糖类脂质蛋白质的鉴定实验.课件.ppt
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- 关 键 词:
- 糖类 蛋白质 鉴定 实验 课件
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1、1实验原理实验原理某些化学试剂能够使生物组织中的有关有某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。机化合物产生特定的颜色反应。实验:检测生物组织中的糖类、实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质简记 “三特”:“特定的物质与特定的试剂反应产生特定的颜色”。物质物质试剂试剂颜色颜色还原糖还原糖斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀脂肪脂肪苏丹苏丹液液橘黄色橘黄色苏丹苏丹液液红色红色蛋白质蛋白质双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色淀粉淀粉碘液碘液蓝色蓝色(1)糖类糖类(2)脂肪苏丹脂肪苏丹染液染液橘黄色橘黄色脂肪苏丹脂肪苏丹染液染液红色红色(3)蛋白质双缩脲试剂蛋白质双缩脲试
2、剂紫色紫色(4)淀粉淀粉+碘液碘液蓝色蓝色 (二)目的要求 初步学会用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。 (三)实验仪器和试剂 (1)仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大、小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三角架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。 (2)试剂:斐林试剂,苏丹染液,双缩脲试剂。验证性实验和探究性实验验证性实验和探究性实验(1)验证性实验:是指实验者针对已知的实验结果而进验证性实验:是指实验者针对已知的实验结果而进行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培养实
3、验操作能力为目的的重复性实验。养实验操作能力为目的的重复性实验。(2)探究性实验:是指实验者在不知晓实验结果的前提探究性实验:是指实验者在不知晓实验结果的前提下,通过自己实验、探索、分析、研究得出结论,从下,通过自己实验、探索、分析、研究得出结论,从而形成科学概念的一种认识活动。而形成科学概念的一种认识活动。(3)验证性实验的实验结果通常是已知的,探究性实验验证性实验的实验结果通常是已知的,探究性实验的实验结果是未知的,这是两类实验的最大区别。的实验结果是未知的,这是两类实验的最大区别。(四)方法步骤 A还原性糖的鉴定 1选材:本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的
4、颜色较浅,或近于白色的,如苹果和梨的果实。经试验比较,颜色反应的明显程度,依次为苹果、梨、白萝卜。 2方法步骤: (1)制备生物组织样液先根据选材预测实验结果,然后再实验验证,因此先根据选材预测实验结果,然后再实验验证,因此本实验属验证性实验。本实验属验证性实验。 (2)实验操作的方法和观察 向试管内注入样液2 mL结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。(2)脂肪的检测和观察脂肪的检测和观察方法一:花生种子匀浆方法一:花生种子匀浆3滴苏丹滴苏丹染液染液橘黄色
5、橘黄色方法二:方法二:取材:花生种子取材:花生种子(浸泡浸泡),将子叶削成薄片,将子叶削成薄片 1选材: 实验材料最好选择富含脂肪的种子,如花生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子,必须提前浸泡34h。浸泡时间短了,不容易切成片;浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形。 2方法步骤: (1)制备生物组织实验材料(组织切片) (2)实验操作方法和观察 观察脂肪小颗粒:用显微镜观察薄片最薄处(最好一层细胞) (3)结论:该颗粒可被苏丹染液染成橘黄色,它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。 注意:花生子叶切片切得要薄(最薄处最好是一层细胞),因为切片较厚就观察不清
6、脂肪颗粒。特别提醒特别提醒实验用的花生种子需提前浸泡实验用的花生种子需提前浸泡34 h,浸泡时间,浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形。切下的薄片不易成形。(3)蛋白质的检测和观察蛋白质的检测和观察选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液 1选材: 选材:实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官),植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋清或新鲜肝脏研磨液(因为里面富含酶,而酶的成份主要是蛋白质)。如用大豆,必须提前浸泡12d,这样容易研磨成浆。有条件的话,可以直接采用现成的大豆磨成的豆
7、浆,如果用稀释的鸡蛋清或研磨的新鲜肝脏液做实验材料,实验效果会更好。 2方法步骤: (1)制备生物组织样液 (2)实验操作方法和观察 向试管内注入组织样液2 mL(或蛋白稀释液2 mL) (3)结论:组织样液加入双缩脲试剂A后,颜色变化为无色,再加双缩脲试剂B后,颜色的变化是紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏中有蛋白质。 注意:做鉴定蛋白质的实验时,在鉴定之前,要留出一些黄豆组织样液,以便用来与化学试剂发生反应后的颜色作对比,增强说服力。 若不用豆浆,用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液做实验材料,应稀释到一定程度,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘
8、固在试管的内壁上,使反应不容易彻底,并且试管不易刷干净。斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分0.1g/mL NaOH溶液0.05g/mL CuSO4溶液0.1g/mL NaOH溶液0.01g/mL CuSO4溶液鉴定物质还原糠蛋白质添加顺序甲乙两液等量混匀后立即使用先加入A液1mL,摇匀,再加入B液4滴,摇匀反应条件水浴5065加热不需加热,摇匀即可反应现象样液有砖红色沉淀产生样液变紫色 下列关于检测下列关于检测“生物组织中糖类、脂生物组织中糖类、脂肪、蛋白质肪、蛋白质”实验操作步骤的叙述中,正确实验操作步骤的叙述中,正确的是的是()A用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液,用于鉴定还原糖的斐林
9、试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定可直接用于蛋白质的鉴定B若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪,若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪,一定需要用显微镜观察一定需要用显微镜观察C鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂(甲液和乙液等量混合均匀再加入甲液和乙液等量混合均匀再加入)D用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,需水浴加用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,需水浴加热热2 min才能看到紫色才能看到紫色【思路点拨思路点拨】【尝试解答尝试解答】_【探规寻律探规寻律】斐林试剂和双缩脲试剂的比斐林试剂和双缩脲试剂的比较较(1)从成分方面比较,两种试剂都是由从成分方面比较,两种试剂都是由NaOH
10、溶液和溶液和CuSO4溶液组成的,但溶液组成的,但NaOH溶液浓溶液浓度相同,度相同,CuSO4溶液浓度不同;溶液浓度不同;(2)从试剂的使用方面比较,使用斐林试剂时,从试剂的使用方面比较,使用斐林试剂时,甲、乙两液等量混匀后立即使用。使用双缩甲、乙两液等量混匀后立即使用。使用双缩脲试剂时,先加入脲试剂时,先加入A液液1 mL,再加入,再加入B液液4滴,滴,摇匀;摇匀;C(3)从使用条件比较,斐林试剂与还原糖混合后从使用条件比较,斐林试剂与还原糖混合后需需50 65 水浴加热,而用双缩脲试剂鉴定水浴加热,而用双缩脲试剂鉴定蛋白质时不需要加热。蛋白质时不需要加热。跟踪训练跟踪训练检测生物组织中还
11、原糖、脂肪和检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的实验中,以下操作错误的是蛋白质的实验中,以下操作错误的是()A只有脂肪的鉴定需要使用显微镜只有脂肪的鉴定需要使用显微镜B用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热C使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用现用D可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀加热产生砖红色沉淀解析:解析:选选D。本题在于考查学生的动手能力,。本题在于考查学生的动手能力,实验操作是否正确、规范。正确回答这类题实验操作是否正确、规范。正确回答这类题目除了要亲自动手完成实验外,熟
12、记实验过目除了要亲自动手完成实验外,熟记实验过程的操作程序是解题的关键。脂肪的检测选程的操作程序是解题的关键。脂肪的检测选用的材料是花生子叶,切片后,染色制片用用的材料是花生子叶,切片后,染色制片用显微镜观察。可溶性还原糖和蛋白质的检测显微镜观察。可溶性还原糖和蛋白质的检测都是将生物材料制成样液,然后检测,不用都是将生物材料制成样液,然后检测,不用显微镜。需要隔水加热的是检测可溶性还原显微镜。需要隔水加热的是检测可溶性还原糖的实验;斐林试剂的甲液和乙液要先混合糖的实验;斐林试剂的甲液和乙液要先混合再使用,且要现配现用;双缩脲试剂中的再使用,且要现配现用;双缩脲试剂中的A液和液和B液不需混合,但
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