培养基的配制课件.ppt

1、培养基的配制培养基的配制营养肉汤培养基胨10.0g取上述成分混合，微温溶解，调节pH 为弱碱性，煮沸，滤清，调pH 值使灭菌后为7.20.2，分装灭菌。牛肉浸出粉3.0g氯化钠5.0g水1000ml营养琼脂培养基琼脂14.0g取上述成分混合，微温溶解，调节pH 为弱碱性，煮沸，滤清，调pH 值使灭菌后为7.20.2，分装灭菌。胨10.0g牛肉浸出粉3.0g氯化钠5.0g水1000ml0.5%a葡萄糖肉汤培养基（用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检验）胨10.0g除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值为弱碱性，煮沸，加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为7.20.2,分装，灭菌。

2、葡萄糖5.0g牛肉浸出粉3.0g氯化钠5.0g水1000ml培养基的配制培养基的配制改良马丁琼脂培养基琼脂14.0g除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值约为6.8，煮沸，加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为6.40.2,分装，灭菌。改良马丁培养基置2328培养胨5.0g酵母浸出粉2.0g葡萄糖20.0g磷酸氢二钾1.0g硫酸镁0.5g水1000ml玫瑰红钠琼脂培养基琼脂14.0g除葡萄糖、玫瑰红钠外，取上述成分混合，微温溶解，滤过，加入葡萄糖、玫瑰红钠，分装，灭菌。胨5.0g磷酸二氢钾1.0g硫酸镁0.5g玫瑰红钠0.0133g葡萄糖10.0g水1000ml酵母浸出粉

3、胨葡萄糖琼脂培养基（YPD）酵母浸出粉5.0g 葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，滤过，加入葡萄糖，分装，灭菌。胨10.0g葡萄糖20.0g琼脂14.0g水1000ml培养基的配制培养基的配制胆盐乳糖培养基（BL）胨20.0g 除乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.40.2,煮沸，滤清，加入乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠溶解后，分装，灭菌。氯化钠5.0g磷酸氢二钾4.0g磷酸二氢钾1.3g乳糖5.0g牛胆盐去氧胆酸钠2.0g0.5g水1000ml胆盐乳糖发酵培养基胆盐乳糖发酵培养基1000ml取未灭菌的胆盐乳糖培养基1000ml，加入0.04%溴甲酚紫指示

4、液25ml，根据要求的用量分装于含倒管的试管中，灭菌。秘用的倒管的规格应保证产气结果的观察。0.04%溴甲酚紫指示液25ml曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB）营养琼脂培养基100ml取营养琼脂培养基，加热溶化后，冷至60，按无菌操作加入灭菌的其它3种溶液，摇匀，倾注平皿。20%乳糖溶液5ml曙红钠指示液2ml亚甲蓝指示液1.31.6ml培养基的配制培养基的配制麦康凯琼脂培养基（MacC）胨20.0g除乳糖、1%中性红指示液、牛胆盐、琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.20.2,加入琼脂，加热溶化后，再加入其余成分，摇匀，分装，灭菌，冷至约60，倾注平皿。乳糖10.0g牛胆盐5

5、.0g氯化钠5.0g琼脂14.0g1%中性红指示液3ml水1000ml4-甲基伞形酮葡糖苷酸（4-methylumbelliferyl-D-glu-curonide,MUG）胨10.0g除MUG外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.30.1,加入MUG，溶解，每管分装5ml，灭菌。磷酸氢二钠（无水）6.2g磷酸二氢钾（无水）0.9g硫酸锰0.5g硫酸锌0.5g硫酸镁0.1g亚硫酸钠40mg氯化钠5.0g氯化钙50mg去氧胆酸钠1.0gMUG75mg水1000ml培养基的配制培养基的配制三糖铁琼脂培养基（TSI）胨20.0g除三种糖、0.2%酚磺酞指示液、琼脂外，取上述成分混合，

6、微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.30.1,加入琼脂，加热溶化后，再加入其余成分，摇匀，分装，灭菌，制成高底层（23cm）短斜面牛肉浸出粉5.0g乳糖10.0g葡萄糖1.0g氯化钠5.0g琼脂12.0g蔗糖10.0g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.2g0.2%酚磺酞指示液12.5ml水1000ml四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）胨5.0g取上述成分混合，微温溶解，灭菌。 临用前，取上述培养基，每10ml加入碘试液0.2ml和亮绿试液0.1ml，混匀。牛胆盐1.0g碳酸钙10.0g硫代硫酸钠30.0g水1000ml培养基的配制培养基的配制沙门、志贺菌属琼脂培养基胨5.0g 除乳糖、中性红指示液、琼脂

7、外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.20.1,滤过，加入琼脂，加热溶化后，再加入其余成分，摇匀，灭菌，冷至约60，倾注平皿。牛肉浸出粉5.0g乳糖10.0g牛胆盐8.5g枸橼酸钠8.5gg枸橼酸铁铵1.0g硫代硫酸钠8.5 g中性红指示液2.5ml亮绿试液0.33ml琼脂16.0g水1000ml培养基的配制培养基的配制胆盐硫乳琼脂培养基（DHL）胨20.0g 除糖、指示液、琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.20.1,加入琼脂，加热溶化后，再加入其余成分，摇匀，灭菌，冷至约60，倾注平皿。牛肉浸出粉3.0g乳糖10.0g蔗糖10.0g去氧胆酸钠1.0g硫

8、代硫酸钠2.3 g枸橼酸钠1.0g枸橼酸铁铵1.0g中性红指示液3ml琼脂16.0g水1000ml溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基胨10.0g除琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值，使灭菌后为7.50.1,加入琼脂，加热溶化后，分装，灭菌，冷至约60，倾注平皿。牛肉浸出粉3.0g氯化钠5.0g溴化十六烷基三甲铵0.3g琼脂14.0g水1000ml培养基的配制培养基的配制亚碲酸盐肉汤培养基营养肉汤培养基100ml临用前，取灭菌的营养肉汤培养基，每100ml中加入新配制的1%亚碲酸钠（钾）试液0.2ml，混匀，即得。1%亚碲酸钠（钾）0.2ml卵黄氯化钠琼脂培养基胨6.0g除10%氯化钠卵黄液

9、之外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值，使灭菌后为7.50.1, 灭菌，冷至约60,c以无菌操作加入10%氯化钠卵黄液，充分振摇，倾注平皿。10%氯化钠卵黄液的制备：取鲜鸡蛋1个，以无菌操作取卵黄放入10%无菌氯化钠100ml中，摇匀即得。牛肉浸出粉1.8g氯化钠30.0g10%氯化钠卵黄液100ml琼脂14.0g水650ml甘露醇氯化钠琼脂培养基胨10.0g除甘露醇、酚磺酞指示液、琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值，使灭菌后为7.40.2,加入琼脂，加热溶化后，滤过，分装，灭菌，冷至约60，倾注平皿。牛肉浸出粉1.0g甘露醇10.0g氯化钠75.0g酚磺酞指示液2.5ml琼脂1

10、4.0g水1000ml培养基的配制培养基的配制乳糖发酵培养基胨20.0g除甘露醇、酚磺酞指示液、琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值，使灭菌后为7.40.2,加入指示液，分装于含倒管的小试管中，每管3ml。灭菌。乳糖10.0g0.04%溴甲酚紫指示液25ml水1000ml绿脓菌素（Pyocyanin）测定用培养基（PDP琼脂培养基）胨20.0g取胨、氯化镁、硫酸钾和水混合后，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.30.1,加入甘油及琼脂，加热溶化后，混匀，分装于试管，灭菌，置成斜面。氯化镁（无水）1.4g硫酸钾（无水）10.0g甘油10ml琼脂14.0g水1000ml庖肉培养基取新鲜牛肉，

11、除去脂肪和筋腱，加蒸馏水煮沸约10分钟，切成约5mm3的小块，称重，按1：3（肉：水）加蒸馏水，置410浸1820小时后，煮沸1小时，用白布过滤（滤液即为1：3牛肉浸液），肉渣用自来水漂洗2次，然后加入适氢氧化钠溶液，搅拌，使pH在8.4左右，浸泡过夜，次日倒去上层水，用蒸馏水冲洗23次，放在纱布上，自动沥干（不要挤压）。将肉渣铺在搪瓷盘上，灭菌，于80100烘干，筛去碎屑，装瓶，保持干燥，备用。 庖肉培养基制备 将上述碎肉块装入合适的容器中，再加入营养肉汤培养基，碎肉的量约为1.5%，调节pH使灭菌后为7.30.1。灭菌。培养基的配制培养基的配制哥伦比亚培养基酪蛋白胰酶消化物10.0g除琼脂

12、外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值，使灭菌后为7.30.2,加入琼脂，加热溶化后，滤过，分装，灭菌，冷至约4550，加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素，混匀，倾注平皿。心胰酶消化物3.0g玉米淀粉1.0g琼脂15.0g肉胃酶消化物5.0g酵母浸出粉5.0g氯化钠5.0g水1000ml培养基1胨5.0g除琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值，比最终的pH值高0.20.4,加入琼脂，加热溶化后，滤过，调节pH值，使灭菌后为7.88.0或6.56.6分装，灭菌，牛肉浸出粉3.0g磷酸氢二钾3.0g琼脂1520g水1000ml培养基的配制培养基的配制培养基2胨6.0g除琼脂、葡

13、萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH比最终的pH值高0.20.4,加入琼脂，加热溶化后，滤过，加葡萄糖溶解后，再调pH值，使灭菌后为7.88.0或6.56.6分装，灭菌牛肉浸出粉1.5g酵母浸出粉6.0g葡萄糖1g琼脂1520g水1000ml培养基3胨5.0g除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，滤过，加葡萄糖溶解后，调节pH值，使灭菌后为7.07.2,灭菌牛肉浸出粉1.5g酵母浸出粉3.0g葡萄糖1g氯化钠3.5g磷酸氢二钾3.68g磷酸二氢钾1.32g水1000ml培养基的配制培养基的配制培养基4胨5.0g除琼脂、葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值比最终的pH值高0.20

14、.4,加入琼脂，加热溶化后，滤过，加葡萄糖溶解后，调节pH值，使灭菌后为6.06.8，灭菌氯化钠3.5g葡萄糖1g琼脂1520g枸橼酸钠8.5gg水1000ml培养基5胨10g除琼脂、麦牙糖外，取上述成分混合，微温溶解，调pH值略高0.20.4,加入琼脂，加热溶化后，滤过，加麦牙糖溶解后，调pH值，使灭菌后为7.27.4，分装，灭菌琼脂1520g水1000ml麦牙糖40g培养基6胨8g除琼脂、葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值比最终的pH值高0.20.4,加入琼脂，加热溶化后，滤过，加葡萄糖溶解后，调节pH值，使灭菌后为7.27.4，灭菌牛肉浸出粉3g氯化钠45g葡萄糖2.5g磷酸

15、氢二钾3.3g磷酸二氢钾1g酵母浸出粉5g琼脂1520g水1000ml培养基的配制培养基的配制培养基7胨5.0g除琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值比最终的pH值高0.20.4,加入琼脂，加热溶化后，滤过，调节pH值，使灭菌后为6.56.6，灭菌牛肉浸出粉1.5g磷酸氢二钾3.3g磷酸二氢钾1g枸橼酸钠8.5gg琼脂1520g水1000ml培养基8酵母浸出粉1g取上述成分混合，加热溶化后，滤过，灭菌。琼脂1520g葡萄糖5g硫酸铵1g磷酸盐缓冲液（pH6.0）1000ml培养基的配制培养基的配制多黏菌素培养基蛋白胨6.0g除琼脂外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH值比最终的pH值高0.20.4,加入琼脂，加热溶化后，滤过，调节pH值，使灭菌后为6.56.7，灭菌牛肉浸膏1.5g胰消化酪素4.0g葡萄糖1.0g酵母浸膏3.0琼脂1520g水1000ml