第八章-甾体激素类药物的分析课件.ppt

1、Analysis of Steroid Hormonesn激素激素（hormone）是内分泌细胞（内分泌腺如是内分泌细胞（内分泌腺如脑垂体、甲状腺、胰岛、肾上腺和性腺或分散脑垂体、甲状腺、胰岛、肾上腺和性腺或分散存在的一些组织细胞如胃肠粘膜细胞及丘脑下存在的一些组织细胞如胃肠粘膜细胞及丘脑下部一些神经细胞等）所产生的微量化学信息分部一些神经细胞等）所产生的微量化学信息分子，这些物质通过扩散或被血液转运到作用细子，这些物质通过扩散或被血液转运到作用细胞或器官，从而调节细胞或器官的代谢，并有胞或器官，从而调节细胞或器官的代谢，并有反馈性地调节机制以适应体内环境的变化，也反馈性地调节机制以适应体内环

2、境的变化，也有协调体内各部分之间相互联系的作用。有协调体内各部分之间相互联系的作用。 现已发现人和动物的激素有几十种，他们的现已发现人和动物的激素有几十种，他们的化学结构各异。化学结构各异。 按分子结构中是否含氮，可将激素分为两大按分子结构中是否含氮，可将激素分为两大类：一类是含氮激素，如胰岛素（蛋白质），类：一类是含氮激素，如胰岛素（蛋白质），促肾上腺皮质激素、催产素（多肽）、促甲状促肾上腺皮质激素、催产素（多肽）、促甲状腺激素（糖蛋白）、甲状腺激素（含碘氨基腺激素（糖蛋白）、甲状腺激素（含碘氨基酸）、肾上腺素（胺类）等；另一类为甾体激酸）、肾上腺素（胺类）等；另一类为甾体激素类（又称类固醇

3、激素），如肾上腺皮质激素、素类（又称类固醇激素），如肾上腺皮质激素、性激素等性激素等Contents第一节第一节第二节第二节第三节第三节第四节第四节CCDABC123456789101112131415161718192021第一节第一节甾体激素类药物均具有甾体激素类药物均具有环戊烷并多氢菲的母核环戊烷并多氢菲的母核: :按药理作用分类：按药理作用分类： 肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 性激素性激素 雄性激素雄性激素 蛋白同化激素蛋白同化激素 孕激素孕激素 (干扰素干扰素) 雌性激素雌性激素标号：标号：一、肾上腺皮质激素一、肾上腺皮质激素抗炎药抗炎药 第一节第一节CH3CH3HOOHOHHHHO

4、HO氢化可的松氢化可的松(天然天然)HydrocortisoneCH3CH3HOOHHOFHCH3HOOCH3OH醋酸地塞米松醋酸地塞米松Dexamethasone acetate地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠DexamethasoneSodium Phosphate CH3CH3HOOHHOFHCH3HOPOOONaNaOHCH3CH3OHFHOHHOOCH3CH3HHOO曲安奈德曲安奈德Triamcinolone Acetonide：结构面下方：结构面下方：结构面上方：结构面上方一、肾上腺皮质激素一、肾上腺皮质激素第一节第一节CH3CH3HOOHHOFHCH3HOOCH3OH醋酸地塞米松醋酸

5、地塞米松Dexamethasone acetate母核共有母核共有21个碳原子；个碳原子；A环均有环均有4-3-酮基，为共轭体系，具有紫外吸收；酮基，为共轭体系，具有紫外吸收；C17位上有位上有-醇酮基，具有还原性；醇酮基，具有还原性；有的药物有的药物C17位上还有位上还有-羟基；羟基；部分药物部分药物C11位上有羟基或酮基，位上有羟基或酮基，C1、C2之间有双键，之间有双键，6或或9位有卤素取代，位有卤素取代，或有或有C16-羟基羟基 改造：作用增强改造：作用增强二、雄性激素二、雄性激素 和和 蛋白同化激素蛋白同化激素第一节第一节睾酮睾酮(天然天然) Testosterone 甲睾酮甲睾酮

6、Methyltestosterone 雄性激素雄性激素 具有蛋白同化激素作用具有蛋白同化激素作用结构结构改造改造 雄性激素雄性激素 减弱减弱同化作用（保留或增强）同化作用（保留或增强） 蛋白同化激素蛋白同化激素：苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙 Nandrolone phenylpropionate雄性激素母核有雄性激素母核有19个碳原子，个碳原子，蛋白同化激素在蛋白同化激素在C10位上一般无甲基，母核只有位上一般无甲基，母核只有18个碳原子个碳原子A环上有环上有4-3-酮基，具有紫外吸收酮基，具有紫外吸收C17位上有位上有-羟基，或由它们形成的酯羟基，或由它们形成的酯 改造：作用增强改造：作用增强第一节

7、第一节三、孕激素三、孕激素黄体酮黄体酮 Progesterone醋酸甲地孕酮醋酸甲地孕酮Megestrol acetate口服后可被迅速破坏失效口服后可被迅速破坏失效只能注射给药只能注射给药结构改造：结构改造：具有口服的活性具有口服的活性活性增强活性增强孕激素类药物的母核有孕激素类药物的母核有21个个C原子，原子，A环有环有4-3-酮基，酮基，C17位上有甲酮基，位上有甲酮基，有的药物有的药物C17位上有位上有-羟基或与酸形成的酯。羟基或与酸形成的酯。醋酸甲羟孕酮醋酸甲羟孕酮Medroxyprogesterone Acetate第一节第一节四、雌激素四、雌激素雌二醇雌二醇(天然天然)estra

8、diol 结构改造：结构改造： 高效、长效雌激素药物高效、长效雌激素药物 EstriolEstradiol Benzoate炔雌醇炔雌醇 Ethinylestradiol母核有母核有18个个C原子原子A环为苯环环为苯环C3位上有酚羟基位上有酚羟基C17位上有位上有-羟基羟基有些药物的有些药物的C17-羟基形成了酯羟基形成了酯有的药物有的药物C17位上有乙炔基位上有乙炔基第一节第一节五、孕激素五、孕激素( (干扰素干扰素) )炔诺孕酮炔诺孕酮 Norgestrel炔孕酮炔孕酮Norethisterone避孕药：避孕药：NCH3H3CHH3COHCH3HHO米非司酮米非司酮Mifepristone

9、 米非司酮为抗孕激素药物米非司酮为抗孕激素药物 ：炔诺孕酮炔诺孕酮 Norgestrel雌二醇雌二醇(天然天然)estradiol 黄体酮黄体酮 Progesterone睾酮睾酮(天然天然) Testosterone CH3CH3HOOHOHHHHOHO氢化可的松氢化可的松(天然天然)Hydrocortisone 1.4-3-酮CCDABC1234567891011121314151617181920213. C11： 或COCOH2. C17：CCH2OHOCCH3OOHOCROCCH，4. A环上的酚羟基5. 卤素(-F)，酯基第一节第一节可供分析的主要基团：二、鉴别二、鉴别1.物理常数测

10、定（比旋度）物理常数测定（比旋度）2. .与强酸的呈色反应与强酸的呈色反应 与与H2SO4、H3PO4、HClO4和和HCl等反应后呈色等反应后呈色3.3.制备衍生物测定熔点制备衍生物测定熔点4.4.官能团反应官能团反应C17 醇酮基：醇酮基： Fehling试剂试剂 Cu2O（红色）红色）氨制氨制AgNO3 Ag（黑色）黑色）四氮唑盐四氮唑盐 显色显色2）酮基）酮基 +羰基试剂羰基试剂 显色（腙）显色（腙） 常见羰基试剂：常见羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼硫酸苯肼3 3）甲酮基）甲酮基 +Na2Fe(CN)5NO 显色显色4 4）酚羟基）酚羟基 +重氮苯

11、磺酸盐重氮苯磺酸盐 红色（偶氮染料）红色（偶氮染料）三、杂质检查1. 特殊杂质：硒、其他甾体等特殊杂质：硒、其他甾体等2. 其他甾体：其他甾体：与标示药物不同的甾体化合物与标示药物不同的甾体化合物来源：来源：原料、中间体、异构体、降解产物原料、中间体、异构体、降解产物特点：特点：可能存在多个甾体杂质；结构类似可能存在多个甾体杂质；结构类似方法：方法： TLC法法、 HPLC法法1）TLC法：法：多采用自身对照法多采用自身对照法显色方法：四氮唑盐、硫酸乙醇显色方法：四氮唑盐、硫酸乙醇判定方法：判定方法： 规定杂质斑点数目规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色规定杂质斑点颜色 规定规定： 如显杂质斑点

12、，如显杂质斑点，不得多于不得多于2个，个，其颜色与对照品其颜色与对照品主斑点相比较，主斑点相比较，不得更深。不得更深。 供试品供试品 对照品对照品 4mg/ml 0.08mg/ml 2）HPLC法自身对照法自身对照法四、含量测定四、含量测定包括包括HPLCHPLC法、紫外分光光度法、比色法等法、紫外分光光度法、比色法等1.异烟肼比色法异烟肼比色法1）原理：）原理： C3-酮基酮基 异烟腙异烟腙2）操作：）操作： 对照液对照液 供试液供试液异烟肼异烟肼HCl乙醇乙醇 异烟肼异烟肼 6060min420nm测定测定A3）注意事项：）注意事项：反应速度和专属性：反应速度和专属性：C3= O C17=

13、 O 、 C20= O， C11= O 不反应不反应C3-酮基有一定专属性酮基有一定专属性溶剂的选择：溶剂的选择：异烟肼、盐酸异烟肼、盐酸 无水乙醇或无水甲醇无水乙醇或无水甲醇 酸、异烟肼的量：酸、异烟肼的量： 盐酸：异烟肼盐酸：异烟肼 = 2：1 酸度酸度 异烟肼盐异烟肼盐 酸度酸度 A 样品：异烟肼样品：异烟肼 = 1：8水分、水分、O2与光线的影响：与光线的影响： 含水量含水量 腙水解腙水解 A 溶剂不挥发、不吸收水分时溶剂不挥发、不吸收水分时 O2与光线无影响与光线无影响温度的影响：温度的影响： 温度温度 反应速度反应速度2. 四氮唑比色法四氮唑比色法1）原理）原理 肾上腺皮质激素类肾

14、上腺皮质激素类 C17-醇酮基醇酮基 ChP采用采用TTC（RT） USP采用采用 BT2）操作操作 对照液对照液 供试液供试液强还原性强还原性TTC 氢氧化四丁基铵氢氧化四丁基铵25 暗处暗处45min485nm测定测定AOH-还原还原红四氮唑红四氮唑RT/TTCRT/TTC 三苯甲三苯甲 （红色（红色）蓝四氮唑蓝四氮唑BT BT 双甲双甲 ( (兰色）兰色）C17-醇醇酮基酮基+3）注意事项）注意事项基团对反应速度的影响基团对反应速度的影响C11= O C11OHC21OH C21-酯酯C16无论何种取代基无论何种取代基溶剂、水分的影响溶剂、水分的影响含水量含水量5%含水含水10%A10%

15、含水含水30%几无反应几无反应无水乙醇无水乙醇醛醛 A 无醛无水乙醇无醛无水乙醇O2与光线的影响与光线的影响碱的影响碱的影响反应应在强碱性反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行条件下进行以以氢氧化四甲基铵氢氧化四甲基铵的结果最佳的结果最佳加入顺序：加入顺序：皮质激素皮质激素 四氮唑四氮唑 碱碱反应过程反应过程反应产物反应产物光敏感光敏感 避光，快速避光，快速O2影响产物颜影响产物颜色和稳定性色和稳定性充充N2 ，密封密封温度和反应时间温度和反应时间 t t 甲甲 分解分解 ChP 25 4045 BP 30 1h3. Kober反应比色法反应比色法1） Kober反应原理：桃桃红红黄黄色色

16、雌雌激激素素乙乙醇醇 OHSOHmax=465max=5152）改良的）改良的Kober反应：反应： 使用铁使用铁-酚试剂：酚试剂： (NH4)2Fe(SO4)2 + H2SO4 + H2O2 + 苯苯酚酚 也被称为：也被称为：KoberKober反应反应-铁铁- -酚试剂法酚试剂法加强红色产物的稳定性；消除反应产生的荧光加强红色产物的稳定性；消除反应产生的荧光3）特点：）特点： 优点优点 较高的灵敏度较高的灵敏度 具有一定的选择性具有一定的选择性 缺点缺点 非化学计量反应非化学计量反应 n氢化可的松氢化可的松 （药典二部（药典二部 P402）n苯丙酸诺龙（药典二部苯丙酸诺龙（药典二部 P319）n黄体酮（药典二部黄体酮（药典二部 P643）n雌二醇（药典二部雌二醇（药典二部 P829）n炔孕酮（药典二部炔孕酮（药典二部 P356）