临床微生物：变形杆菌属-枸橼酸杆菌属课件.ppt

1、变形杆菌属变形杆菌属枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属n掌握：形态、培养、生化和抗原特点掌握：形态、培养、生化和抗原特点n熟悉：致病性熟悉：致病性变形杆菌变形杆菌某地临床标本中肠杆菌科细菌的分布某地临床标本中肠杆菌科细菌的分布黏质沙雷菌 变形杆菌属变形杆菌属ProteusProteusprutju:s 变形杆菌属（变形杆菌属（Proteus）：肠杆菌科成员，）：肠杆菌科成员，现有现有5个种。个种。分类：分类：n 普通变形杆菌（普通变形杆菌（P. vulgaris）n 奇异变形杆菌（奇异变形杆菌（P. mirabilis）n 产黏变形杆菌（产黏变形杆菌（P. myxofaciens）n 潘氏变形杆菌（潘氏

2、变形杆菌（P. penneri）n 豪氏变形杆菌（豪氏变形杆菌（P. hauseri）n肠道正常菌群、环境菌。肠道正常菌群、环境菌。n致病因素致病因素有菌毛、内毒素、溶血毒素等，有菌毛、内毒素、溶血毒素等，脲酶脲酶与其致病与其致病有关。有关。n奇异变形杆菌奇异变形杆菌引起的感染最为常见，其次是普通变形杆引起的感染最为常见，其次是普通变形杆菌。最常见引起的感染为菌。最常见引起的感染为尿路感染尿路感染，还可引起创口感染、，还可引起创口感染、呼吸道、咽部、耳、眼部感染及败血症等。呼吸道、咽部、耳、眼部感染及败血症等。n某些菌株产生耐热肠毒素，污染食物可致某些菌株产生耐热肠毒素，污染食物可致食物中毒食

3、物中毒和和婴婴儿肠炎儿肠炎。临床意义临床意义 1. 形态结构形态结构n革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌，两端钝圆，形，两端钝圆，形态呈明显的多形性，可为杆状、态呈明显的多形性，可为杆状、球杆状、球形、丝状等。球杆状、球形、丝状等。n无荚膜，不形成芽胞无荚膜，不形成芽胞。有。有周身周身鞭毛鞭毛，运动活泼。，运动活泼。n有有菌毛菌毛，可粘附于细胞表面。，可粘附于细胞表面。生物学特性2. 培养特性培养特性n兼性厌氧兼性厌氧, ,营养要求不高，营养要求不高，10-4310-43。n在湿润的在湿润的营养琼脂平板（或血琼脂营养琼脂平板（或血琼脂平板）平板）上常呈扩散生长。形成以接上常呈扩散生长。形成以接种部位为中

4、心的厚薄交替的波纹状种部位为中心的厚薄交替的波纹状菌苔，称为菌苔，称为 （swarming growth swarming growth phenomenonphenomenon）。为本属细菌的特征）。为本属细菌的特征, ,此现象此现象可被苯酚或胆盐可被苯酚或胆盐等抑制。等抑制。迁徙生长现象迁徙生长现象生物学特性3. 生化反应生化反应n具有具有尿素酶尿素酶，能迅速分解尿素，是本菌重要生化，能迅速分解尿素，是本菌重要生化反应特征。反应特征。n发酵葡萄糖，产酸产气，发酵葡萄糖，产酸产气，多不发酵乳糖多不发酵乳糖，奇异变，奇异变形杆菌形杆菌产生产生H H2 2S S。n苯丙氨酸脱氢酶阳性苯丙氨酸脱氢

5、酶阳性。KIA: K A + +生物学特性10菌属名菌属名苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸脱氨酶葡萄糖酸盐或葡萄糖酸盐或VP变形杆菌属变形杆菌属普罗威登菌属普罗威登菌属摩根菌属摩根菌属克雷伯菌属克雷伯菌属肠杆菌属肠杆菌属沙雷菌属沙雷菌属哈夫尼菌属哈夫尼菌属埃希菌属埃希菌属志贺菌属志贺菌属沙门菌属沙门菌属枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属爱德华菌属爱德华菌属耶尔森菌属耶尔森菌属肠杆菌科的初步分群肠杆菌科的初步分群 4. 抗原构造抗原构造n变形杆菌属变形杆菌属O O抗原抗原有有4949个，为个，为分群分群的主要依据；有的主要依据；有H H抗原抗原，是，是分型分型的依据。的依据。O O抗原和抗原和H H抗原在本属不同种

6、抗原在本属不同种间有交叉，间有交叉，O O抗原与抗原与大肠埃希菌、沙门菌大肠埃希菌、沙门菌O O抗原间也抗原间也有交叉反应。有交叉反应。生物学特性n 另外，另外，普通变形杆菌普通变形杆菌X19X19、X2X2和和XkXk三个菌株的三个菌株的O O抗原抗原与与斑疹伤寒立克次体斑疹伤寒立克次体等有共同抗原，根据这一特点，临床等有共同抗原，根据这一特点，临床上可用普通变形杆菌上可用普通变形杆菌OX19OX19、OX2OX2和和OXkOXk代替立克次体作为代替立克次体作为抗原，与病人血清进行凝集试验，即抗原，与病人血清进行凝集试验，即外斐试验（外斐试验（Weil-Weil-Felix testFeli

7、x test），），以辅助诊断相应立克次体病。以辅助诊断相应立克次体病。 奇异奇异 产黏产黏 潘氏潘氏 普通普通 豪氏豪氏 变形杆菌变形杆菌 变形杆菌变形杆菌 变形杆菌变形杆菌 变形杆菌变形杆菌 变形杆菌变形杆菌 吲哚吲哚 + + + + 鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶 + + 七叶苷水解七叶苷水解 + + 麦芽糖发酵麦芽糖发酵 + + + + + + + + 木糖发酵木糖发酵 + + + + + + + + 水杨苷水解水杨苷水解 + + 氯霉素敏感性氯霉素敏感性 S S R V S 注：S：敏感；R：耐药；V：不定变形杆菌属种间鉴别变形杆菌属种间鉴别变形杆菌属与相似菌属的鉴别变形杆菌属与相似菌属的

8、鉴别 变形杆菌属变形杆菌属 普罗威登斯菌属普罗威登斯菌属 摩根菌属摩根菌属 迁徙生长迁徙生长 + - - H2S + - - 明胶液化明胶液化 + - - 西蒙枸橼酸盐西蒙枸橼酸盐 d + - 鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶 d - + 脂酶脂酶 + - -甘露醇甘露醇 - -/+ - 注：+：90%以上菌株阳性；：90%以上菌株阴性；d：25%75%阳性微生物学检微生物学检验验1. 检验程序检验程序（尿液、痰等）（尿液、痰等）肉汤增菌肉汤增菌血液等血液等n直接涂片直接涂片n菌株的培养与分离菌株的培养与分离 增菌肉汤、血平板、麦康凯。增菌肉汤、血平板、麦康凯。n鉴定：鉴定：2. 检验方法检验方法观察

9、菌落观察菌落( (迁徙现象）迁徙现象）涂片革兰染色涂片革兰染色G-bG-b氧化氧化酶、葡萄糖酶、葡萄糖F(F(定科试验定科试验)H2S + 、尿素酶尿素酶+、苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸脱氨酶+ （定属）（定属）种间鉴定。种间鉴定。微生物学检微生物学检验验IDENTIFICATIONnGram stain negative nFacultative anaerobes nMotile nRod shapednOxidase negative nReduce nitrate positivenProduce phenylalanine deaminase nProduce urease nH2S te

10、st positivenSwarming growth phenomenon枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属(Citrobacter)一、临床意义一、临床意义n肠道正常菌群肠道正常菌群n条件致病菌条件致病菌主要引起某些主要引起某些肠道外感染肠道外感染。n弗劳地枸橼酸杆菌（弗劳地枸橼酸杆菌（C.freundii）尿路感染尿路感染、菌血症及多种组织感染。、菌血症及多种组织感染。某地临床标本中肠杆菌科细菌的分布某地临床标本中肠杆菌科细菌的分布黏质沙雷菌 枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属(Citrobacter)二、微生物特性二、微生物特性1. 形态结构：形态结构：G-b，有鞭毛和菌毛、无芽孢和荚膜有鞭毛和菌毛、无芽

11、孢和荚膜2. 培养特性：培养特性：兼性厌氧，对营养要求不高。兼性厌氧，对营养要求不高。 菌落：菌落： 血平板灰白色、隆起湿润、不溶血。血平板灰白色、隆起湿润、不溶血。 肠道选择培养基肠道选择培养基多多发酵乳糖发酵乳糖、氟劳地产、氟劳地产硫化氢硫化氢 XLD平板平板：-不透明不透明红色或中心黑色红色或中心黑色菌落菌落杨氏枸橼酸杆菌在血平板上菌落（杨氏枸橼酸杆菌在血平板上菌落（18-24h）弗劳地枸橼酸杆菌在弗劳地枸橼酸杆菌在Mac平板平板上上(1824h)弗劳地橼酸杆菌在弗劳地橼酸杆菌在SS平板上菌落平板上菌落XLD平板-木糖赖氨酸去氧胆酸钠琼脂n主要成份及作用主要成份及作用： 木糖、乳糖、蔗糖

12、-底物（分解产酸） 硫代硫酸钠-提供生成硫化氢的硫 柠檬酸铁铵-检测硫化氢的产生 去氧胆酸钠-抑制G+菌和部分抑制E.coli 酚红-指示剂n应用应用：主要用于沙门菌和志贺菌的分离 志贺菌：红色菌落 沙门菌：边缘红色中间黑色菌落 弗劳地枸橼酸杆菌：边缘红色中间黑色菌落 其他枸橼酸杆菌：红色菌落克雷伯菌克雷伯菌枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属(Citrobacter)3. 生化特征：生化特征：n氧化酶（氧化酶（-）、触酶（）、触酶（+）、葡萄糖（、葡萄糖（AG)、硝酸盐、硝酸盐还原（还原（+）nKIA：AA+ +/-或或KA+ +/-nIMViC：+/- +-+n赖氨酸脱羧酶（赖氨酸脱羧酶（-）n枸橼酸

13、盐（枸橼酸盐（+）枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属(Citrobacter)三、微生物检验三、微生物检验1.标本的采集标本的采集2.标本直接检查标本直接检查:革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属(Citrobacter)3. 分离培养与鉴定分离培养与鉴定 分离培养分离培养:n血液及体液：血液及体液：增菌增菌n其他标本：其他标本：血平板、血平板、MAC或或XLD平板。平板。菌属名菌属名苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸脱氨酶葡萄糖酸盐葡萄糖酸盐变形杆菌属变形杆菌属普罗威登菌属普罗威登菌属摩根菌属摩根菌属克雷伯菌属克雷伯菌属肠杆菌属肠杆菌属沙雷菌属沙雷菌属哈夫尼菌属哈夫尼菌属埃希菌属埃希菌属志贺菌属志贺菌

14、属沙门菌属沙门菌属枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属爱德华菌属爱德华菌属耶尔森菌属耶尔森菌属肠杆菌科的初步分群肠杆菌科的初步分群 苯丙氨酸、葡萄糖酸盐阴性各属的鉴别苯丙氨酸、葡萄糖酸盐阴性各属的鉴别试验试验埃希菌属埃希菌属志 贺 菌志 贺 菌属属沙 门 菌沙 门 菌属属枸橼酸杆菌枸橼酸杆菌属属爱德华菌爱德华菌属属耶尔森耶尔森菌属菌属硫化氢硫化氢/ / /动力动力36363636 - - 2525 + +枸 橼 酸枸 橼 酸盐盐/ /靛基质靛基质/ / / /赖氨酸赖氨酸/ /+ +/ /尿素尿素/ / / 肠杆菌科鉴定系统nAPI系统nVITEK2系统n国内肠杆菌编码系统等等nBD凤凰100nWalkwaynMicroScan思考题思考题n变形杆菌的鉴定要点主要有哪些？变形杆菌的鉴定要点主要有哪些？n枸橼酸杆菌的鉴定要点主要有哪些？枸橼酸杆菌的鉴定要点主要有哪些？n上述两类细菌在临床主要引起哪些疾病？致病上述两类细菌在临床主要引起哪些疾病？致病原因和机制是什么？原因和机制是什么？n如何从一份中段尿液标本中分别检出上述两种如何从一份中段尿液标本中分别检出上述两种细菌？细菌？