临床病原学检查-ppt课件.ppt
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1、临床病原学检查临床病原学检查2020/11/132目的要求目的要求掌握:感染性疾病的诊断和治疗原则掌握:感染性疾病的诊断和治疗原则熟悉:感染性疾病病原学实验诊断及熟悉:感染性疾病病原学实验诊断及抗生素治疗的主要实验室监测方法抗生素治疗的主要实验室监测方法了解:病原学诊断的重要性,现代感了解:病原学诊断的重要性,现代感染的类型和病原微生物的变迁染的类型和病原微生物的变迁精品资料 你怎么称呼老师? 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你是否会认为老师的教学方法需要改进? 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? 教师的教鞭 “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我笨,没有学问无颜见爹娘 ” “太
2、阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早”病原体检查的作用病原体检查的作用1.感染性疾病的明确诊断感染性疾病的明确诊断2.通过药敏试验指导临床合理用药通过药敏试验指导临床合理用药3.病原体监控和耐药性监控病原体监控和耐药性监控2020/11/136 第一节 标本采集、运送和检查方法2020/11/137一.标本采集和运送 采集标本注意点:1.标本容器必须无菌或清洁容器2.选择最佳时间采集标本,在抗菌药物使用前3.获取标本时,须严格无菌操作4.标本采集后,应尽快送实验室2020/11/138血 液 发热初期和高峰期采集 抗菌药物治疗前 成人每次10-20ml,婴幼儿1-2ml 标本不用抗凝剂 24小时
3、内,可在不同部位采血3次2020/11/139尿 液 无菌采集清洁中段尿 导尿或膀胱穿刺获得2020/11/1310粪 便 取含脓、血或粘液粪便置于清洁容器内 排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子 对传染性腹泻须三次送检2020/11/1311呼吸道标本1.痰:自然咳痰法 气管镜采集法2.鼻咽拭标本:同痰标本用清水漱口后采集2020/11/1312脑脊液与其他无菌体液 脑脊液标本应立即保温送检 胸腹水等体液标本应抽取2-5ml送检2020/11/1313泌尿生殖道标本 性传播疾病取尿道口分泌物、阴道宫颈口分泌物 生殖道疱疹常穿刺取疱疹液2020/11/1314创伤、组织和脓肿标本 开放性脓肿:无菌棉
4、拭采集脓液 封闭性脓肿:无菌注射器穿刺抽取2020/11/1315二.病原体检查的基本方法1.临床标本细菌检验一般程序一般程序一般程序 标本直接涂片,染色镜检 分离培养 增菌培养 需氧培养 二氧化碳培养 厌氧培养 观察菌落形态 单个菌落 涂片、染色镜检 血清学鉴定 生化鉴定 药敏试验 确定致病菌发出报告2.病原体诊断的基本方法病原体诊断的基本方法 直接显微镜检测直接显微镜检测(microscopic examinationmicroscopic examination)染色标本检查法:革兰染色和抗酸染色染色标本检查法:革兰染色和抗酸染色不染色标本检查法:悬滴法和压滴法不染色标本检查法:悬滴法和
5、压滴法2020/11/13182.病原体诊断的基本方法病原体诊断的基本方法病原体分离培养病原体分离培养(isolation and (isolation and culture)culture)和鉴定和鉴定(identification)(identification) 培养基选择培养基选择 生长条件:一般大气条件生长条件:一般大气条件 厌氧条件厌氧条件 微需氧条件微需氧条件2020/11/13192.病原体诊断的基本方法病原体诊断的基本方法鉴定技术:鉴定技术: 生化鉴定生化鉴定 血清学鉴定血清学鉴定 数码鉴定数码鉴定 自动化鉴定自动化鉴定2020/11/13202.病原体诊断的基本方法病原体
6、诊断的基本方法血清学诊断:查特异性抗体血清学诊断:查特异性抗体肥达氏肥达氏试验试验病原体特异性抗原检测病原体特异性抗原检测病原体核酸检测:查特异基因片段病原体核酸检测:查特异基因片段DNA/RNAPCRDNA/RNAPCR、DNADNA探针杂交技术探针杂交技术2020/11/1321 第二节 细菌耐药性检查2020/11/1322一一. .抗微生物药物敏感性试验(抗微生物药物敏感性试验(ASTAST)1.1.定义:对敏感性不能预测的临床分定义:对敏感性不能预测的临床分离菌株进行药敏试验,以指导临床离菌株进行药敏试验,以指导临床选择治疗药物和了解区域或医院内选择治疗药物和了解区域或医院内常见病原
7、菌耐药性变迁,有助于临常见病原菌耐药性变迁,有助于临床经验性治疗选药。床经验性治疗选药。2020/11/1323一一. .抗微生物药物敏感性试验(抗微生物药物敏感性试验(ASTAST)2.2.常用敏感性试验方法常用敏感性试验方法手工试验手工试验: :K-BK-B纸片琼脂扩散法纸片琼脂扩散法 结果表示结果表示:S-:S-SusceptibleSusceptible I- I-IntermediateIntermediate R- R-ResistantResistant 稀释法(稀释法(MICMIC) EtestEtest 联合药敏试验联合药敏试验2020/11/1324一一. .抗微生物药物敏
8、感性试验抗微生物药物敏感性试验(ASTAST)自动化仪器自动化仪器 VitekVitek,MicroscanMicroscan分子试验分子试验 PCRPCR直接检测直接检测mecAmecA基因基因补充试验补充试验 Nitrocefin Nitrocefin 2020/11/1325一一. .抗微生物药物敏感性试验(抗微生物药物敏感性试验(ASTAST)3. .药敏试验结果与临床抗生素剂量关系药敏试验结果与临床抗生素剂量关系敏感敏感(S)(S)一般剂量有效,推荐使用该抗生素用于一般剂量有效,推荐使用该抗生素用于临床治疗临床治疗中介中介(I)(I)大剂量有效,提示药物大剂量有效,提示药物MICMI
9、C接近体液或组接近体液或组织可达到药物浓度织可达到药物浓度耐药耐药(R)(R)大剂量无效大剂量无效, ,即常规用药剂量不能达到即常规用药剂量不能达到MICMIC2020/11/1326一一. .抗微生物药物敏感性试验(抗微生物药物敏感性试验(ASTAST)4.K-B4.K-B纸片扩散试验的影响因素纸片扩散试验的影响因素琼脂厚度琼脂厚度 与抑菌圈直径成反比与抑菌圈直径成反比菌液浓度菌液浓度 与抑菌圈直径成反比与抑菌圈直径成反比药敏试纸药敏试纸 含量含量与抑菌圈直径成反比与抑菌圈直径成反比 保存温度保存温度2020,使用前室温平衡,使用前室温平衡 30min30min后开启后开启 湿度湿度- -密
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