苯乙胺类拟肾上腺素药物幻灯片课件.ppt

1、苯乙胺类拟肾上腺苯乙胺类拟肾上腺素药物幻灯片素药物幻灯片结构与性质结构与性质1鉴别与检查鉴别与检查2特殊杂质与检查特殊杂质与检查3含量测定含量测定4体内药物分析体内药物分析5第一节第一节 具有收缩血管、升高血压、舒张支气管等具有收缩血管、升高血压、舒张支气管等药理作用，临床用于升压、平喘、充血治疗等，药理作用，临床用于升压、平喘、充血治疗等，应用广泛。应用广泛。 具有碱性的脂肪乙胺侧链，易被氧化具有碱性的脂肪乙胺侧链，易被氧化 结构特点结构特点 苯环上有活泼的酚羟基取代苯环上有活泼的酚羟基取代 代表药物：代表药物： 拟肾上腺素类药物拟肾上腺素类药物R1CHCHNHR2OH R3一、基本结构一、

2、基本结构* 为拟肾上腺素类药物，具苯乙胺的基本为拟肾上腺素类药物，具苯乙胺的基本结构，结构， 苯环上有酚羟基，有的有苯环上有酚羟基，有的有2 2个邻位个邻位的酚羟基，与儿茶酚类似，都属于儿茶酚的酚羟基，与儿茶酚类似，都属于儿茶酚胺类药物。胺类药物。OHHOHOCHCH2NHCH3肾上腺素肾上腺素邻二酚羟基邻二酚羟基 易氧化易氧化脂烃胺脂烃胺手性碳手性碳*R1HCOHHCR3NHR21）弱碱性：）弱碱性：l 烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性。烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性。l l 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水水. .*二、基本性质二、基本性质2）酚羟基

3、特性：）酚羟基特性：u 邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；络合呈色； 在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；u 在碱性溶液中更易变色。在碱性溶液中更易变色。3）光学活性：）光学活性：手性碳原子，具有旋光性手性碳原子，具有旋光性4）苯环取代基特性：）苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗如盐酸克伦特罗芳伯氨基芳伯氨基: :紫外、红外吸收特性紫外、红外吸收特性盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素HClHOCHCH2NHCH3OH 酚羟基：酚羟基： 三氯化铁反应三氯化铁反应 溴代反应溴代反应脂烃胺脂烃胺手性碳手性碳ClCl反应反应 常

4、见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO盐酸异丙肾上腺素ClH2NClCHOHCH2NHC(CH3)3HCl 盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗H2SO42HOCH2OHCHOHCH2NH C(CH3)3硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇( (一）与三氯化铁反应一）与三氯化铁反应 ( (二）甲醛硫酸反应二）甲醛硫酸反应 ( (三）氧化反应三）氧化反应 ( (四）紫外特征吸收与四）紫外特征吸收与 红外吸收光谱红外吸收光谱( (五）与亚硝基铁氰化钠五）与亚硝基铁氰化钠 ( (六六) ) 双缩脲反

5、应双缩脲反应第二节第二节 鉴别试验鉴别试验三、鉴别试验三、鉴别试验1. 1. 三氯化铁反应三氯化铁反应: :酚羟基酚羟基 紫紫色色翠翠绿绿色色肾肾上上腺腺素素氨氨试试液液3FeCl翠绿色翠绿色oH+紫色紫色紫红紫红3FeCl盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素紫色紫色蓝色深绿色盐酸异丙肾上腺素碳酸氢钠试液 5FeCl3红色红色红色蓝色翠绿色重酒石酸去甲肾上腺素 33FeClNaHCO紫红色墨绿色盐酸多巴胺氨试液 %1FeCl3橙黄色混浊液紫色硫酸沙丁胺醇 33FeClNaHCO紫红色紫色蓝紫色绿色盐酸多巴酚丁胺氨试液 3FeCl被氧化成具有醌式结构的有色化合物被氧化成具有醌式结构的有色化合物 肾上

6、腺素：红色肾上腺素：红色 盐酸异丙肾上腺素：棕色至暗紫色盐酸异丙肾上腺素：棕色至暗紫色 重酒石酸去甲肾上腺素：淡红色重酒石酸去甲肾上腺素：淡红色 盐酸去氧肾上腺素：玫瑰红盐酸去氧肾上腺素：玫瑰红橙红橙红深棕红深棕红 2.2.与甲醛与甲醛硫酸反应硫酸反应 与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应 药药 物物 三氯化铁三氯化铁 甲醛硫酸甲醛硫酸肾上腺素肾上腺素Adrenaline0.1mol/L0.1mol/L盐酸液中显翠绿盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫色，加氨试液显紫色，紫红色红色 红色红色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenaline bitart

7、rate翠绿色，加碳酸氢钠试液翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色显蓝色，红色 淡红色淡红色盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素Phenylephrine hydrochloride紫色紫色玫瑰红，橙红，深玫瑰红，橙红，深棕红棕红盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素Isoprenaline hydrochloride深绿色，滴加新制深绿色，滴加新制5%5%碳酸碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色氢钠液，显蓝紫色，红色 棕色，暗紫色棕色，暗紫色盐酸多巴胺盐酸多巴胺Dopamine hydrochloride墨绿色，滴加墨绿色，滴加1%1%氨溶液，氨溶液，显紫红色显紫红色3 3、氧化反应、氧化反应 （还原性反应）还原

8、性反应）呈不同颜色加氧化剂氧化药物 H碘、过氧化氢、碘、过氧化氢、铁氰化钾铁氰化钾具有酚羟基具有酚羟基例：盐酸异丙肾上腺素例：盐酸异丙肾上腺素加硫代硫酸钠使过量加硫代硫酸钠使过量碘的棕色消失碘的棕色消失 溶液显淡红色溶液显淡红色 H+例例: :肾上腺素肾上腺素 例例: :重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素( (与异丙肾上腺素和肾上腺素区别与异丙肾上腺素和肾上腺素区别) )无色或微红色或淡紫色重酒石酸去甲肾上腺素256. 3IpH肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素可被氧肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素可被氧化产生明显的红棕色或紫色化产生明显的红棕色或紫色在在pHpH为为6.56.5的条件下，的条件下，是

9、无法区分是无法区分H2O2肾上腺素红肾上腺素红显血红色显血红色H+棕色多聚体棕色多聚体4 4、双缩脲反应、双缩脲反应盐酸麻黄碱侧链具有氨盐酸麻黄碱侧链具有氨基醇结构基醇结构, , 可显双缩脲反应：可显双缩脲反应：CHOHCHNHCH3CH3HCl+ CuSO4NaOH蓝紫色乙醚醚层水层紫红色蓝色5. 5. 与亚硝基铁氰化钠反应（与亚硝基铁氰化钠反应（RiminiRimini反应）反应） 脂肪族伯胺的专属反应脂肪族伯胺的专属反应红紫色丙酮亚硝基铁氰化钠重酒石酸间羟胺 NaHCO3HOCHOHCHCH3NH2CH(OH)COOHCH(OH)COOH不能含不能含甲醛甲醛6、UV和和IR药物药物溶剂溶

10、剂浓度浓度(mg/ml)nm (nm)吸收度吸收度 (A)重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水0.10272盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素素水水0.052800.50盐酸多巴胺盐酸多巴胺0.5%硫酸硫酸0.03280盐酸芬氟拉明盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸盐酸0.25263, 270盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍水水0.012340.60盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸盐酸0.03243, 296硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇水水0.08274盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱水水0.50251, 257, 263（一一）酮体检查）酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体生产工艺：酮体

11、氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。杂质。降解产物降解产物HOHONHOHO-H2OOONHOH-H2O-ON+OHOONOHOONOHn肾上腺素红肾上腺素红多聚体多聚体原理：利用酮体在原理：利用酮体在310nm310nm处有吸收，而处有吸收，而药物本身在此波长药物本身在此波长处没有吸收，测定处没有吸收，测定一定浓度下样品溶一定浓度下样品溶液在此波长处的吸液在此波长处的吸收度值，来控制酮收度值，来控制酮体的限量。体的限量。 药物药物杂质杂质 溶剂溶剂C(mg/ml)C(mg/ml)(nm)(nm)A A肾上腺素肾上腺素 肾上腺酮肾上腺酮HCl(9200HCl(92000)0) 2.02.

12、0 3103100.050.05盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 酮体酮体 水水 2.02.0 3103100.200.20重酒石酸去甲肾上腺重酒石酸去甲肾上腺素素去甲肾上去甲肾上腺酮腺酮 水水 2.02.0 3103100.050.05盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 酮体酮体 水水 2.02.0 3103100.150.15盐酸甲氧明盐酸甲氧明 酮胺酮胺 水水 1.51.5 3473470.060.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求紫外分光光度法检查酮体的条件及要求 样品溶液样品溶液2.0mg/mL2.0mg/mL，310nm310nm处的吸收度不得处的吸收度不得大于大于0.050.0

13、5，已知酮体的吸收系数，已知酮体的吸收系数E=453E=453，限量是，限量是多少多少? ? 根据：根据： A=ECLC=A/（E*L）=0.05/453=0.0001204（C/100）*1000/2*100%=0.06%思考？思考？（二）光学纯度的检查（二）光学纯度的检查 大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子结构中存在手性碳原子，具有光学活性结构中存在手性碳原子，具有光学活性特征。特征。 中国药典（中国药典（20102010版）版） 采用测定比旋度值进行光学纯度检查，采用测定比旋度值进行光学纯度检查，以控制药品的质量。以控制药品的质量。 最佳方法：手性拆分分析：

14、液相色谱法最佳方法：手性拆分分析：液相色谱法和电泳法和电泳法（三）有关物质（三）有关物质u1 1、肾上腺素中有关物质、肾上腺素中有关物质HPLC（不加校正因子（不加校正因子的主成分自身对照法），样品液中杂质峰面积之和不的主成分自身对照法），样品液中杂质峰面积之和不得大于对照液主峰面积的得大于对照液主峰面积的2.5倍倍(0.5%),单个杂质峰面单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积积不得大于对照溶液的主峰面积(0.2%)u2、盐酸去氧肾上腺素有关物质、盐酸去氧肾上腺素有关物质 TLC:自身对照法自身对照法u3、盐酸苯乙双胍、盐酸苯乙双胍PC:纸色谱法纸色谱法供试样品制备：本品供试样品制备：本品

15、甲醇溶解甲醇溶解20mg/ml对照样品制备：取供试品溶液对照样品制备：取供试品溶液 0.1mg/ml对照溶液对照溶液色谱条件：硅胶色谱条件：硅胶G 薄层板薄层板; 展开剂展开剂: 异丙醇异丙醇-三氯甲烷三氯甲烷-浓氨溶液浓氨溶液(80:5:15); 显色剂显色剂: 重氮苯磺酸试液重氮苯磺酸试液分析：供试液如显杂质斑点，与对照溶液主斑点比分析：供试液如显杂质斑点，与对照溶液主斑点比较，颜色不得更深。较，颜色不得更深。1、盐酸去氧肾上腺素有关物质的检查方法、盐酸去氧肾上腺素有关物质的检查方法 2、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 检查方法：纸色谱法（检查方法：纸色谱法（PC

16、）分离后，洗脱，照）分离后，洗脱，照分光光度法于分光光度法于232nm波长处测定吸收度，控制吸收波长处测定吸收度，控制吸收度以控制有关双胍的量度以控制有关双胍的量 。 原料：非水溶液滴定法、溴量法原料：非水溶液滴定法、溴量法,亚硝酸钠法亚硝酸钠法制剂：比色法、紫外分光光度法、高效液相制剂：比色法、紫外分光光度法、高效液相色谱法色谱法 原料药原料药, ,脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性 测定条件测定条件: :用冰醋酸做溶剂，加入醋酸汞用冰醋酸做溶剂，加入醋酸汞试液消除氢卤酸的干扰，并以结晶紫指示液试液消除氢卤酸的干扰，并以结晶紫指示液指示终点，指示终点，0.1mol/L0.1mol/

17、L的高氯酸作滴定液。的高氯酸作滴定液。 同时作空白试验。同时作空白试验。( (一一) )非水溶液滴定法非水溶液滴定法酸碱滴定是在水溶液中进行的酸碱滴定是在水溶液中进行的 溶剂溶剂-水水 局限性：局限性：(1)(1)许多弱酸或弱碱许多弱酸或弱碱, Ka, Ka或或KbKb小于小于1010-8-8，不，不能直接滴定能直接滴定 (2)(2)有些有机酸或有机碱在水中溶解度小，有些有机酸或有机碱在水中溶解度小，使滴定不能直接准确进行使滴定不能直接准确进行 1 1、酸碱滴定的局限、酸碱滴定的局限 (3)-(3)-些多元酸或碱，混合酸或碱由于些多元酸或碱，混合酸或碱由于Ka(Kb)Ka(Kb)值较接近，不能

18、分步或分别滴值较接近，不能分步或分别滴定。定。 （1 1）溶剂分类）溶剂分类 1 1）质子溶剂）质子溶剂 能给出质子或接受质子的溶能给出质子或接受质子的溶剂，称为质子溶剂。剂，称为质子溶剂。 酸性溶剂酸性溶剂按接受质子的能力大小，可分为按接受质子的能力大小，可分为 碱性溶剂碱性溶剂 两性溶剂两性溶剂 2 2、非水溶剂、非水溶剂酸性溶剂酸性溶剂 给出质子的能力较强的溶剂，称为酸性溶给出质子的能力较强的溶剂，称为酸性溶剂。如甲酸、冰醋酸、丙酸等是常用的酸性剂。如甲酸、冰醋酸、丙酸等是常用的酸性溶剂。溶剂。 适于作滴定弱碱性物质的介质。适于作滴定弱碱性物质的介质。碱性溶剂碱性溶剂 能接受质子的溶剂称

19、为碱性溶剂。如乙能接受质子的溶剂称为碱性溶剂。如乙二胺、乙醇胺、丁胺等为常用的碱性溶剂。二胺、乙醇胺、丁胺等为常用的碱性溶剂。碱性溶剂适于作滴定弱酸性物质的介质。碱性溶剂适于作滴定弱酸性物质的介质。既易接受质子又易给出质子的溶剂称为两既易接受质子又易给出质子的溶剂称为两性溶剂。性溶剂。特点：溶质是较强的酸时，溶剂显碱性特点：溶质是较强的酸时，溶剂显碱性 溶质是较强的碱时，溶剂显酸性溶质是较强的碱时，溶剂显酸性种类：醇类种类：醇类; ;如甲醇、乙醇、异丙醇、乙如甲醇、乙醇、异丙醇、乙二醇等二醇等两性溶剂两性溶剂( (或与极性小的溶剂混合或与极性小的溶剂混合) )适于适于作滴定不太弱的酸、碱的介质

20、作滴定不太弱的酸、碱的介质两性溶剂两性溶剂 2 2）无质子溶剂）无质子溶剂 分子中无转移性质子的溶剂称为无质子分子中无转移性质子的溶剂称为无质子溶剂溶剂 偶极亲质子溶剂偶极亲质子溶剂溶剂分子中无转移性质子，与水比较几乎无酸溶剂分子中无转移性质子，与水比较几乎无酸性亦无两性，但却有较弱的接受质子的倾向和性亦无两性，但却有较弱的接受质子的倾向和程度不同的成氢键的能力。程度不同的成氢键的能力。种类：酰胺类、酮类、乙腈、二甲基种类：酰胺类、酮类、乙腈、二甲基亚砜、吡啶等皆是。亚砜、吡啶等皆是。 其中二甲基甲酰胺、吡啶和二甲其中二甲基甲酰胺、吡啶和二甲基亚砜的碱性较明显，成氢键的能力基亚砜的碱性较明显，

21、成氢键的能力较丙酮、乙腈强。较丙酮、乙腈强。适于作弱酸或酸强度不同的混合物的滴定介质适于作弱酸或酸强度不同的混合物的滴定介质二甲基酰胺和吡啶也常被认为是碱性溶剂。二甲基酰胺和吡啶也常被认为是碱性溶剂。 惰性溶剂惰性溶剂溶剂分子本身几乎无酸碱性，不参与溶质酸碱溶剂分子本身几乎无酸碱性，不参与溶质酸碱反应，也无成氢键的能力，这种溶剂称为惰性反应，也无成氢键的能力，这种溶剂称为惰性溶剂溶剂种类：苯、甲苯、氯仿等种类：苯、甲苯、氯仿等惰性溶剂常与质子溶剂混合使用，以改善样品惰性溶剂常与质子溶剂混合使用，以改善样品的溶解性能，增大滴定突跃，从而使终点时指的溶解性能，增大滴定突跃，从而使终点时指示剂变色敏

22、锐示剂变色敏锐 (1)(1)对供试品的溶解能力要大，并能溶解滴对供试品的溶解能力要大，并能溶解滴定产物定产物(2) (2) 能增强供试品的酸碱性，而又不引起副能增强供试品的酸碱性，而又不引起副反应反应(3) (3) 溶剂应能使滴定突跃明显。降低溶剂的溶剂应能使滴定突跃明显。降低溶剂的介电常数介电常数()()，能使滴定突跃明显。，能使滴定突跃明显。 （三）溶剂的选择（三）溶剂的选择 溶剂的极性大小是以介电常数为判断的，介溶剂的极性大小是以介电常数为判断的，介电常数大的极性大，介电常数小的极性小。电常数大的极性大，介电常数小的极性小。 (4) (4) 考虑使用完全、价廉、粘度小、挥发性考虑使用完全

23、、价廉、粘度小、挥发性低、易于回收和精制等。低、易于回收和精制等。（四）基本原理（四）基本原理非水碱量法非水碱量法 1 1、适用范围：、适用范围： 主要用于主要用于K Kb b1010-8-8的有机碱盐的有机碱盐例：例：K Kb b在在1010-8-81010-10-10时，选用冰醋酸做溶剂时，选用冰醋酸做溶剂 K Kb b在在1010-10-101010-12-12时，选用冰醋酸和醋时，选用冰醋酸和醋酐的混合溶液做溶剂酐的混合溶液做溶剂 K Kb b在在1010-12-12时，选用醋酐做溶剂时，选用醋酐做溶剂（六）问题讨论（六）问题讨论无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：无机酸在冰醋酸中的酸性次序

24、为：高氯酸氢溴酸盐酸硫酸高氯酸氢溴酸盐酸硫酸硝酸其它弱酸硝酸其它弱酸 （磷酸、有机酸）（磷酸、有机酸）4HSO 2 2 酸根的影响酸根的影响 如果置换出的如果置换出的HA酸性太强，则影响终酸性太强，则影响终点，不能直接滴定。点，不能直接滴定。 由于有机酸系弱酸，被高氯酸置换出的由于有机酸系弱酸，被高氯酸置换出的HA，对滴定无干扰，能准确滴定。，对滴定无干扰，能准确滴定。 1 1） 有机酸盐的测定有机酸盐的测定 取本品约取本品约 60mg60mg，精密称定，加冰醋酸，精密称定，加冰醋酸 20ml 20ml 溶溶解后，加结晶紫指示液解后，加结晶紫指示液 1 1滴，用高氯酸滴定液滴，用高氯酸滴定液（

25、0.05mo1/L0.05mo1/L）滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定）滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每的结果用空白试验校正。每 1ml 1ml 高氯酸滴定液高氯酸滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）相当于）相当于22.07mg 22.07mg 的的C C1919H H2323N N3 3O O2 2 C C4 4H H4 4O O4 4。马来酸麦角新碱马来酸麦角新碱 ChP(2010)ChP(2010) 若被置换出的有机酸不溶于冰醋酸，若被置换出的有机酸不溶于冰醋酸，应先将样品碱化，有机溶剂提取游离碱应先将样品碱化，有机溶剂提取游离碱后，再非水碱量法测定。后，再

26、非水碱量法测定。 一般均预先在溶液中加入一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)Hg(Ac)2 2 的冰的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。 22HgXAc2BHHg(Ac)X2BH 理论量理论量1 13 3倍倍 2 2） 氢卤酸盐的测定氢卤酸盐的测定 取本品约取本品约 0.3g0.3g，精密称定，加冰醋酸，精密称定，加冰醋酸 10ml10ml，加热溶解后，加醋酸汞试液，加热溶解后，加醋酸汞试液 6ml 6ml 与与结晶紫指示液结晶紫指示液 1 1滴，用高氯酸滴定液滴，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L0.1mo1/L）滴定至溶液显翠绿色，并将）滴定至溶液显翠绿

27、色，并将滴定的结果用空白试验校正。每滴定的结果用空白试验校正。每 1ml 1ml 高氯高氯酸滴定液（酸滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于）相当于 20.17mg 20.17mg 的的C C1010H H1515NONO HCl HCl。盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱 ChP(2010) 生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫酸氢盐。被滴定至生物碱的硫酸氢盐。 2-+BH+ ClO4 BH+ HSO4+(BH+)2 SO4 HClO4直接滴定直接滴定3 3）硫酸盐的测定）硫酸盐的测定硫酸阿托品硫酸阿托品 HClOHClO4 4直接滴定时，反

28、应摩尔比为直接滴定时，反应摩尔比为1111H2OH2SO42NCH3OCOCHCH2OH 因因HNOHNO3 3具有氧化性，可使指示剂具有氧化性，可使指示剂变色，一般电位法指示终点。变色，一般电位法指示终点。如硝酸士的宁、硝酸毛果芸香碱如硝酸士的宁、硝酸毛果芸香碱 4 4） 硝酸盐的测定硝酸盐的测定 取本品约取本品约 0.3g0.3g，精密称定，加冰醋，精密称定，加冰醋酸酸 20ml20ml，振摇使溶解，照电位滴定法（附，振摇使溶解，照电位滴定法（附录录 A A），用高氯酸滴定液（），用高氯酸滴定液（0.1mo1/L0.1mo1/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。滴定，并将滴定的结果用空

29、白试验校正。每每 1ml 1ml 高氯酸滴定液（高氯酸滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于）相当于39.74mg39.74mg的的C C2121H H2222N N2 2O O2 2 HNO HNO3 3。硝酸士的宁硝酸士的宁 ChP(2000)ChP(2000) 按常法测定，按常法测定，如磷酸氯喹、磷酸如磷酸氯喹、磷酸可待因可待因 5 5） 磷酸盐的测定磷酸盐的测定总结：非水溶液滴定法总结：非水溶液滴定法(弱碱性弱碱性)l 冰醋酸为溶剂冰醋酸为溶剂l 醋酸汞消除氢卤酸的干扰醋酸汞消除氢卤酸的干扰l 结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲，也结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂

30、为萘酚苯甲，也可电位法指示终点）可电位法指示终点）l 若碱性较弱则加醋酐使突跃明显若碱性较弱则加醋酐使突跃明显l 加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐品后应放冷后再加醋酐例：重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定例：重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定 盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱性较弱，电位法指示终点干扰；由于碱性较弱，电位法指示终点 硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂跃，结晶紫为指示剂重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定 取本品取

31、本品0.2g0.2g，精密称定，加冰醋酸，精密称定，加冰醋酸10ml10ml，振摇溶解后，振摇溶解后( (必要时微温必要时微温) )，加结晶紫指示剂，加结晶紫指示剂1 1滴，用高氯酸滴定液滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用）滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每空白试验校正。每1ml1ml的高氯酸滴定液（的高氯酸滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）相当）相当于于31.93mg31.93mg的的C C8 8H H1111NONO3 3.C.C4 4H H4 4O O6 6。 由于重酒石酸在冰醋酸溶液中酸性较弱，由于重酒石

32、酸在冰醋酸溶液中酸性较弱，不干扰高氯酸的滴定和结晶紫指示剂终点颜不干扰高氯酸的滴定和结晶紫指示剂终点颜色的变化。色的变化。 故可以高氯酸直接滴定。故可以高氯酸直接滴定。硫酸沙丁胺醇的测定硫酸沙丁胺醇的测定 取本品约取本品约0.4g0.4g，精密称定，加冰醋酸，精密称定，加冰醋酸10ml10ml，微热使溶解，微热使溶解，放冷，加醋酐放冷，加醋酐15ml15ml和结晶紫指示液和结晶紫指示液1 1滴用高氯酸滴定液滴用高氯酸滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml1ml的高氯酸滴定液（的高氯酸滴定液（0.1mol/L0.

33、1mol/L）相当于）相当于57.67mg57.67mg的的（C C1313H H2121NONO3 3) )2 2 H H2 2SOSO4 4 。 有机碱的硫酸盐，因硫酸在滴定液中酸性很强，有机碱的硫酸盐，因硫酸在滴定液中酸性很强， 只能滴定至只能滴定至HSOHSO4 4- -。*为何在放冷的条件下加醋酐？为何在放冷的条件下加醋酐？ -防止氨基被乙酰化防止氨基被乙酰化为什么有的要加为什么有的要加HgAcHgAc2 2？什么情况下采用什么情况下采用电位法？电位法？硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇的滴定度的滴定度T T如何如何计算？计算？HOHCOHCH2NHCH3+3Br2HOHCOHCH2NHCH3

34、BrBrBr+3HBrBr2+2KI2KBr+I2I2+2Na2SO32NaI+Na2S4O6测定原理：药物分子中具有苯酚结构，在酸测定原理：药物分子中具有苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的剩余的溴，根据消耗的NaNa2 2S S2 2O O3 3滴定液的量，滴定液的量，即可计算含量。即可计算含量。1 1、游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸、游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失失. .2 2、不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧、不能加入太过量的

35、溴液，以防酚羟基氧化或溴化。化或溴化。 一般以过量一般以过量2 2为宜。为宜。3 3、平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥、平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。发。测定方法：取样品测定方法：取样品0.1g0.1g，精密称定，指碘量瓶，精密称定，指碘量瓶中，加水中，加水20ml20ml是溶解，精密加溴液（是溶解，精密加溴液（0.05mol/L0.05mol/L）50ml50ml，再加盐酸，再加盐酸5ml5ml，立即密塞，放置，立即密塞，放置15min15min并并振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml10ml，立，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠液（即密塞，振摇后

36、，用硫代硫酸钠液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，致近终点时，加淀粉指示液，继续滴定滴定，致近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。 每每1ml1ml溴滴定液（溴滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）相当于）相当于3.395mg3.395mg的的C C9 9H H1212NONO2 2.HCl.HCl计算：计算：中国药典中国药典2005规定：当量以规定：当量以1mol Br2计计 故根据反应式，故根据反应式，1mol的的Br2相当于相当于1/3mol的去氧肾上腺素，即的去氧肾上腺素，即 滴定当量滴定当量 E

37、=M/3=203.67/3T=E*mol/L=M/3 *0.05=3.395(mg）（v0-v)XC/0.05 3.395 W(mg)100含量测定含量测定（三）提取酸碱滴定法（三）提取酸碱滴定法(溶解性差异溶解性差异) 方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱

38、滴定液回滴定）。有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。 盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂 标标准准酸酸直直接接滴滴定定提提取取液液蒸蒸干干游游离离碱碱药药物物残残渣渣用用中中性性乙乙醇醇溶溶解解有有机机溶溶剂剂提提取取碱碱性性试试剂剂碱碱化化依据性质依据性质游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂方法一：方法一：终终点点酸酸（过过量量）提提取取液液游游离离碱碱药药物物滴滴定定甲甲基基红红、低低温温蒸蒸去去乙乙醚醚定定量量过过量量的的酸酸有有机机溶溶剂剂提提取取碱碱性性试试剂剂碱碱化化NaOH方法二：方法二：终点（过量）乙醚层（苯丙胺）苯丙胺硫酸苯

39、丙胺滴定甲基红、低温蒸去乙醚定量过量的乙醚提取、NaOH42NaClNaOHSOH42SOH 碱化碱化有机溶剂提取有机溶剂提取（四）亚硝酸钠法（四）亚硝酸钠法 芳伯胺基，在酸性条件下与亚硝酸芳伯胺基，在酸性条件下与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，作永停滴定法指示终点。盐，作永停滴定法指示终点。 1）UV UV 苯乙胺基本结构苯乙胺基本结构 盐酸异丙肾上腺素注射液、重酒石酸盐酸异丙肾上腺素注射液、重酒石酸间羟胺注射液、盐酸甲氧明注射液、硫酸间羟胺注射液、盐酸甲氧明注射液、硫酸沙丁胺醇注射液及其胶囊。沙丁胺醇注射液及其胶囊。（四）（四）UV和比色法和比色法2)

40、 2) 比色法比色法u 利用药物分子结构中的利用药物分子结构中的Ar-OHAr-OH与与FeFe3 3络络合显色，进行比色测定；合显色，进行比色测定；u 也可利用药物分子结构中的也可利用药物分子结构中的Ar-NHAr-NH2 2重氮重氮化偶合显色，进行比色。化偶合显色，进行比色。 盐酸克仑特罗栓盐酸克仑特罗栓 （1）具芳伯氨基，可发生重氮化）具芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应偶合反应AnmN测定盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗栓乙二胺萘基）（、盐酸氯仿500max1HNaNO2 对照法定量对照法定量注意：注意： 偶合剂偶合剂N N- -（1-1-萘基）萘基）- -乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，乙

41、二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂试剂N N- -（1-1-萘基）萘基）- -乙二胺。乙二胺。 2HNO2+2H2NSO3NH42N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O盐酸多巴胺注射液盐酸多巴胺注射液（2）具有酚羟基，与亚铁离子配位显色）具有酚羟基，与亚铁离子配位显色对照法对照法 测定方法测定方法: : 精密量取对照品溶液和供试品溶液各精密量取对照品溶液和供试品溶液各5ml5ml，分，分别置别置100ml100ml量瓶中，各加新制的量瓶中，各加新制的硫酸亚铁酒

42、石酸硫酸亚铁酒石酸盐溶盐溶液（液（）5ml5ml，再加缓冲溶液（，再加缓冲溶液（）稀释）稀释至刻度；照紫外可见分光光度法，在至刻度；照紫外可见分光光度法，在520nm520nm的波的波长处长处测定吸光度，计算，即得。测定吸光度，计算，即得。（五）（五）HPLCHPLC法法 利用液相色谱的高效分离、高灵敏度和利用液相色谱的高效分离、高灵敏度和高选择性的测定方法，不但对本类药物制高选择性的测定方法，不但对本类药物制剂进行常规分析，而且还广泛用于本类药剂进行常规分析，而且还广泛用于本类药物的临床药浓监控和体内药物动力学研究。物的临床药浓监控和体内药物动力学研究。 盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾盐

43、酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、硫酸沙丁胺醇片等上腺素注射液、硫酸沙丁胺醇片等 例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定 采用采用RPIP-HPLC-UV法；用外标一点法进行定量法；用外标一点法进行定量测定。测定。例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定 采用采用RPIP-HPLC-EChD 法；用标准曲线法进行定法；用标准曲线法进行定量测定。量测定。第五节第五节 体内药物分析体内药物分析 动物组织中盐酸克仑特罗残留的测定动物组织中盐酸克仑特罗残留的测定 1. 提取提取 动物肝脏组织样品动物肝

44、脏组织样品5g 加乙酸乙酯加乙酸乙酯15ml ，NaCO3溶液溶液3ml 匀质，离心，取上清匀质，离心，取上清（重复一次），（重复一次），加盐酸，混合，离心，加盐酸，混合，离心，取水层取水层（重复萃取一次），（重复萃取一次），合并萃取液，调节合并萃取液，调节pH至至5.2 2. 净化净化 上样于固相萃取小柱上样于固相萃取小柱 水水5ml、甲醇、甲醇5ml淋洗淋洗 4%氨化甲醇氨化甲醇5ml洗脱洗脱 收集洗脱液。收集洗脱液。 3.测定测定 BSTFA（双三甲基硅烷三氟乙酰胺）（双三甲基硅烷三氟乙酰胺）衍生化，衍生化，GC/MS分分析。外标法计算。析。外标法计算。1 1盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应

45、有盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有A. A. 重氮化重氮化偶合反应偶合反应B. B. 羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应C. C. 氧化反应氧化反应D. D. 磺化反应磺化反应E. E. 碘化反应碘化反应 选择题选择题2 2采用亚硝酸钠法测定含量的药物有采用亚硝酸钠法测定含量的药物有A. A. 苯巴比妥苯巴比妥B. B. 盐酸丁卡因盐酸丁卡因C. C. 苯佐卡因苯佐卡因D. D. 醋氨苯砜醋氨苯砜E. E. 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 3 3下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者量者A. A. 乙酰水杨酸乙酰水杨酸B. B. 对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠C.

46、 C. 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚D. D. 普鲁卡因普鲁卡因E. E. 苯佐卡因苯佐卡因 4. 4. 亚硝酸钠滴定法中，加亚硝酸钠滴定法中，加KBrKBr的作用是的作用是A. A. 添加添加BrBr B. B. 生成生成NONO+ +BrBr C C生成生成HBrHBrD. D. 生成生成BrBr2 2 E. E. 抑制反应进行抑制反应进行 5 5中国药典（中国药典（20052005年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为指示终点的方法为A. A. 电位法电位法 B. B. 永停法永停法C. C. 外指示剂法外指示剂法 D. D. 内指示剂法内指示剂法E.

47、E. 自身指示剂法自身指示剂法 6 6亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有A. A. 自身指示剂法自身指示剂法B. B. 内指示剂法内指示剂法C. C. 永停法永停法D. D. 外指示剂法外指示剂法E. E. 电位法电位法 例例1. ChP1. ChP（20052005）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为钠的含量时，指示滴定终点的方法为A. A. 自身指示终点法自身指示终点法B. B. 电位法指示终点电位法指示终点C. C. 永停滴定法永停滴定法D. D. 氧化还原指示剂法氧化还原指示剂法E. E. 酸碱指示剂法酸碱指示剂法