肠道微生态研究进展-ppt课件.ppt

1、1肠道微生态研究新进展肠道微生态研究新进展 2022-5-112 人体实为由自体细胞与微生人体实为由自体细胞与微生物细胞共同组成的超级生物体，物细胞共同组成的超级生物体，其中肠道内微生物数量与种类最其中肠道内微生物数量与种类最为庞大，约为为庞大，约为l0l01414个、上千种，个、上千种，以细菌为主。即使目前生物科学以细菌为主。即使目前生物科学技术日益趋于完善，但仍有超过技术日益趋于完善，但仍有超过7070的肠道微生物不能被分类。的肠道微生物不能被分类。2022-5-113 应用肠道菌群的宏基因组测序技应用肠道菌群的宏基因组测序技术分析发现，人类肠道微生物包含术分析发现，人类肠道微生物包含30

2、0300万个基因，是人类基因的万个基因，是人类基因的150150倍。倍。但是，目前对作为一个整体的宏基但是，目前对作为一个整体的宏基因组肠道微生物组的了解甚少，现因组肠道微生物组的了解甚少，现在，已知人体肠道微生物基因不到在，已知人体肠道微生物基因不到1%1%。2022-5-114 人类肠道微生物群落被人类肠道微生物群落被认为是人类的认为是人类的“第二指纹第二指纹”及及“第二基因组第二基因组”2022-5-11520072007年年( (DNA Research)DNA Research)杂志杂志) )： 服部教授对肠内细菌种类和基因服部教授对肠内细菌种类和基因进行调查。发现人与人之间的肠内细

3、进行调查。发现人与人之间的肠内细菌群并不相似。菌群并不相似。“6565亿人，每个人都亿人，每个人都有自己特有的肠内细菌群，即使是同有自己特有的肠内细菌群，即使是同卵的双胞胎，肠内细菌群也不相同卵的双胞胎，肠内细菌群也不相同”2022-5-116 肠道菌群，尤其是结肠菌群，肠道菌群，尤其是结肠菌群，是微生物密度最高的菌落。已报是微生物密度最高的菌落。已报道的肠道细菌包括道的肠道细菌包括200200多种菌属，多种菌属，共共800800余菌种，菌株种类则达余菌种，菌株种类则达70007000余种仍有超过余种仍有超过7070的肠道微的肠道微生物不能被分类，且超过生物不能被分类，且超过9O 9O 无法无

4、法通过培养方法鉴定。通过培养方法鉴定。2022-5-1172022-5-118 肠道菌群作为机体的体外器官，其最显著特征是他构成的稳定性，通过肠道菌群作为机体的体外器官，其最显著特征是他构成的稳定性，通过影响食物代谢和消化道功能与结构，同时产生大量的生物活性代谢分子而发影响食物代谢和消化道功能与结构，同时产生大量的生物活性代谢分子而发挥激素样效应，从而参与宿主的物质代谢，促进宿主营养物质消化吸收，在挥激素样效应，从而参与宿主的物质代谢，促进宿主营养物质消化吸收，在维持肠道正常生理功能、调节机体免疫以及拮抗微生物的定植方面发挥了重维持肠道正常生理功能、调节机体免疫以及拮抗微生物的定植方面发挥了重

5、要作用。要作用。2022-5-119 美国国家卫生院自美国国家卫生院自20072007年年l2l2月开始进行人体代谢组计月开始进行人体代谢组计划划(Human (Human MicrobiomeMicrobiome Project)Project)，目标之一就是要完，目标之一就是要完全了解肠内全了解肠内细细菌的特性。菌的特性。 2022-5-1110 2008 2008年欧盟人类肠道元年欧盟人类肠道元基因组计划的启动。该领基因组计划的启动。该领域研究受到空前的重视。域研究受到空前的重视。2022-5-1111 进入进入2121世纪后，相关项目世纪后，相关项目数量位居前列的单位包括浙数量位居前列

6、的单位包括浙江大学、南京军区南京总医江大学、南京军区南京总医院、上海交通大学。院、上海交通大学。2022-5-1112 南京军区总医院黎介寿院南京军区总医院黎介寿院士团队对肠道菌群与肠粘膜士团队对肠道菌群与肠粘膜屏障、肠道菌群与小肠移植屏障、肠道菌群与小肠移植等的关系进行了深入研究。等的关系进行了深入研究。 2022-5-1113 浙江大学李兰娟院士团队浙江大学李兰娟院士团队在肠道微生态与慢性肝病的在肠道微生态与慢性肝病的关系方面做了大量工作，发关系方面做了大量工作，发现肝硬化粪便菌群与正常人现肝硬化粪便菌群与正常人群比较有明显变化并与预后群比较有明显变化并与预后有关。有关。2022-5-11

7、14李兰娟院士团队李兰娟院士团队今年发表文章：应用宏基因组学的研究方法， 开展了肝硬化肠道菌群的深度测序及关联分析研究。 建立了世界上首个肝病肠道菌群基因集，其中36.1的基因为首次发现。 上海交通大学赵立平团队，研究上海交通大学赵立平团队，研究方向集中于肠道菌群、宿主遗传背方向集中于肠道菌群、宿主遗传背景、饮食等因素相互作用与肥胖、景、饮食等因素相互作用与肥胖、胰岛素抵抗等代谢综合征不同表型、胰岛素抵抗等代谢综合征不同表型、肠道炎症肿瘤的关系，发表了创肠道炎症肿瘤的关系，发表了创新性的成果。新性的成果。 2022-5-1116细菌鉴定细菌鉴定 一：传统测定法在肠道一：传统测定法在肠道菌群的测

8、定中，传统的分菌群的测定中，传统的分离检测方法目前仍被广泛离检测方法目前仍被广泛地采用。主要步骤是采集地采用。主要步骤是采集病人的粪便或肠内容物，病人的粪便或肠内容物，然后进行微生物培养计数然后进行微生物培养计数或涂片观察。或涂片观察。2022-5-11172022-5-11182022-5-1119 二：二：分子生物学测定法，近年来分分子生物学测定法，近年来分子生物学技术运用于菌群的测定刚子生物学技术运用于菌群的测定刚刚兴起，该方法的应用主要得益于刚兴起，该方法的应用主要得益于两项关键技术的发明，一是实时荧两项关键技术的发明，一是实时荧光定量光定量PCRPCR技术，即技术，即Real tim

9、e PCRReal time PCR；另一个是变性梯度凝胶电泳另一个是变性梯度凝胶电泳(DGGE)(DGGE)技术。技术。2022-5-1120 用于菌株鉴定的用于菌株鉴定的16SrRNA16SrRNA分析。分析。但较之传统方法，其操作复杂，但较之传统方法，其操作复杂，所需的实验条件高，目前临床所需的实验条件高，目前临床的应用较少，主要用于科研性的应用较少，主要用于科研性检测。但随着技术的发展，分检测。但随着技术的发展，分子生物学测定法将会在临床检子生物学测定法将会在临床检测中逐渐应用。测中逐渐应用。2022-5-1121 目前，存在于肠道的正常菌目前，存在于肠道的正常菌群包括类杆菌、乳杆菌、

10、大肠群包括类杆菌、乳杆菌、大肠埃希菌和肠球菌等，尚有少数埃希菌和肠球菌等，尚有少数过路菌，如金黄色葡萄球菌、过路菌，如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、副大肠杆菌、铜绿假单胞菌、副大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、产气荚产气杆菌、变形杆菌、产气荚膜杆菌、白色念珠菌等。膜杆菌、白色念珠菌等。2022-5-1122乳酸杆菌乳酸杆菌2022-5-1123双岐杆菌双岐杆菌2022-5-1124肠道微生态平衡被打破2022-5-11252022-5-1126 由于对人体微生态平衡的重要性认由于对人体微生态平衡的重要性认识不足，临床上滥用、泛用抗菌药物识不足，临床上滥用、泛用抗菌药物而诱发的微生态失调现象屡见不鲜

11、，而诱发的微生态失调现象屡见不鲜，如假膜性肠炎、败血症、医院获得性如假膜性肠炎、败血症、医院获得性肺炎等，对病人、医院和社会均造成肺炎等，对病人、医院和社会均造成不同程度的损害或负担。不同程度的损害或负担。 抗生素和各种医疗操作是一把抗生素和各种医疗操作是一把“双刃剑双刃剑”，如果应用得当，可抑，如果应用得当，可抑制致病菌繁殖，有效控制细菌感染制致病菌繁殖，有效控制细菌感染性疾病，治愈疾病。但是，如果过性疾病，治愈疾病。但是，如果过度使用或滥用，则可能度使用或滥用，则可能“滥杀无滥杀无辜辜”，破坏微生态平衡，引起微生，破坏微生态平衡，引起微生态失调。态失调。 2022-5-11272022-5

12、-1128肠道微生态失衡分类 正常微生物群之间、正常微生物群与正常微生物群之间、正常微生物群与其宿主之间的微生态平衡，在外环境影响其宿主之间的微生态平衡，在外环境影响下，由下，由生理性组合生理性组合转变为转变为病理性组病理性组合合的状态，称为微生态失调的状态，称为微生态失调。 微生态失调可分为：微生态失调可分为： 菌群失调（比例失调）菌群失调（比例失调） 定位转移定位转移 自身感染自身感染 肠道菌群失调与下列肠外疾病有关；肠道菌群失调与下列肠外疾病有关；1 1 肺部过敏反应肺部过敏反应2 2 造血功能异常造血功能异常3 3 代谢性疾病代谢性疾病4 4 慢性疲劳综合征与抑郁焦虑症慢性疲劳综合征与

13、抑郁焦虑症5 5 肝性脑病肝性脑病6 6多器官功能衰竭多器官功能衰竭7 7与心血管系统疾病与心血管系统疾病8 8肿瘤肿瘤9 9衰老衰老2022-5-1129治疗治疗一：益生菌与益生元二：抗生素三：肠粘膜营养剂/粘膜保护剂/肠内营养技术四：粪菌移植(fecal microbiota transplantation，FMT)作为一种历史悠久且可以重建肠道菌群的疗法重新被临床所关注 粪菌移植是严重肠道菌群失调、严重便秘、难治性IBD、复发性难辨梭状芽胞杆菌感染的新型治疗措施，随着粪菌移植在消化道疾病、能量代谢、神经系统疾病、自身免疫性疾病中的应用和发展，其临床适应证将获进一步界定，粪菌移植的标准化操

14、作将推动其发展和应用。我们自己的一些工作我们自己的一些工作2022-5-1133 服药时间、年龄与SIBO相关性分析 服药时间 SIBO（） 年龄（岁） SIBO（） 24周 11 40.7 50 13 48.1 48周 26 76.5 5160 17 73.9 8周以上 15 71.4 61以上 22 68.8趋势卡方 X2=5.453, P=0.02 X2=2.465, P=0.116 待发表2022-5-1134 SIBO 影响因素Logistc回归分析 B S.E Wald df Sig Exp(B) 服药时间 .667 .340 3.846 1 0.50 1.949年龄 .304 .

15、329 .857 1 .355 1.356性别 .044 .503 .007 1 .931 1.044学历 .045 .509 .008 1 .930 1.046职业 .126 .434 .085 1 .771 .881 待发表2022-5-1135 SIBO 组选择性去污后疗效比较 临床症状评估积分均数 治疗前 N 治疗后 N t值 P 腹痛 4.38 37 2.11 37 13.567 1.01015腹胀 4.64 45 2.51 45 13.443 2.61018 待发表2022-5-1136肠道通透性增加肠道通透性增加2022-5-1137肠屏障是阻止肠内肠屏障是阻止肠内细菌、细菌、LPS进入体进入体循环的第一道循环的第一道“防防线线”肠屏障功能受损，肠屏障功能受损，LPSLPS、细菌进入、细菌进入体循环体循环激活单核巨噬系统，释放炎症介质全身循环内毒素、内毒素、细胞因子细胞因子慢性炎症状态各种肠外疾病发展菌群失调“天地与我并生，而万物与我为一”2022-5-11382022-5-1139