植物离体快速繁殖和脱病毒技术课件.ppt

1、一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利第第5 5章章 植物离体快速繁殖和植物离体快速繁殖和 脱病毒技术脱病毒技术 5.1 5.1 植物快速繁殖技术植物快速繁殖技术 5.2 5.2 无病毒植物的培养无病毒植物的培养/ 概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。体的方法。 特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工；特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高

2、，省时省工；可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌条件下进行，不受病虫害侵害。条件下进行，不受病虫害侵害。 5.1 5.1 植物快速繁殖技术植物快速繁殖技术/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 快速繁殖过程一般包括四个阶段，即无菌快速繁殖过程一般包括四个阶段，即无菌培养物的建立、芽的增殖、诱导生根和试培养物的建立、芽的增殖、诱导生根和试管苗的驯化和移载。管苗的驯

3、化和移载。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利5.1.1 5.1.1 无菌培养物的建立无菌培养物的建立q 初代培养初代培养：进行离体繁殖时首先必须建立的无菌培养：进行离体繁殖时首先必须建立的无菌培养物。需注意以下几点：物。需注意以下几点：q （1 1）保证无菌：外植体、培养基、培养室无菌状态。）保证无菌：外植体、培养基、培养室无菌状态。q （2 2）条件合适：合适的外植体；合适的培养基；适宜）条件合适：合适的外植体；合适的培养基；适宜的培养条件。的培养条件。q （3 3）技术过关：要熟练掌握无菌操作技术。）技术过关：要熟

4、练掌握无菌操作技术。q （4 4）防止褐变：外植体褐变是指在接种后，其表面开）防止褐变：外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。它的始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。它的出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，将酚类出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，将酚类化合物氧化成醌类物质，它们多呈棕褐色，会抑制其化合物氧化成醌类物质，它们多呈棕褐色，会抑制其它酶的活性，从而影响所接种外植体的培养。它酶的活性，从而影响所接种外植体的培养。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利n 褐变的主要

5、原因褐变的主要原因 植物种类和基因型植物种类和基因型 由于多酚氧化酶活性上的差异，由于多酚氧化酶活性上的差异，不同品种间的褐变现象是不同的。不同品种间的褐变现象是不同的。 取材部位和生理状态取材部位和生理状态 处于幼龄期的植物材料褐变处于幼龄期的植物材料褐变程度较浅，而从已经成年的植株采收的外植体，由于程度较浅，而从已经成年的植株采收的外植体，由于含醌类物质较多，因此褐变较为严重。含醌类物质较多，因此褐变较为严重。 培养基成分培养基成分 无机盐浓度过高、细胞分裂素的水平无机盐浓度过高、细胞分裂素的水平过高等都会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从过高等都会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而

6、使褐变现象加深。而使褐变现象加深。 培养条件不当培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时如果光照过强、温度过高、培养时间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速褐变程度。褐变程度。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利n 减轻褐变现象发生的方法减轻褐变现象发生的方法 选择合适的外植体选择合适的外植体 一般来说，最好选择生长处于一般来说，最好选择生长处于旺盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻。旺盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻。 合适的培养条件合适的培养条件 无机

7、盐成分、植物生长物质水平、无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度等均可以减轻材料的褐变现象。适宜温度等均可以减轻材料的褐变现象。 使用抗氧化剂使用抗氧化剂 在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏血酸、血酸、PVPPVP等抗氧化剂能够减轻很多外植体的褐变现象。等抗氧化剂能够减轻很多外植体的褐变现象。另外，使用另外，使用0.1%-0.5%0.1%-0.5%的活性炭对防止褐变也有较为明的活性炭对防止褐变也有较为明显的效果。显的效果。 连续转接连续转接 对容易褐变的材料可间隔对容易褐变的材料可间隔1224h1224h的培养的培养后，再转移到新的培养基上，这样经过连续处理后，再转移

8、到新的培养基上，这样经过连续处理7-l0d7-l0d后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 (3)(3)诱导胚状体形成诱导胚状体形成 是由植物器官、组织和细胞培养直接发生类胚结构，是由植物器官、组织和细胞培养直接发生类胚结构，最后以肧状

9、体成苗的方式。在组织培养条件下胚状体最后以肧状体成苗的方式。在组织培养条件下胚状体的发育过程类似于合子胚的发育：细胞经脱分化后，的发育过程类似于合子胚的发育：细胞经脱分化后，发生持续细胞分裂增殖，并依次经过原胚期、球形胚发生持续细胞分裂增殖，并依次经过原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期，进而成为成熟期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期，进而成为成熟的胚状体。的胚状体。 肧状体途径优点是增值率高，同时具胚根和胚芽，免肧状体途径优点是增值率高，同时具胚根和胚芽，免去生根一步；可用于制作人工种子，便于运输和保存。去生根一步；可用于制作人工种子，便于运输和保存。缺点是肧状体成苗率低，遗传性状不

10、稳定。缺点是肧状体成苗率低，遗传性状不稳定。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利5.1.3 5.1.3 诱导生根诱导生根 MSMS、B5B5、WhiteWhite等培养基，都可用于诱导生根，但等培养基，都可用于诱导生根，但是其含盐浓度要适当加以稀释，它们都抑制根的发生。是其含盐浓度要适当加以稀释，它们都抑制根的发生。应将它们降低到应将它们降低到1 12 2，1 13 3或或1 14 4，甚至更低的水平。，甚至更低的水平。 生根培养基适当加大生长素的浓度，不用或少用生根培养基适当加大生长素的浓度，不用或少用细胞分裂素，生长

11、素浓度在细胞分裂素，生长素浓度在1-10mg/l1-10mg/l，使用较多的是，使用较多的是NAANAA，其次为，其次为IAAIAA和和IBAIBA。 培养基中蔗糖的浓度降低到培养基中蔗糖的浓度降低到1.0-1.5%1.0-1.5%，以增强植，以增强植株的自养能力。培养基不宜过硬以免影响生根。株的自养能力。培养基不宜过硬以免影响生根。 为提高小植株的光合能力，可将光强度增加到为提高小植株的光合能力，可将光强度增加到3000-10000lux3000-10000lux。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利5.1.4 5.1

12、.4 试管苗的驯化和移栽试管苗的驯化和移栽 驯化或炼苗：为了适应移栽后较低湿驯化或炼苗：为了适应移栽后较低湿度和较高光强等环境条件，能顺利进行度和较高光强等环境条件，能顺利进行自养，必须有一个逐步锻炼和适应的过自养，必须有一个逐步锻炼和适应的过程，这个过程叫驯化或炼苗。程，这个过程叫驯化或炼苗。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 移栽前的练苗移栽前的练苗 移栽前可将培养物不开口移到自然光照下锻炼移栽前可将培养物不开口移到自然光照下锻炼23d23d，让试管苗接受强光的照射，或培养基，让试管苗接受强光的照射，或培养基中加入

13、矮壮素等生长延缓剂等。使苗长得壮实中加入矮壮素等生长延缓剂等。使苗长得壮实起来，然后再开口练苗起来，然后再开口练苗12d12d，经受较低湿度，经受较低湿度的处理，以适应将来自然湿度的条件。的处理，以适应将来自然湿度的条件。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利移栽和幼苗的管理移栽和幼苗的管理 从试管中取出发根的小苗，用自来水洗掉根部从试管中取出发根的小苗，用自来水洗掉根部粘着的培养基，要全部除去，以防残留培养基粘着的培养基，要全部除去，以防残留培养基滋生杂菌。但要轻轻除去，应避免造成伤根。滋生杂菌。但要轻轻除去，应避免造成

14、伤根。栽植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔，栽植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔，然后将小苗插入，注意幼苗较嫩，防止弄伤，然后将小苗插入，注意幼苗较嫩，防止弄伤，栽后把苗周围基质压实，栽前基质要浇透水。栽后把苗周围基质压实，栽前基质要浇透水。栽后轻浇薄水。再将苗移入高湿度的环境中。栽后轻浇薄水。再将苗移入高湿度的环境中。搭设小拱棚，以减少水分的蒸发，保证空气湿搭设小拱棚，以减少水分的蒸发，保证空气湿度达度达90%90%以上。以上。 /一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利5.1.5 5.1.5 快速繁殖中应注意的问题

15、快速繁殖中应注意的问题 （1 1）遗传稳定性）遗传稳定性v外植体的来源：不同种、同一种的不同品种以及同一植外植体的来源：不同种、同一种的不同品种以及同一植株的不同器官发生变异频率不同。株的不同器官发生变异频率不同。v继代培养：继代培养的时间和次数是造成变异重要因素。继代培养：继代培养的时间和次数是造成变异重要因素。v再生植株发生方式：茎芽直接增殖、外植体直接形成不再生植株发生方式：茎芽直接增殖、外植体直接形成不定芽方式或愈伤组织诱导不定芽方式，变异率依次增强。定芽方式或愈伤组织诱导不定芽方式，变异率依次增强。植物生长物质：是诱导变异的重要原因之一。植物生长物质：是诱导变异的重要原因之一。/一是

16、作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 （2 2）玻璃化现象）玻璃化现象T定义：定义：当植物材料不断地进行离体繁殖时，当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水渍状，这种现象通常称为玻璃化。渍状，这种现象通常称为玻璃化。T特点：特点：外观形态有明显异常；体内含水量、外观形态有明显异常；体内含水量、矿质元素、糖类、纤维、蛋白质等基本成分矿质元素、糖类、纤维、蛋白质等基本成分含量有变化，一些酶活和内源激素含量有变含量有变化，一些酶活和内源激素含量有变化。化。/一是作为

17、领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利影响玻璃化苗发生的因素：影响玻璃化苗发生的因素：l培养材料：材料种类和外植体不同都有影响。培养材料：材料种类和外植体不同都有影响。l环境因素：液体培养比固体培养更易玻璃化；蔗糖环境因素：液体培养比固体培养更易玻璃化；蔗糖浓度与玻璃化呈负相关；通气不良；温度过高等都浓度与玻璃化呈负相关；通气不良；温度过高等都可导致玻璃化。可导致玻璃化。培养基成分：铵离子过多可致玻璃化；培养基成分：铵离子过多可致玻璃化；6-BA6-BA浓度与浓度与玻璃化呈正相关等。玻璃化呈正相关等。/一是作为领导干部一定要树立正确

18、的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 控制玻璃化苗的措施：控制玻璃化苗的措施：v 采用固体培养，提高蔗糖含量采用固体培养，提高蔗糖含量v 通气，适当提高光强，控制温度通气，适当提高光强，控制温度v 降低培养基中降低培养基中NH4+NH4+和细胞分裂素浓度和细胞分裂素浓度v 其它措施其它措施/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利月季快速繁殖月季快速繁殖/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利5.2 5.2 无病毒植

19、物的培养无病毒植物的培养 病毒的危害病毒的危害 给植物生产带来的损失是很大的，给植物生产带来的损失是很大的，造成减产、品质变劣等严重后果。如草莓病毒造成减产、品质变劣等严重后果。如草莓病毒的危害，使草莓产量严重降低，品质大大退化。的危害，使草莓产量严重降低，品质大大退化。葡萄扇叶病毒使葡萄减产葡萄扇叶病毒使葡萄减产l0%-18%l0%-18%，为害马铃，为害马铃薯的病虫害则更多，花卉病毒的危害一般会影薯的病虫害则更多，花卉病毒的危害一般会影响花卉的观赏价值等。响花卉的观赏价值等。 无病毒苗培育的意义无病毒苗培育的意义 用组织培养方法生产无用组织培养方法生产无毒苗，排除了使用药剂，所以对减少污染

20、，防毒苗，排除了使用药剂，所以对减少污染，防止公害，保护环境都有积极的意义。止公害，保护环境都有积极的意义。 /一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 5.2.1 5.2.1 脱除植物病毒的方法脱除植物病毒的方法 （1 1）物理方法：）物理方法：X X射线、紫外线、超短射线、紫外线、超短波、波、热处理热处理等。等。 热处理，原理是当植物组织处于高于正热处理，原理是当植物组织处于高于正常温度的环境中时，组织内部的病毒受热之后常温度的环境中时，组织内部的病毒受热之后部分或全部钝化，在高温下，不能生成或生成部分或全部钝化，在高温下

21、，不能生成或生成病毒很少，这样持续一段时间，病毒自行消灭，病毒很少，这样持续一段时间，病毒自行消灭，从而达到脱毒的目的。从而达到脱毒的目的。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利l温水浸渍处理温水浸渍处理 适用于休眠器官、剪下的接穗或种植适用于休眠器官、剪下的接穗或种植的材料，在的材料，在5050左右的温水中浸渍左右的温水中浸渍10min10min至数小时，至数小时，方法简便易行，但易使材料受伤。方法简便易行，但易使材料受伤。l热空气处理热空气处理 热空气处理对休眠组织和活跃生长的茎热空气处理对休眠组织和活跃生长的茎尖效果

22、较好，将生长的盆栽植株移入温热治疗室尖效果较好，将生长的盆栽植株移入温热治疗室( (箱箱) )内，一般在内，一般在35403540。处理时间因植物而异，短则几。处理时间因植物而异，短则几十分钟，长可达数月。十分钟，长可达数月。热处理方法主要缺陷是并非能脱除所有病毒，因此热热处理方法主要缺陷是并非能脱除所有病毒，因此热处理需与其他方法配合应用，才可获得良好的效果。处理需与其他方法配合应用，才可获得良好的效果。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 （2 2）化学方法）化学方法 许多化学药品许多化学药品( (包括嘌呤、嘧啶类似

23、物、抗菌包括嘌呤、嘧啶类似物、抗菌素等素等) )对离体组织和原生质体具有脱毒效果。对离体组织和原生质体具有脱毒效果。常用的药品有：常用的药品有：88氮鸟嘌呤、氮鸟嘌呤、22硫脲嘧啶、硫脲嘧啶、杀稻瘟抗菌素、放线菌素杀稻瘟抗菌素、放线菌素D D、庆大霉素等。例、庆大霉素等。例如，将如，将100g 2100g 2硫脲嘧啶加入培养基可除去硫脲嘧啶加入培养基可除去烟草愈伤组织中的烟草愈伤组织中的PVY(PVY(马铃薯病毒马铃薯病毒) )。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利（3 3）生物方法）生物方法l 种子繁殖种子繁殖l 茎尖

24、培养脱毒法茎尖培养脱毒法 原理：原理：A A 传导抑制；传导抑制；B B 酶缺乏；酶缺乏；C C 能量能量竞争；竞争；D D 抑制因子存在。抑制因子存在。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 方法：方法：在进行脱毒培养时，由于微小的茎尖组织在进行脱毒培养时，由于微小的茎尖组织很难靠肉眼操作，因而需用带有适当光源的简单解剖很难靠肉眼操作，因而需用带有适当光源的简单解剖镜镜(840(840倍倍) )。在切取外植体之前一般须对茎芽进行表。在切取外植体之前一般须对茎芽进行表面消毒。叶片包被严紧的芽，如菊花、兰花，只须在面消毒。叶

25、片包被严紧的芽，如菊花、兰花，只须在75%75%酒精中浸蘸一下，而叶片包被松散的芽，则要用酒精中浸蘸一下，而叶片包被松散的芽，则要用0.1%0.1%次氯酸钠表面消毒次氯酸钠表面消毒10min10min。 将接种好的茎尖置于将接种好的茎尖置于2222左右的温度下。每天以左右的温度下。每天以16h 200030001x16h 200030001x的光照条件下培养。的光照条件下培养。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利l 微体嫁接脱毒法微体嫁接脱毒法 木本植物茎尖培养难以生根成植株，将实生木本植物茎尖培养难以生根成植株，将实生

26、苗砧木在人工培养基上种植培育，再从成年苗砧木在人工培养基上种植培育，再从成年无病树枝上切取无病树枝上切取0.2mm0.2mm左右茎尖，在砧木上进左右茎尖，在砧木上进行试管微体嫁接，以获得无病毒幼苗。行试管微体嫁接，以获得无病毒幼苗。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利l珠心组织培养脱毒法珠心组织培养脱毒法l 原理：珠心与维管束系统无直接联系。原理：珠心与维管束系统无直接联系。l愈伤组织培养脱毒法愈伤组织培养脱毒法l 通过植物器官和组织脱分化培养诱导产通过植物器官和组织脱分化培养诱导产生愈伤组织，经几次继代，然后从愈伤组织

27、生愈伤组织，经几次继代，然后从愈伤组织再分化产生芽，长成小植株，可以得到无病再分化产生芽，长成小植株，可以得到无病毒苗。病毒可能会在愈伤组织继代培养过程毒苗。病毒可能会在愈伤组织继代培养过程中消失。中消失。l茎圆盘培养脱毒法茎圆盘培养脱毒法/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 5.2.2 5.2.2 脱病毒植株的鉴定脱病毒植株的鉴定 （一）指示植物（一）指示植物(indmatingplant)(indmatingplant)法法 利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的

28、方法。类的方法。 摩擦接种法：最早是美国的病毒学家摩擦接种法：最早是美国的病毒学家Holmes 1929Holmes 1929年发年发现的。他用感染现的。他用感染TMVTMV的普通烟叶的粗汁液和少许金刚砂的普通烟叶的粗汁液和少许金刚砂相混合，然后在烟叶子上摩擦，相混合，然后在烟叶子上摩擦，23d23d后叶片止出现了后叶片止出现了局部坏死斑。这种方法条件简单，操作方便，故一直局部坏死斑。这种方法条件简单，操作方便，故一直沿用至今，沿用至今， 嫁接法：指示植物作砧木，被鉴定植物芽作接穗。嫁接法：指示植物作砧木，被鉴定植物芽作接穗。 /一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为

29、职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利（二）免疫学方法（二）免疫学方法l抗血清抗血清(antisemm)(antisemm)鉴定法鉴定法 用已知抗血清可以鉴定未知病毒的种类。用已知抗血清可以鉴定未知病毒的种类。这种抗血清就是高度专一性的试剂，这这种抗血清就是高度专一性的试剂，这种方法特异性高，测定速度快，一般几种方法特异性高，测定速度快，一般几小时甚至几分钟就可以完成。所以抗血小时甚至几分钟就可以完成。所以抗血清法成为植物病毒鉴定中最有用的方法清法成为植物病毒鉴定中最有用的方法之一。之一。 /一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少

30、数人谋取私利l 酶联免疫鉴定法酶联免疫鉴定法(Enzyme linked immunity (Enzyme linked immunity absorption assay ELISA)absorption assay ELISA) 酶联免疫法是指采用酶标记抗原或抗体酶联免疫法是指采用酶标记抗原或抗体的定量测定法。将抗原固定在支持物上，加的定量测定法。将抗原固定在支持物上，加入待检血清，然后加入酶入待检血清，然后加入酶( (过氧化物酶或碱性过氧化物酶或碱性磷酸酶磷酸酶) )标记的抗体，使待检血清中与对应抗标记的抗体，使待检血清中与对应抗原的特异性抗体结合，最后用特殊分光光度原的特异性抗体结合，

31、最后用特殊分光光度计测定。此法是现在灵敏度较高和常使用的计测定。此法是现在灵敏度较高和常使用的方法。方法。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 （三）电子显微镜鉴定法（三）电子显微镜鉴定法 由于人的眼睛难以观察小于由于人的眼睛难以观察小于0.1mm0.1mm的微粒，所以只的微粒，所以只有通过电子显微镜才能分辨有通过电子显微镜才能分辨0.5m0.5m大小的病毒颗粒。大小的病毒颗粒。这样采用电子显微镜既可以直接观察病毒，检查出有这样采用电子显微镜既可以直接观察病毒，检查出有无病毒存在，了解病毒颗粒的大小、形状和结构，又无病毒

32、存在，了解病毒颗粒的大小、形状和结构，又可以鉴定病毒的种类。这是一种较为先进的方法，但可以鉴定病毒的种类。这是一种较为先进的方法，但需一定的设备和技术。需一定的设备和技术。 这一方法的优点是灵敏度高和能在植物粗提取液这一方法的优点是灵敏度高和能在植物粗提取液中定量测定病毒。中定量测定病毒。/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利（四）分子生物学方法（四）分子生物学方法具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等特点。具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等特点。v 核酸杂交技术核酸杂交技术v PCRPCR技术技术v 基因芯片技术基因芯片

33、技术/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利以马铃薯茎尖脱毒培养为例以马铃薯茎尖脱毒培养为例/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利茎尖繁殖试管苗切断到试管薯繁殖过程茎尖繁殖试管苗切断到试管薯繁殖过程/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利图图4-2 不同浓度不同浓度IAA与与GA（A）、）、GA+BAP（B）互作对试管苗生长及试）互作对试管苗生长及试管薯形成的影响管薯形成的影响Fig.

34、 4-2 Details of the interaction of various IAA concentrations with GA3 （A） and GA3 + BAP （B） on the growth and microtuberization of potato explants. /一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利试管薯和微型薯比较试管薯和微型薯比较(Atlantic 和和Favorita）/一是作为领导干部一定要树立正确的权力观和科学的发展观，权力必须为职工群众谋利益，绝不能为个人或少数人谋取私利 思考题思考题归纳植物离体快速繁殖技术的主要步骤。归纳植物离体快速繁殖技术的主要步骤。采取哪些措施可防止或减轻外植体褐变及采取哪些措施可防止或减轻外植体褐变及试管苗玻璃化？试管苗玻璃化？植物脱病毒方法有哪些，概述各种脱毒方植物脱病毒方法有哪些，概述各种脱毒方法的原理。法的原理。1. 概述影响茎尖培养脱病毒效果的因素及脱概述影响茎尖培养脱病毒效果的因素及脱病毒植株的鉴定方法。病毒植株的鉴定方法。/