肺炎双球菌转化实验(P58)课件.ppt
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- 肺炎双球菌 转化 实验 P58 课件
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1、一、肺炎双球菌转化实验(一、肺炎双球菌转化实验(P58)实验材料分析:实验材料分析:它的菌落它的菌落光滑光滑(Smooth),菌体菌体有多糖荚膜有多糖荚膜,是是有毒有毒性性的球型菌,能够使的球型菌,能够使人患人患肺炎或使小鼠患败血病。肺炎或使小鼠患败血病。它的菌落它的菌落粗糙粗糙(Rough),菌体菌体无荚膜无荚膜,是是无毒性无毒性的的球型菌。球型菌。R型菌型菌S型菌型菌加热杀死加热杀死的的S型菌型菌R型菌型菌+加热加热杀死的杀死的S型菌型菌实验一:活体转化:实验一:活体转化:1928年格里菲思的肺炎球菌转化实验年格里菲思的肺炎球菌转化实验活的活的S型菌!型菌!分离分离R R转化转化 R R型
2、活细菌型活细菌 S S型活细菌型活细菌 如何解释这一现象?如何解释这一现象?为什么转化因子没有和为什么转化因子没有和S型细菌一起被型细菌一起被”杀死杀死”?说明遗传物质说明遗传物质转化因子比较稳定,不容转化因子比较稳定,不容易变性失活。易变性失活。把把S S型菌中各种化合物分开,单独观察,确型菌中各种化合物分开,单独观察,确定唯一变量。定唯一变量。R R型菌,型菌, S S型菌的型菌的DNADNA、蛋白质及多糖、蛋白质及多糖等,细菌培养基,培养皿等,细菌培养基,培养皿S S 型型 细细 菌菌蛋白质蛋白质荚膜多糖荚膜多糖DNADNA分别与分别与R R型活细菌混合培养,观察有无型活细菌混合培养,观
3、察有无S S型细菌产生型细菌产生第一组第一组 第二组第二组 第三组第三组蛋白质蛋白质多糖多糖无转化无转化无转化无转化1944年艾弗里的离体转化实验年艾弗里的离体转化实验实验二:体外转化:实验二:体外转化:脂质脂质RNADNA无转化无转化无转化无转化DNA+DNA酶酶无转化无转化2022年3月28日4时51分 进一步证明:进一步证明:用反证法证明用反证法证明DNADNA是使是使R R型细型细菌发生转化的必要条件,使结论更加可靠。菌发生转化的必要条件,使结论更加可靠。而而且证明是且证明是DNA本身,而不是本身,而不是DNA的碎片或化学组成的碎片或化学组成单位使细菌发生了转化。单位使细菌发生了转化。
4、 结论:DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质 但是人们对但是人们对艾弗里艾弗里的实验的实验结论还表示怀疑?结论还表示怀疑? 因为因为艾弗里艾弗里提取的提取的DNA中还含有少量中还含有少量的蛋白质的蛋白质(至少含(至少含0.02)。)。 为此,为此,1953年年赫尔希、蔡斯又设计赫尔希、蔡斯又设计了了噬菌体侵染细菌的实验噬菌体侵染细菌的实验来证明来证明艾弗艾弗里里的结论(的结论(P49)二、噬菌体侵染细菌的实验二、噬菌体侵染细菌的实验T2噬菌体属于细菌病毒,噬菌体属于细菌病毒,营专性寄生生活,它的专营专性寄生生活,它的专一宿主为大肠杆菌。(是一宿主为大肠杆菌。(是怎么寄生的呢?)怎么寄生的呢?)
5、T2噬菌体的成分中,只有噬菌体的成分中,只有DNA和蛋白质两种物质。和蛋白质两种物质。 细菌细菌噬菌体噬菌体电子显微镜下的大肠杆菌和噬菌体电子显微镜下的大肠杆菌和噬菌体噬菌体侵染大肠杆菌的过程噬菌体侵染大肠杆菌的过程吸附吸附 注入注入 合成合成 组装组装 释放释放只把只把DNADNA注入注入到大肠杆菌中到大肠杆菌中以自身遗传物质以自身遗传物质DNADNA为模板,利用大肠杆为模板,利用大肠杆菌的原料合成新的菌的原料合成新的DNADNA和蛋白质。和蛋白质。DNA:C、H、O、N、P放射性同位素标记法放射性同位素标记法蛋白质:蛋白质:C、H、O、N、S35S32P二、噬菌体侵染细菌的实验二、噬菌体侵
6、染细菌的实验-赫尔希、蔡赫尔希、蔡斯斯蛋白质被蛋白质被35S标记标记DNA被被32P标记标记 能不能直接用含有能不能直接用含有35S和和32P的培养基的培养基培养噬菌体来标记?培养噬菌体来标记?32P标记了标记了DNA35S标记了壳体蛋白标记了壳体蛋白2 2、实验步骤:、实验步骤: 用已标记的两种噬菌体分别去侵用已标记的两种噬菌体分别去侵染染未标记未标记的大肠杆菌,并且进行的大肠杆菌,并且进行适当适当时间的保温时间的保温。二、噬菌体侵染细菌实验二、噬菌体侵染细菌实验32P标记了标记了DNA35S标记了壳体蛋白标记了壳体蛋白实验步骤:实验步骤: 用搅拌器搅拌,然后离心。用搅拌器搅拌,然后离心。搅
7、拌的作用搅拌的作用:为了使细菌外吸附着的:为了使细菌外吸附着的噬菌体蛋白质外壳与细菌分离噬菌体蛋白质外壳与细菌分离二、噬菌体侵染细菌实验二、噬菌体侵染细菌实验 实验室用的离心机实验室用的离心机离心的作用:离心的作用:离心是一种分离混合物的方法,离心是一种分离混合物的方法,通过离心,被感染的细菌通过离心,被感染的细菌( (含有子代噬菌体含有子代噬菌体的细菌的细菌) )会在下层的沉淀物中,噬菌体的蛋会在下层的沉淀物中,噬菌体的蛋白质外壳质量较小白质外壳质量较小, ,在上层的上清液中。在上层的上清液中。二、噬菌体侵染细菌实验二、噬菌体侵染细菌实验实验步骤:实验步骤: 用搅拌器搅拌,然后离心。用搅拌器
8、搅拌,然后离心。3535S S标记了壳体标记了壳体蛋白蛋白 32 32P P标记了标记了DNADNA32P标记了标记了DNA35S标记了壳体蛋白标记了壳体蛋白结果分析:结果分析: 蛋白质蛋白质不能进入细菌,而不能进入细菌,而DNADNA可以可以进入细菌并指导子代噬菌体的产生。进入细菌并指导子代噬菌体的产生。实验结论:实验结论:DNADNA是遗传物质。是遗传物质。 (1)、)、用用3535S S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,理标记的噬菌体侵染大肠杆菌,理论上沉淀物中不含放射性,但在沉淀物中也检论上沉淀物中不含放射性,但在沉淀物中也检测到少量放射性,为什么?测到少量放射性,为什么? 由于搅拌不充分,有
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