研究型组培室的设计规划课件.ppt

1、一、实验室设计 在建设组培实验室时,首先应选择安静、清洁、远离污染，位于上风口的的场所；然后根据要求的实验室的性质、规模来设计，但实验室设计的基本要求总是科学、高效、经济和实用；此外，组织培养实验室必须能满足三个需要：实验准备、无菌操作、控制培养。同时，我们还要注意组织培养程序，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。准备室 面积：20m2左右。 用途：器皿洗涤、培养基配置、分装、高压灭菌，植物材料的预处理，重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析，试管苗出瓶，清洗及整理工作。 要求：明亮、通风。设备：工作台，橱柜，水池，仪器，药品等。 【包括洗涤室、灭菌室】缓冲间 面积：约3-5m2左右。 用

2、途：进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的工作服、拖鞋，戴上口罩。 设备：1盏紫外灯，1个配电板，石英电力时控器等。无菌操作室 面积：10-20m2。 用途：材料的灭菌接种，无菌材料的继代，丛生菌的增殖或切割，嫩枝扦插生根等，是关键的部分，关系到培养物的污染率、接种工作效率等重要指标。 要求：干爽安静、清洁明亮、墙壁光滑平整不易积染灰尘，地面平坦无缝便于清洗和灭菌。门窗要密闭，一般用移动门窗。 设备：超净工作台、空调机，医用小平车，操作台、搁架等。培养室 面积：视培养架多少及培养物数量而定。 用途：将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。 设备： （1）培养架与灯光。培养架数目多少视生

3、产规模而定，年产4万-10万苗需4-6个培养架；年产10万-20万苗约需810个培养架。每个培养架一般6层，总高度2m，每0.3m为一层,最下一层距离地面0.2m架宽以0.6m为好，架长以40W日光灯的长度来决定，即约1.26m。每层架子安装2盏日光灯。 （2）通风设备。在稍高处设置进风气窗，在其对侧近天花板处设置排风窗。 （3）边台、空调机、加湿器（除湿器）、各类显微镜、温湿度计。实验室分布图二、设备添置 目的：目的：就是即好用，又够用，还能节省成本，在器材、设施的选择上，不要贪大求洋，应该在其是否实用上多下功夫。 器材选购原则器材选购原则：应该根据植物组织培养不同阶段的需要，选择不同的器材

4、、设施。只有从降低投入、提高工效、节约劳力等诸方面加以考虑，才能降低培养成本、提高效率。 器材分类器材分类：通用器具、盛具、计量器械、灭菌器械、接种器械、培养器械等几种类型。在使用这些容器、设备时，必须要了解它们的基本用途，并学会它们的基本用法。例如，不能给容量瓶加热；必须用磨砂玻璃灯罩来熄灭正在燃烧的酒精灯；应该定期更换超净工作如的无菌滤膜等等。详细操作可参考具体设备、容器的使用说明。【1】通用器械烧杯：用来盛放、溶解化学药剂等。常用的规格有50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml。烘箱：用来烘干器械。恒温水浴锅：用来溶解琼脂等物质。玻璃搅拌棒：用来配制培养基。洗耳球：用来

5、辅助吸取、转移少量液体。冰箱：用来贮存化学药剂、植物材料等。牛角勺：用来转移化学药剂。玻璃漏斗：用来过滤溶液。剪刀：用来修剪外植体或剪切嫩茎。器械架：在无菌操作期间用来放置灭菌的器烘箱：2000元每台恒温水浴锅单价在200至500元上下洗耳球、牛角勺洗耳球单价3到10元上下，牛角勺单价10到20元上下冰箱美的冰箱，1500元器械架、烧杯、玻璃棒、剪刀、镊子单价40元单价5到15元不等搪瓷浅盘：用来承载各种器械容器。塑料盆：用于清洗培养容器。铁丝筐：用来盛放灭菌容器等物品。纯水水桶：用来存放去离子水或蒸馏水，常用的规格有10L、20L。塑料桶：用来存放洗涤溶液、废弃溶液。各种规格的磨砂玻璃瓶：用

6、来盛放培养母液，以及各种植物生长物质。 各种盛具搪瓷盆、塑料盆、桶 单价5-20元上下磨砂玻璃瓶、培养皿单价2-10元纯水水桶单价15元单价100元计量器械量筒：用来量取一定体积的液体。常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml。容量瓶：用来配制标准溶液。常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml。大肚移液管：用来吸取定量溶液。常用的规格有1ml、5ml、10ml。刻度移液管：用来吸取定量植物生长物质溶液。常用的规格有1ml、5ml、10ml。移液管架：用来放置、固定移液管。酸度计：用来检测培养基的pH。药物天平：用来称取配制培养基的药品。分析天平：用

7、来称取少量有化学试剂，进行化学分析。量筒、容量瓶价格2-15元大肚移液管、刻度移液管、移液管架价格5-15元酸度计、药物天平、分析天平价格：1500元价格：165元价格：1880元价格：320元价格：80元灭菌器械磨砂口玻璃瓶：用来对植物材料进行表面灭菌。酒精灯：用来进行接种器材的表面灭菌。细菌过滤器：用来过滤不能进行高温灭菌的试剂溶液。无菌滤纸：用来汲取器材、植物材料表面的水分。无菌脱脂棉：用来进行器械、植物材料表面的灭菌处理。真空泵：用来吸滤灭菌。高压灭菌锅：对培养基、接种器材进行灭菌处理。可调试电炉：用来加热高压灭菌锅。皮下注射器：用来对溶液进行过滤、除菌。紫外线灭菌灯：用来对接种室、培

8、养室、操作室等工作环境进行灭菌处理。细菌过滤器 价格5-10元无菌滤纸、无菌脱脂棉价格：5-15元价格：10-30元真空泵、高压灭菌锅价格：73元价格：27元价格：730元紫外线灭菌灯、皮下注射器价格：90元价格：60元接种器械超净工作台：用来过滤通过接种工作台面的空气，以便进行无菌操作。小型喷雾器：装载灭菌药液，来给超净工作台等处喷雾灭菌。钝头镊子：在接种操作、继代培养时移取植物材料。尖头镊子：用来分离植物材料。解剖刀：用来切割植物材料。打孔器：用来切取大小一致的圆柱形植物材料。双目显微镜：在解剖较小的外植体时，用来观测材料。细菌滤膜：用来进行溶液的常温除菌。接种针：用来转移细胞团、愈伤组织

9、。超净工作台价格：4100元小型喷雾器、双目显微镜单价：20元价格：1050元钝头镊子、尖头镊子、解剖刀价格：13块价格：20-30元接种针价格：5、6元每只培养器械试管：用来作为外植体的培养容器。常用的规格有2cm15cm、3cm15cm。培养皿：用来作为外植体的培养容器。常用的规格有直径9cm、12cm。锥形瓶：即三角烧瓶，主要作为培养器材，常用的规格有50ml、00ml。显微镜：用来观察植物材料。成套载玻片：用来制作植物材料显微制片。铝箔：用于培养容器封口。橡皮筋：用来束紧培养容器的封口材料。血球计数器：用来进行植物细胞计数。空调：用来调节操作间、培养室的温度。摇床：用来进行细胞悬浮培养

10、试管、锥形瓶、成套载玻片价格：20元单价：0.5元价格：10元价格：25元显微镜、血球计数器 价格：180元每台价格：130元摇床价格：15000元价格：13000元铝箔价格：2000元价格：10元三、药品添置 在植物组织培养中，所使用的化学药剂通常为化学试剂，根据它们的纯度化学试剂可以分为优级纯（GR.）、分析纯（AR.）、化学纯（CP.）等规格。在研究型的组织培养中，我们一般可以采用分析纯或优极纯的药剂。 以MS培养基培养基为例，其使用的常用化学药剂如下：(1)硝酸铵：硝酸铵：亦称硝铵。化学式为NH4NO3，式量为80.048，其纯品为无色透明菱形结晶，比重1.73，易溶于水，并吸收大量的

11、热，在空气中容易潮解。水溶液呈中性反应。由于硝酸铵是一种易燃、易爆物，因此在使用中应该贮存在阴冷之处。已经结块的硝酸铵切忌敲打、撞击，可用水进行溶解。(2)硝酸钾硝酸钾：亦称火硝。化学式为KNO3，式量为101.104，其纯品为无色透明的棱柱结晶，比重2.10，易溶于水，几乎不溶于无水乙醇。(3)氯化钙氯化钙：亦称无水氯化钙。化学式为CaCl2，式量为110.99，其纯品为白色结晶，比重2.15，在空气中具强吸湿性，易溶于水同时放出大量的热。(4)硫酸镁硫酸镁：亦称泻盐。化学式为MgSO47H2O，式量为246.50，其纯品为透明菱形结晶，比重1.68，具苦味，易溶于水，不溶于乙醇，在空气中稍

12、风化。(5)磷酸二氢钾磷酸二氢钾：亦称磷酸钾复合肥。化学式为KH2PO4，式量为136.09，其纯品为正方形无色结晶，比重2.33，有较强的酸味，易溶于水，不溶于乙醇。溶液呈微酸性反应。磷酸二氢钾在96时会溶化成透明的液体，这样就会转化为偏磷酸钾，因此在使用时注意不要使它经受高温环境。(6)碘化钾碘化钾：化学式为KI，式量为166.02，其纯品为透明的小块结晶，比重3.115，在干燥的空气中稳定，易溶于水，其水溶液在遇光后因析出游离碘而逐渐变黄。(7)硼酸硼酸：亦称正硼酸。化学式为H3BO3，式量为61.84，其纯品为六角形白色鳞片状结晶，具珠光，比重1.46，溶于水，易溶于乙醇，当加热至10

13、7时会失去部分的水，而转变为偏硼酸。水溶液呈酸性反应。 (8)硫酸锰硫酸锰：化学式为MnSO45H2O，式量为241.07，其纯品为红色结晶，比重2.1，具金属味，易溶于水，不溶于乙醇。在制备过程中，如果溶液在-46间结晶时，可制成七水硫酸锰（MnSO47H2O）；在2040间时，可获得四水硫酸锰（MnSO47H2O）；在280时加热，带有结晶水的硫酸锰直至恒重，则可获得无水硫酸锰（MnSO4）。(9)硫酸锌硫酸锌：亦称锌矾。化学式为ZnSO47H2O，式量为287.55，其纯品为无色菱形结晶，比重1.96，在干燥的空气中会风化，易溶于水，当39时溶于所含结晶水，并转变为ZnSO46H2O。(

14、10)钼酸钠钼酸钠：化学式为Na2MoO4，式量为241.98，其纯品为无色结晶，溶于水。 (11)硫酸铜硫酸铜：亦称胆矾。化学式为CuSO45H2O，式量为249.71，其纯品为深蓝色结晶，比重2.29，具强烈的金属味，易溶于水，在干燥的空气中容易风化，而变成白色粉末，即无水硫酸铜。水溶液呈弱酸性反应。 (12)氯化钴氯化钴：亦称氯化亚钴。化学式为CoCl26H2O，式量为372.26，其纯品为红色单斜结晶，比重1.84，在室温下稳定，极易溶于水，可溶于乙醇。在4552时加热，会逐渐变为CoCl24H2O。 (13)乙二胺四乙酸二钠乙二胺四乙酸二钠：化学式为Na2EDTA2H2O，式量为37

15、2.26，其纯品为白色结晶状粉末，无味、无毒、可溶于水，容易和金属离子形成络合物。 (14)硫酸亚铁硫酸亚铁：亦称黑矾、铁矾。化学式为FeSO47H2O，式量为278.02，其纯品为淡绿色结晶，比重1.89，易溶于水，不溶于乙醇，在干燥空气中风化而变为白色粉末。 (15)甘氨酸甘氨酸：亦称氨基醋酸、氨基乙酸。化学式为C2H5NO2，式量为75.07。纯品为白色结晶性粉末。味甜，能溶于水，微溶于醇，几乎不溶于醚。233开始分解。密封闭光保存。 (16)肌醇肌醇：亦称环已六醇。化学式为C6H12O6，式量为180.16。为构建细胞壁的材料。它在离子平衡、磷脂代谢、碳水化合物合成等过程中起着重要的作

16、用。 （17）烟酸烟酸：亦称维生素B5。化学式为C6H5NO2，式量为123.11。纯品为无色针状结晶。无气味，在空气中稳定，能溶于水、乙醇、不溶于醚、酯类溶剂。熔点236。密封闭光保存。 (18)盐酸吡哆醇盐酸吡哆醇：亦称维生素B6、盐酸吡哆素。化学式为C8H12ClNO3，式量为205.64。纯品为白色结晶。无气味，在空气中稳定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。205212分解。密封闭光保存。 (19)盐酸硫胺素盐酸硫胺素：亦称维生素B1。化学式为C12H17ClN4OSHCl，式量为337.28。纯品为白色结晶。在空气中稳定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。密封闭光保存。 (20)6-苄基腺嘌呤苄基

17、腺嘌呤：缩写为BA，亦称6-BA、普鲁马林。是一种植物生长调节剂，化学式为C12H11N5，式量为225.26。纯品为白色结晶，熔点235，难溶于水，易溶于丙酮、乙醇等有机溶剂，在酸性介质中较为稳定。其主要的生理作用为能够促进蛋白质的合成，诱导芽分化，延缓叶衰老，促进细胞分裂。(21)萘乙酸萘乙酸：缩写为NAA，亦称-萘乙酸、生长素、1-萘乙酸。是一种植物生长调节剂，化学式为C12H10O2，式量为186.20。纯品为白色针状结晶，熔点133135，沸点285（分解）。在冷水中微溶，在热水中易溶，易溶于冰醋酸、丙酮、乙醚等有机溶剂中。在空气潮解，见光会变色。它有和两种类型，通常所说的萘乙酸指的

18、是型。其主要生理作用为能够诱导根分化，防止器官脱落，诱导无籽果实，促使种子萌发等。(22)腺嘌呤腺嘌呤：缩写为AD，化学式为C5H5N53H2O，式量为189.13。纯品为白色结晶性粉末。在空气中稳定，微溶于水。它是合成细胞分裂素的前体，主要的生理功能为促进细胞分裂。(23)赤霉酸赤霉酸：缩写为CA3，亦称激动素，滥长素、九二零等。是一种植物激素，纯品为八面体双锥形白色结晶，熔点233-235 (分解)，难熔于水，其钾盐、钠盐易溶于水，易熔于丙酮、甲醇、乙醇。赤霉素的化学性质比较稳定，但应该在低温环境下进行贮藏，其水溶液不稳定。其主要的生理作用为促进细胞的伸长，防止离层形成，能够解除休眠。(2

19、4)蔗糖：化学式为C12H22O11，式量为342.30。纯品为无色单斜型结晶、白色颗粒或晶体粉未。味甜，在空气中稳定，易溶于水，能溶于乙醇，可被稀酸水解为果糖、葡萄糖。在160-180间分解。密封保存。(25)琼脂琼脂：亦称洋菜。是从石花菜等海藻中所提取的白色粘胶状物质，在热水中能溶解，其溶液遇冷凝固，可用于配制培养基，作为外植体的支撑物。(26)肌醇：肌醇：化学式为C6H12O6，式时为180.16。纯品为白色结晶粉末，有甜味，在空气中不潮解。溶于水，微溶于醇，熔点225-227。密封保存。药品价格表 氢氧化钾13元/瓶 100ml 过磷酸钙20元/瓶 100ml 氯化钾20元/瓶 100

20、ml 过硫酸铵16元/瓶 100ml 磷酸二氢钠16元/瓶 100ml 磷酸二氢钾 19元/瓶 100ml 七水硫酸镁13元/瓶 100ml 二水氯化钙18元/瓶 100ml 硫酸铵10元/瓶 100ml 硝酸钙17元/瓶 100ml 硝酸铵19元/瓶 100ml 硝酸钾20元/瓶 100ml 硫酸钾25元/瓶 100ml 磷酸氢二钠14元/瓶 100ml硫酸铜硫酸铜28元元/瓶瓶 100ml 氯化钴50元/瓶 100ml 钼酸钠260元/瓶 100ml 碘化钾162元/瓶 100ml 硼酸 16元/瓶 100ml 硫酸锌24元/瓶 100ml 硫酸锰28元/瓶 100ml 硫酸亚铁15元/瓶

21、 100ml 乙二胺四乙酸铁钠EDTA-FeNa20元/瓶 100ml 乙二胺四乙酸二钠EDTA-Na240元/瓶 100ml叶酸叶酸 VM25元元/瓶瓶100ml 维生素B12 VB12160元/瓶100ml 盐酸吡哆辛（醇） VB614元/瓶100ml D-泛酸钙 VB520元/瓶100ml 烟酸（尼克酸） VB360元/瓶100ml 核黄素 VB250元/瓶100ml VB1盐酸硫胺素15元/瓶100ml 肌醇220元/瓶100ml预算 培养基配置室：5000元 洗涤室： 200元 灭菌室： 4000元 缓冲室： 400元 接种室： 14700元 培养室： 17500元 其他： 5000元 总计： 46800元精品课件精品课件！精品课件精品课件！谢谢观赏谢谢观赏Thank you!