新生儿溶血三项检测的临床应用-PPT课件.ppt
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1、新生儿溶血三项检测的临床应用2有报道有报道:新生儿溶血病新生儿溶血病(Hemolytic disease of newborn HDN),系系指母、婴血型不合引起的同族免疫性溶血指母、婴血型不合引起的同族免疫性溶血;已发现的人类已发现的人类29个血型系统中,以个血型系统中,以ABO血型不合最常见,血型不合最常见,Rh血型不合血型不合较少见较少见;3胎儿从父亲遗传而来的红细胞抗原恰为母亲所缺少胎儿从父亲遗传而来的红细胞抗原恰为母亲所缺少, ,胎儿红胎儿红细胞通过胎盘进入母体血循环中刺激母体产生相应的血型细胞通过胎盘进入母体血循环中刺激母体产生相应的血型抗体(抗体(IgGIgG)。)。 此抗体又可
2、通过胎盘进入胎儿血循环中导致胎儿、新此抗体又可通过胎盘进入胎儿血循环中导致胎儿、新生儿体内特异性抗原抗体反应,使红细胞致敏单核生儿体内特异性抗原抗体反应,使红细胞致敏单核- -吞噬吞噬细胞系统内破坏而溶血。细胞系统内破坏而溶血。4ABO溶血病的病因和发病机制溶血病的病因和发病机制ABO血型的遗传血型的遗传有有A基因者称基因者称A型,有型,有B基因者称基因者称B型,同时有型,同时有A、B二二个基因者称个基因者称AB型,有型,有H基因而无基因而无A、B基因为基因为O型型假如母假如母“O”型,父型,父“A”型(纯合子或杂合子)型(纯合子或杂合子)母基因母基因型型OOAOA父基因父基因型型AA子基因型
3、子基因型子血型子血型AOOO母基因母基因型型OO父基因父基因型型AOAO或或或或5ABO血型抗体血型抗体 正常情况下,红细胞上缺乏正常情况下,红细胞上缺乏A或或B抗原时,血浆抗原时,血浆中存在相应的抗体即抗中存在相应的抗体即抗A抗体或抗抗体或抗B抗体为天然抗抗体为天然抗体,以体,以IgM为主,实质是由于机体与广泛存在的类为主,实质是由于机体与广泛存在的类ABO物质接触产生。物质接触产生。 如果由于输血、怀孕或类如果由于输血、怀孕或类ABO物质的刺激使物质的刺激使抗体浓度增加,这种免疫抗抗体浓度增加,这种免疫抗A或抗或抗B抗体多半为抗体多半为IgG,特别是特别是O型母亲。型母亲。6ABO血型与抗
4、体血型与抗体7ABO溶血病可发生在怀孕第一胎溶血病可发生在怀孕第一胎 自然界存在自然界存在A或或B血型物质如某些植物、寄生虫、血型物质如某些植物、寄生虫、伤寒疫苗、破伤风及白喉类毒素等。伤寒疫苗、破伤风及白喉类毒素等。 O型母亲在第一次妊娠前,已接受过型母亲在第一次妊娠前,已接受过A或或B血型物血型物质的刺激,血中抗质的刺激,血中抗A或抗或抗B (IgG)效价较高。效价较高。 怀孕第一胎时抗体即可进入胎儿血循环引起溶血。怀孕第一胎时抗体即可进入胎儿血循环引起溶血。ABO血型不合中约血型不合中约20%发病发病 血浆及组织中存在的血浆及组织中存在的A和和B血型物质,部分中血型物质,部分中和来自母体
5、的抗体。和来自母体的抗体。 胎儿红细胞胎儿红细胞A或或B抗原位点少,抗原位点少,抗原性弱,反应能力差。抗原性弱,反应能力差。8Rh溶血病的病因和发病机制溶血病的病因和发病机制Rh基因基因编码编码Rh抗原的两个基因是抗原的两个基因是RHD和和RHCE;Rh基因系统的等位基因中最重要的是基因系统的等位基因中最重要的是D、E、C、c、e五种,不存在五种,不存在d基因基因;RHD基因编码基因编码D抗原,抗原,RHCE基因的编码产物为基因的编码产物为C/c和和E/e,C和和E一起遗传,排列为一起遗传,排列为DCE;无;无d抗原抗原;d表示表示D阴性表现型阴性表现型;RHD和和RHCE基因编码的单倍型中最
6、常见的有基因编码的单倍型中最常见的有8种形种形式:式:Dce、dce,DCe、dCe、DcE、dcE、DCE和和dCE。910Rh溶血病溶血病 红细胞缺乏红细胞缺乏D抗原称为抗原称为Rh阴性,具有阴性,具有D抗原称为抗原称为Rh阳阳性,中国人绝大多数为性,中国人绝大多数为Rh阳性。阳性。母亲母亲Rh阴性阴性(无无D抗原抗原),若胎儿,若胎儿Rh阳性可发生阳性可发生Rh溶血溶血病。病。母亲母亲Rh阳性阳性(有有D抗原抗原),但缺乏,但缺乏Rh系统其他抗原如系统其他抗原如E等,若胎儿有该抗原也可发生等,若胎儿有该抗原也可发生Rh溶血病。溶血病。RhD溶血病最常见溶血病最常见其抗原性强弱依次为其抗原
7、性强弱依次为DECce。RhD溶血病最常见,其次为溶血病最常见,其次为RhE,Rhe溶血病罕见。溶血病罕见。11Rh溶血病一般不发生在第一胎溶血病一般不发生在第一胎由于自然界无由于自然界无Rh血型物质血型物质 初发免疫反应初发免疫反应次发免疫反应次发免疫反应第一胎不溶血第一胎不溶血第二胎溶血第二胎溶血胎盘胎盘12Rh溶血病发生在第一胎的情况溶血病发生在第一胎的情况Rh阴性母亲既往输过阴性母亲既往输过Rh阳性血。阳性血。Rh阴性母亲既往有流产或人工流产史。阴性母亲既往有流产或人工流产史。极少数可能是由于极少数可能是由于Rh阴性孕妇的母亲为阴性孕妇的母亲为Rh阳性,其阳性,其母怀孕时已使孕妇致敏,
8、故第一胎发病(外祖母学母怀孕时已使孕妇致敏,故第一胎发病(外祖母学说)。说)。RhD血型不合者约血型不合者约5%发病发病母亲对胎儿红细胞母亲对胎儿红细胞Rh抗原的敏感性不同。抗原的敏感性不同。13临床表现临床表现 14实验室检查实验室检查 血型检查血型检查母子母子ABO和和Rh血型血型溶血检查溶血检查 溶血时红细胞和血红蛋白减少,早期新生儿毛细血管血溶血时红细胞和血红蛋白减少,早期新生儿毛细血管血血红蛋白血红蛋白6%);血涂片有核红细胞增多(血涂片有核红细胞增多(10/100个白细胞)个白细胞);血清总胆红素和未结合胆红素明显增加血清总胆红素和未结合胆红素明显增加;致敏红细胞和血型抗体测定致敏
9、红细胞和血型抗体测定15抗人球蛋白试验抗人球蛋白试验: 又称Coombs试验, 利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体,使红细胞凝集。经常用作试验的有两类方法。 直接试验:是检查被检红细胞上有无已结合的不 完全抗体(包括IgG类的抗A或抗B)。 间接试验:是检查血清中游离的不完全 抗体 (包括IgG类的抗A或抗B)。16直接直接Coombs试验试验抗人免疫球蛋白自身抗体17注意事项注意事项 标本采取后应立即进行试验,延迟试验或中途停止可使抗体从细胞中丢失。 抗球蛋白试剂应按照说明最适稀释度使用,否则可产生前带或后带现象而误认为阴性结果。 受检红细胞一定要用盐水洗涤3次
10、,除去红细胞悬液混杂的血清蛋白,以防止假阴性结果。 最好对阴性结果进行核实,即在该试管中再加1滴IgG致敏红细胞如结果为阳性,则表示试管内的抗球蛋白试剂未被消耗,阴性结果可靠。 如需了解体内致敏红细胞的Ig类型,则可分别以抗IgM或抗C3单价抗球蛋白试剂进行试验。18注意事项注意事项 红细胞上吸附抗体太少,直接抗球蛋白试验可成假阴性反应。 全凝集或冷凝集血液标本中有很多网织红细胞且抗球蛋白试剂中含有抗转铁蛋白时,均可使红细胞发生凝集。 试剂:多特异性抗球蛋白试剂(IgG、C3d);阳性对照细胞IgG抗D致敏的5%Rh(D)阳性红细胞生理盐水悬液。取3人份O型红细胞等量混匀,经生理盐水洗涤后取压
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