ABO疑难血型鉴定和新生儿溶血病课件.ppt
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- ABO 疑难 血型 鉴定 新生儿 溶血 课件
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1、ABOABO疑难血型鉴定和新生儿溶血病疑难血型鉴定和新生儿溶血病 2输血前免疫学检测输血前免疫学检测n输血前检测:输血前检测: 血型鉴定:血型鉴定:ABOABO血型(正反定型)、血型(正反定型)、 RhDRhD血型血型 抗体筛选抗体筛选 交叉配血:主侧、次侧交叉配血:主侧、次侧 n目的:准确定型,选择目的:准确定型,选择相容相容血液。血液。n意义:输血安全、及时、有效。意义:输血安全、及时、有效。3人类血型系统人类血型系统n3030个血型系统个血型系统n目前被识别的血型抗原的总数达到目前被识别的血型抗原的总数达到328328个,其中有个,其中有284284个抗原分别属于个抗原分别属于3030个
2、血个血型系统型系统4 红细胞血型系统红细胞血型系统n最具临床意义:最具临床意义:ABOABO、RhRhn临床意义:输血安全、器官移植、新生儿溶血病。临床意义:输血安全、器官移植、新生儿溶血病。n急性溶血性输血反应:急性溶血性输血反应:ABOABO抗体与相应抗原结合后,能抗体与相应抗原结合后,能够激活补体,导致红细胞在血管内立即被破坏。够激活补体,导致红细胞在血管内立即被破坏。 轻症:发热、腰背痛、血红蛋白尿或手术创口渗血。轻症:发热、腰背痛、血红蛋白尿或手术创口渗血。 重症:重症:DICDIC、休克、急性肾衰竭,甚至死亡。、休克、急性肾衰竭,甚至死亡。5ABOABO血型系统血型系统n抗原抗体相
3、对应:红细胞上缺乏相应抗原,血清抗原抗体相对应:红细胞上缺乏相应抗原,血清中有相应抗体,组织细胞分泌液中有中有相应抗体,组织细胞分泌液中有ABHABH抗原。其抗原。其它血型系统没有的特性。它血型系统没有的特性。n免疫原性最强的血型系统,抗体主要是免疫原性最强的血型系统,抗体主要是IgMIgM性质,性质,可引起急性溶血性输血反应,在临床输血中的作可引起急性溶血性输血反应,在临床输血中的作用最重要。用最重要。 6ABOABO血型分子基础血型分子基础nABOABO基因组基因组DNADNA长度约长度约30Kb30Kb,由,由7 7个外显子组成。个外显子组成。nA A和和B B基因编码的蛋白都是基因编码
4、的蛋白都是353353个氨基酸,个氨基酸,O O基因编码的蛋基因编码的蛋白只有白只有115115个氨基酸。个氨基酸。 nB B基因在基因在cDNAcDNA上有七个核苷酸与上有七个核苷酸与A1A1基因不同,其中四个基因不同,其中四个核苷酸的变化造成了氨基酸序列的变化。核苷酸的变化造成了氨基酸序列的变化。nO O基因有两种:基因有两种: O1O1基因:最常见的基因:最常见的O O基因,在基因,在cDNAcDNA的第的第261261位位G G缺失,缺失,提前终止转移酶的翻译,使其编码的蛋白只有提前终止转移酶的翻译,使其编码的蛋白只有115115个氨个氨基酸。基酸。 O2O2基因:基因:261261位
5、位G G不缺失,很少见的不缺失,很少见的O O基因。基因。7ABOABO抗原的发育抗原的发育n胚胎期开始产生,出生时还未发育完全,其抗原胚胎期开始产生,出生时还未发育完全,其抗原数只有成人的数只有成人的25255050,与抗,与抗A A和抗和抗B B血型试剂的血型试剂的反应也较成人弱。反应也较成人弱。n新生儿新生儿ABOABO抗体也很弱,故新生儿定抗体也很弱,故新生儿定ABOABO血型是不血型是不需要反定型,通常在三个月后才进行反定型。需要反定型,通常在三个月后才进行反定型。8 ABOABO血型鉴定方法血型鉴定方法n玻片法:瓷板、纸片玻片法:瓷板、纸片n试管法:经典的试管离心方法仍被认为是最可
6、靠试管法:经典的试管离心方法仍被认为是最可靠 的的ABOABO定型方法。定型方法。 n微量板法微量板法(U(U型或型或V V型板型板) ):大量标本:大量标本n微柱凝胶法(卡式):混合外观微柱凝胶法(卡式):混合外观mfmfn分子生物学方法分子生物学方法9 ABOABO亚型亚型A A亚型亚型正定型正定型反定型反定型分泌分泌物质物质抗抗A A抗抗B B 抗抗ABAB 抗抗H H 抗抗A1A1A1A1B BO OA1A1+0 0+0 0+0 0+0 0A/HA/HA2A2+0 0+ +0 00/+0/+0 0A/HA/HAintAint+0 0+0 0+0 0A/HA/HA3A3mfmf0 0mf
7、mf+0 00 0+0 0A/HA/HAelAel0 00 00 0+0 00/+0/+0 0H H10ABOABO亚型亚型A A亚型亚型正定型正定型反定型反定型分泌分泌物质物质抗抗A A抗抗B B 抗抗ABAB 抗抗H H 抗抗A1A1A1A1B BO OAyAy0 00 00 0+0 00 0+0 0A/HA/HAmAm0/0/0 00/0/ +0 00 0+0 0A/HA/HAxAx0/0/0 0+ +0 00/+0/+0 0H HAendAendmfmf0 0mfmf+0 00 0+0 0H HAfinnAfinn0 0+0 0+0 0H H11 ABOABO亚型亚型B B亚型亚型正定
8、型正定型反定型反定型分泌分泌物质物质抗抗A A抗抗B B抗抗ABAB抗抗H HA AB BO OB1B10 0+0 00 0B/HB/HBintBint0 0+0 00 0B/HB/HB3B30 0mfmfmfmf+0 00 0B/HB/HBxBx0 00/0/0/+0/+w w0 0H HBmBm0 00/0/0/0/+0 00 0B/HB/HBelBel0 00 00 0+w w0 0H H12 红细胞混合凝集红细胞混合凝集(mf)(mf)n特征:有部分凝聚细胞,周围有大量游离细胞特征:有部分凝聚细胞,周围有大量游离细胞n类型:按抗原来源分,可分为外源性和内源性类型:按抗原来源分,可分为外
9、源性和内源性nABOABO亚型:亚型:A3A3、B3B3n嵌合体:孪生子、双精嵌合嵌合体:孪生子、双精嵌合n造血干细胞移植、异型输血、胎母出血造血干细胞移植、异型输血、胎母出血n检测技术:分子生物学技术检测技术:分子生物学技术13ciscisABABciscisABAB的血清学特征:的血清学特征:n与抗与抗A A的反应强度:和的反应强度:和A1A1细胞接近;细胞接近;n与抗与抗B B的反应强度:弱于正常的反应强度:弱于正常B B,易被误定为,易被误定为B3/Bx,B3/Bx,可可显混合外观凝集显混合外观凝集n血清常含有弱抗血清常含有弱抗B BnH H抗原性强抗原性强n家系调查和分子生物学方法确
10、认家系调查和分子生物学方法确认ciscisABAB表型表型14ABOABO正反定型不符合原因正反定型不符合原因假阴性结果假阴性结果n没有加抗体试剂没有加抗体试剂n忽视溶血结果忽视溶血结果n试剂和细胞比例不当试剂和细胞比例不当n离心时间、速度不足离心时间、速度不足n试剂失效、用法错误试剂失效、用法错误n记录或结果判读错误记录或结果判读错误假阳性结果假阳性结果n离心时间、速度过大离心时间、速度过大n试剂、细胞、盐水污染试剂、细胞、盐水污染n实验容器不洁实验容器不洁n记录或结果判读错误记录或结果判读错误15ABOABO正反定型不符合原因正反定型不符合原因正定型:抗原正定型:抗原nABOABO亚型、亚
11、型、cisABcisABn疾病致抗原减弱:白血病、淋巴瘤疾病致抗原减弱:白血病、淋巴瘤n红细胞被自身抗体致敏红细胞被自身抗体致敏n红细胞被细菌污染造成多凝集现象红细胞被细菌污染造成多凝集现象n获得性获得性B B抗原:胃肠道疾病、酸化试剂抗原:胃肠道疾病、酸化试剂n脐带血中有脐带血中有WhartonWharton胶胶n混合外观凝集:亚型、骨髓移植、异型输血、嵌合体混合外观凝集:亚型、骨髓移植、异型输血、嵌合体16ABOABO正反定型不符合原因正反定型不符合原因反定型:抗体反定型:抗体 n缗钱状凝集:球蛋白过高缗钱状凝集:球蛋白过高n自身抗体:冷凝集素自身抗体:冷凝集素n疾病:白血病、恶性淋巴瘤、
12、骨髓移植、使用免疾病:白血病、恶性淋巴瘤、骨髓移植、使用免 疫疫抑制剂、免疫缺陷、低丙种球蛋白血症抑制剂、免疫缺陷、低丙种球蛋白血症n年龄因素:新生儿、老年人年龄因素:新生儿、老年人n近期内血浆置换近期内血浆置换n同种抗体:通常同种抗体:通常IgMIgM性质性质17ABOABO疑难血型鉴定方法疑难血型鉴定方法n了解样本情况:病史、采样了解样本情况:病史、采样 n进行重复试验进行重复试验n重新采样重新采样n红细胞洗涤后配成红细胞洗涤后配成3 35%5%浓度浓度n用试管法,实验管在室温和用试管法,实验管在室温和44放置放置3030分钟,阴性者用分钟,阴性者用显微镜观察结果。显微镜观察结果。n更换新
13、的试剂更换新的试剂n更换试验方法更换试验方法18ABOABO疑难血型鉴定方法疑难血型鉴定方法n增加试剂:抗增加试剂:抗A1 A1 、 抗抗H H、 抗抗ABABn增加细胞:自身、增加细胞:自身、O O细胞、脐血细胞细胞、脐血细胞(i(i抗原抗原) )n唾液血型物质鉴定唾液血型物质鉴定n吸收放散试验吸收放散试验n直接抗球蛋白试验直接抗球蛋白试验n分子生物学实验分子生物学实验19ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析n抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB Ac Bc OcAB Ac Bc Oc 0 4 0 4 4 4 0 0 00 0 0n分析:血型可能是分析:血型可能是B B型、型、A A亚亚
14、B B型型 抗体:患者年龄(老人抗体:患者年龄(老人/ /婴儿)、疾病诊断(白血婴儿)、疾病诊断(白血 病、病、MMMM、免疫球蛋白缺乏等)、免疫球蛋白缺乏等) 基因检测基因检测 20ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB AB 抗抗A1 Ac Bc OcA1 Ac Bc Oc4+ 0 4+ 0 0/+ 44+ 0 4+ 0 0/+ 4 0 0分析:血型可能是分析:血型可能是A2A2亚型,血清中常有抗亚型,血清中常有抗A1A1抗体。抗体。21ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析 抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB Ac Bc OcAB Ac Bc O
15、c 0/+ 0 0/+ 0 /+ 0 4/+ 0 4 0 0分析:患者血型可能是分析:患者血型可能是A A亚型。亚型。 如果是血液病患者,抗原减弱的可能性很大。如果是血液病患者,抗原减弱的可能性很大。22ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB Ac Bc OcAB Ac Bc Oc2 2 4 4 4 4 4 4 2 2 2 2分析:患者血型可能是分析:患者血型可能是B B型。型。 有自身抗体:冷凝集素有自身抗体:冷凝集素23ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB AB 抗抗H Ac Bc OcH Ac Bc Oc4 4
16、 2+/mf 42+/mf 4 3+ 0 3+ 0 0 0分析:患者血型可能是分析:患者血型可能是cisABcisAB型、型、ABAB亚型。亚型。 基因检测、家系分析基因检测、家系分析 24ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析 抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB Ac Bc OcAB Ac Bc Oc 0 0/+ 0/+ 4 0 0/+ 0/+ 4 0/+ 00/+ 0 分析:患者血型可能是分析:患者血型可能是B B亚型。亚型。 吸收放散试验、血型基因吸收放散试验、血型基因25ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB Ac Bc OcAB Ac Bc
17、Oc 0 0 0 4 0 0 0 4 4 4 2 2分析:患者血型可能是分析:患者血型可能是O O型,血清中有意外抗体。型,血清中有意外抗体。26ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB Ac Bc Oc AB Ac Bc Oc 自身自身 4 4 2 2 4 4 0 40 4 0 00 0分析:患者血型可能是分析:患者血型可能是A A型,获得性型,获得性B B。 了解疾病,酸化试剂了解疾病,酸化试剂27ABOABO正反定型不符分析正反定型不符分析 抗抗A A 抗抗B B 抗抗AB AB 2 2 2 2 2 2 分析:患者是新生儿,只做正定型。血型可能是分析:
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