法干热干热灭菌灭菌湿湿热热灭菌灭菌化学化学灭菌灭菌过滤过滤灭菌灭菌辐射辐射灭菌灭菌2022-5-14201 1、干热灭菌、干热灭菌干燥干燥条件条件160160170170 2 24 4小时;小时;180180200200 0.5 0.51 1小时;小时;250250 1 1小时。小时。135135145145 3 35 5小时;小时;2022-5-14212 2、湿热灭菌、湿热灭菌高压蒸汽高压蒸汽(纯蒸汽)(纯蒸汽)灭菌灭菌法是最为可靠的灭菌方法,法是最为可靠的灭菌方法,一般为一般为121121,2020分钟或分钟或115115,6060分钟分钟
10、,使用时,使用时需将空气排尽需将空气排尽。2022-5-1422气体灭菌法气体灭菌法利用环氧乙烷或利用环氧乙烷或甲醛杀微生物的甲醛杀微生物的一种方法。一种方法。液体液体灭菌法灭菌法是用药液杀灭微生物的方是用药液杀灭微生物的方法。通常使用的有乙醇法。通常使用的有乙醇(酒精)、甲酚、(酒精)、甲酚、苯酚苯酚水水或福尔马林水等。常用于或福尔马林水等。常用于气体、热不稳定的药品溶气体、热不稳定的药品溶液或原料的除菌。液或原料的除菌。化学灭菌化学灭菌2022-5-14234 4、过滤灭菌、过滤灭菌 过滤灭菌法过滤灭菌法, ,即用筛除或滤材吸附即用筛除或滤材吸附等物理方式除去微生物等物理方式除去微生物,
11、,是一种常是一种常用的灭菌方法。对不耐热液体用的灭菌方法。对不耐热液体, ,过过滤是唯一实用的灭菌方法滤是唯一实用的灭菌方法。 过滤法过滤法不是将微生物杀死,而是把不是将微生物杀死,而是把它们排除出去。它们排除出去。 过滤法过滤法的最大缺点是不能滤除病毒。的最大缺点是不能滤除病毒。2022-5-14245 5、辐射灭菌、辐射灭菌 紫外线灭菌法紫外线灭菌法 是利用照射紫外线杀灭微生物是利用照射紫外线杀灭微生物的一种方法。的一种方法。 波长:波长:200300nm200300nm; 高度:高度:1M1M; 使用寿命;使用寿命;2000h;2000h;2022-5-1425消毒的概念消毒的概念 用物
12、理或化学方法杀灭或清用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物,除传播媒介上的病原微生物,使其达到无害化。通常是指使其达到无害化。通常是指杀死病原微生物的繁殖体,杀死病原微生物的繁殖体,但不能破坏其芽孢。所以消但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的,不能代替灭毒是不彻底的,不能代替灭菌菌。2022-5-1426防腐的概念防腐的概念防止或抑制体外细防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法菌生长繁殖的方法2022-5-1427污染污染 污染的定义:污染的定义:当一个产品存在有不当一个产品存在有不需要的物质时,它即受到污染。需要的物质时,它即受到污染。 污染的形式:污染的形式:尘粒污染、微生物污尘粒污染
13、、微生物污染染 传播媒介:空气、水、表面、物料、传播媒介:空气、水、表面、物料、人人。2022-5-14280303衣着衣着0202水滴水滴0101人的头发人的头发和皮肤和皮肤0404化妆品和化妆品和珠宝手饰珠宝手饰 2022-5-1429人及其活动产生大量的人及其活动产生大量的尘埃粒子污染洁净室。尘埃粒子污染洁净室。人身上携带的各种微生人身上携带的各种微生物污染洁净室。物污染洁净室。手是一个重要的污染源。手是一个重要的污染源。口腔、鼻腔、头发也是口腔、鼻腔、头发也是污染源。污染源。2022-5-14308003500个/m3空气中107个/ml污染水140万个/cm2头皮上440万个两手上3
14、8亿个/g指甲垢2022-5-1431臭男人臭男人1000个以上/min男性750个以上/min女性不穿洁净服2022-5-1432穿洁净服10300个/min静止1501000个/min稍动9002500个/min行走70700个/次咳嗽40006万个/次喷嚏2022-5-1433人人是洁净室是洁净室最大最大的污染源,占的污染源,占90%90%左左右。右。洁净厂房设计规范洁净厂房设计规范 GB 50073-2013 GB 50073-2013所以在洁净室中,人的所以在洁净室中,人的数量数量和和活动活动应有特别严应有特别严格的限制。格的限制。2022-5-1434行为规范行为规范1 1、不要将
15、个人的手机手表首饰佩饰带入洁净区、不要将个人的手机手表首饰佩饰带入洁净区2 2、不要化妆或者使用容易造成洁净区污染的护理用品、不要化妆或者使用容易造成洁净区污染的护理用品3 3、工作服(手套、工作服(手套/ /头罩头罩/ /眼罩眼罩/ /鞋套)必须有效阻挡人体污染物鞋套)必须有效阻挡人体污染物4 4、不得用手开关门,要用背部或者肘部,最好是非接触式、不得用手开关门,要用背部或者肘部,最好是非接触式5 5、任何操作应尽可能轻缓,幅度要小,避免对气流的扰动、任何操作应尽可能轻缓,幅度要小,避免对气流的扰动6 6、手指接触培养皿取样,手消毒、手指接触培养皿取样,手消毒7 7、生产操作时候,不得落手接
16、触药品,身体任何部位应尽可能绕开产品上空、生产操作时候,不得落手接触药品,身体任何部位应尽可能绕开产品上空8 8、打开或者盖上培养皿是不得使身体任何部位经过上空、打开或者盖上培养皿是不得使身体任何部位经过上空9 9、触摸屏操作或者按键操作应使用手指背部、触摸屏操作或者按键操作应使用手指背部1010、物品洒落地上不要拣起来使用、物品洒落地上不要拣起来使用1111、工作服尽量不接触墙面、设备,任何时候不得接触地面、工作服尽量不接触墙面、设备,任何时候不得接触地面1212、接触药品前必须手消毒、接触药品前必须手消毒1313、尽可能不要讲话、尽可能不要讲话1414、站姿、坐姿、操作、站姿、坐姿、操作动
17、作一定要轻柔缓慢动作一定要轻柔缓慢2022-5-1435尘粒尘粒需要对环境中需要对环境中尘粒尘粒及及微微生物生物数量进行控制的房数量进行控制的房间(区域),其建筑结间(区域),其建筑结构、装备及其使用应当构、装备及其使用应当能够减少该区域内污染能够减少该区域内污染物的物的引入引入、产生产生和和滞留滞留微生物微生物控制控制数量数量2022-5-1436悬浮粒子悬浮粒子2022-5-1437微生物微生物2022-5-1438控制控制原则原则1 24 3如用高效滤器、电子自净气、臭如用高效滤器、电子自净气、臭氧发生器等氧发生器等对进入洁净室的空气对进入洁净室的空气充分地进行除菌或灭菌充分地进行除菌或
18、灭菌换气次数及最佳的进风口与回风换气次数及最佳的进风口与回风口的设计口的设计使室内微生物颗粒迅速而使室内微生物颗粒迅速而有效地吸收并被排出室外有效地吸收并被排出室外如不能防止,则应尽量限制其扩如不能防止,则应尽量限制其扩散散防止进入室内的人员防止进入室内的人员或物品散发细菌或物品散发细菌气流组织形式及合格的净化装修气流组织形式及合格的净化装修不让室内的微生物不让室内的微生物粒子积聚和衍生粒子积聚和衍生2022-5-14控制控制尘粒及微生物尘粒及微生物的意义的意义 微生物种类繁多,有的对人有益,微生物种类繁多,有的对人有益,有的有害,有的无益也无害。但在有的有害,有的无益也无害。但在药品生产过程
19、中,不可能对环境中药品生产过程中,不可能对环境中的各种微生物加以区别对待,为保的各种微生物加以区别对待,为保证药品的安全有效,需要对其进行证药品的安全有效,需要对其进行控制。空气中的微生物多数控制。空气中的微生物多数附着附着在在灰尘上,或以芽孢形式悬浮于空气灰尘上,或以芽孢形式悬浮于空气中,中,1m1m以下者处于以下者处于悬浮悬浮状态,状态,10m10m以上者会逐渐以上者会逐渐沉下来沉下来而形成而形成菌尘。所以也要对尘粒进行控制。菌尘。所以也要对尘粒进行控制。2022-5-1440控制控制尘粒及微生物尘粒及微生物的意义的意义 自自100100多年前出现注射用药至今,多年前出现注射用药至今,非肠
20、道所用医用制品中的热原对非肠道所用医用制品中的热原对人体的危害即人体的危害即热原反应热原反应已经人所已经人所共知共知; ;大量临床资料表明,注射剂大量临床资料表明,注射剂(尤其是静脉注射剂)如污染了(尤其是静脉注射剂)如污染了7 712m12m的尘粒,可导致的尘粒,可导致热原反热原反应应、肺动脉炎、微血栓或异物肉、肺动脉炎、微血栓或异物肉芽肿等,严重的还会致人死命。芽肿等,严重的还会致人死命。而如果污染了细菌,轻则局部红而如果污染了细菌,轻则局部红肿化脓,重则引起全身细菌性感肿化脓,重则引起全身细菌性感染。染。2022-5-1441控制控制尘粒及微生物尘粒及微生物的意义的意义 注入人体的注射剂
21、中含有热原量达注入人体的注射剂中含有热原量达1g/kg1g/kg就可引起不良反应,发热反应就可引起不良反应,发热反应通常在注入通常在注入1 1小时后出现,可使人体小时后出现,可使人体产生发冷、寒颤、发热、出汗、恶心、产生发冷、寒颤、发热、出汗、恶心、呕吐等症状,有时体温可升至呕吐等症状,有时体温可升至4040以以上,严重者甚至昏迷、虚脱,如不及上,严重者甚至昏迷、虚脱,如不及时抢救,可危及生命。该现象称为时抢救,可危及生命。该现象称为“热原反应热原反应”。 2022-5-1442败血症流败血症流行事件行事件山东欣弗山东欣弗注射剂注射剂黑龙江刺五黑龙江刺五加注射剂加注射剂国内外染菌注射国内外染菌
22、注射剂致死事件剂致死事件200820082006200619701970历史药害事件回顾历史药害事件回顾2022-5-1443 什么是热原2022-5-1444发展历程发展历程18761876年年19211921年年 18761876年从腐肉年从腐肉中分离出一种中分离出一种不带活菌不带活菌而而能能致热致热的物质的物质, ,当当时称之为热原。时称之为热原。19211921年以后年以后, ,逐渐认识到这逐渐认识到这些药液之所以些药液之所以引致发热引致发热, ,系系因被因被微生物污微生物污染染因微生物代因微生物代谢产物所致。谢产物所致。19421942年年19421942年美国年美国把热原家兔试把热
23、原家兔试验法收载入药验法收载入药典后典后, ,发现霉发现霉菌菌, ,立克次氏立克次氏休、病毒、酵休、病毒、酵母菌也能产生母菌也能产生热原。热原。2022-5-1445国内国内GMPGMP可可以接受的观点以接受的观点是:不存在细是:不存在细菌内毒素意味菌内毒素意味着不存在热原。着不存在热原。国内国内欧洲药典委欧洲药典委员会副主席员会副主席业内业内医药工业普遍医药工业普遍接受控制内毒接受控制内毒素等于控制热素等于控制热原。原。严格地讲,不是严格地讲,不是每一种热原都具每一种热原都具有脂多糖的结构,有脂多糖的结构,但所有已知的细但所有已知的细菌内毒素脂多糖菌内毒素脂多糖都有热原活性都有热原活性”。2
24、022-5-1446目前国内外仍未有统目前国内外仍未有统一的认识,但从国内一的认识,但从国内外文献报道中,一个外文献报道中,一个共同的意见,都普遍共同的意见,都普遍认为:它是指细菌认为:它是指细菌内内毒素毒素的的脂多糖脂多糖。2022-5-1447热原的概念热原的概念系指能引起恒温动系指能引起恒温动物体温异常升高的物体温异常升高的致热物质致热物质,是微生,是微生物在生长繁殖过程物在生长繁殖过程中产生的一种能引中产生的一种能引起恒温动物体温异起恒温动物体温异常升高的常升高的内在的毒内在的毒素素。2022-5-1448细菌毒素分类细菌毒素分类 一类为一类为外毒素外毒素:它是一种毒性蛋白质,是:它是
25、一种毒性蛋白质,是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细菌主要是质。产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性革兰氏阳性菌菌。 一类为一类为内毒素内毒素:是:是革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌的的细胞壁细胞壁的一种脂多糖和微量蛋白结合的复合物。的一种脂多糖和微量蛋白结合的复合物。它的特殊性不是细菌或细菌的代谢产物,它的特殊性不是细菌或细菌的代谢产物,而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。内毒素主要具有内毒素生物活性的物质。内毒素主要的化学成分是的化学成分是脂多糖脂多糖中的中的类脂类脂A A成分成分。2
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