直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件.ppt

1、直接抗人球蛋白试验阳性的意义?红细胞抗原的自身抗体?近期输血的受血者血浆中的同种抗体与输入的供血者红细胞抗原反应?输入的供血者血液或血液成分中的抗体与受血者红细胞抗原反应?孕妇体内的同种抗体通过胎盘致敏胎儿红细胞上?抗菌药物（如青霉素）的抗体与药物致敏的红细胞相结合?红细胞膜受某些药物（以头孢菌素类最多见）疗法而改变，导致蛋白质（包括免疫球蛋白）非特异性地被红细胞膜所吸收?对给予药物（如奎尼丁及非那西丁）的反应形成药物-抗药物复合体，使补体成分、IgG抗体（占少数）与红细胞相结合?为减少器官及骨髓移植患者的T细胞群体，应用有嗜异性抗体存在的马抗人淋巴细胞球蛋白时?非抗体介导的丙球蛋白过高患者直

2、接抗人球蛋白试验阳性的评价直接抗人球蛋白试验阳性的评价?血液标本的收集?初步的血清学研究?进一步的研究自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血一、概念一、概念?免疫性溶血免疫性溶血是指由于免疫反应而使红细胞破坏加速，寿命缩短的过程。?溶血性贫血溶血性贫血是由于红细胞破坏增多、增速， 超过造血补偿能力范围，所发生的一种贫血。?自身免疫性溶血性贫血是由于机体免疫功能异常，产生了抗自身红细胞的抗体，使红细胞破坏加速造成的溶血性贫血，在后天性溶血性贫血中多见。二、分类二、分类免疫性溶血性贫血可分为三三类?同种免疫性溶血性贫血?自身免疫性溶血性贫血?药物引起的免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血可分为四

3、种主要类型：1、 温抗体型自身免疫溶血性贫血 （WAIHA）原发性的（自发性）继发性的（与淋巴瘤、系统性红斑狼疮、癌症或药物处理有关）2、 冷凝集素综合征（CAS）原发性的（自发的）继发性的（与淋巴瘤支原体肺炎、传染性单核细胞增多症 有关）?混合型自身免疫性溶血性贫血混合型自身免疫性溶血性贫血 （MTA）原发性的（自发的）继发性的（与系统性红斑狼疮、淋巴瘤有关）（与系统性红斑狼疮、淋巴瘤有关）?阵发性寒冷性血红蛋白尿阵发性寒冷性血红蛋白尿 （PCH）原发性的（自发性的）（自发性的）继发性的（与梅毒、病毒感染有关）。三、血清学特征三、血清学特征温抗体型自身免疫溶血性贫血温抗体型自身免疫溶血性贫血

4、（WAIHA）常见的自身免疫性溶血性贫血，约占 所有免疫性溶血性病例的48 70%，与温反应性自身抗体有关WAIHA典型的血清学特征典型的血清学特征1 、直接抗球蛋白试验使用单特异性IgG及抗C3试剂时，可有 三种形式的反应：单独IgG反应、单独C3致敏、IgG+C3致敏，2、在血清中的自身抗体是IgG型的，与所有的红细胞在 间接抗人球蛋白试验中都呈阳性反应。血清中的游离抗体量非常少。3、放散液中可检到IgG抗体。4、自身抗体特异性主要是针对Rh抗原复合物 ，但只有在得到稀有表现型红细胞，如D阴性，或Rhnull时才能明确冷凝集素综合征（冷凝集素综合征（CAS）CAS（也称冷凝集素疾病CHD)

5、，是与冷反应自身抗体有关的溶血性贫血中最常见的一种类型，约占所有免疫性溶血性病例的16-32%。可有急性和慢性两种情况。CAS典型的血清学特征1.直接抗球蛋白试验补体是红细胞上唯一能被检出的蛋白。多特异性抗球蛋白试剂中抗C3d（C4d）成分是造成DAT阳性的原因。2血清在4温度测定与免疫性溶血有关的IgM冷反应性自身凝集素效价常大于1，000以上；在体外用超过32温度盐水悬浮红细胞时则很少有反应。若在反应介质中加入30%牛白蛋白时，70%有临床意义的样本将在37反应3、放散液若红细胞在37收集和洗涤，细胞上没有免疫球蛋白，放散液中不会有反应发生。?4、自身抗体的特异性?最 常 见 与CAS有

6、关 的 特 异 性 为 抗I。较不常见的抗i特异性则与感染性单核球症有关。在及稀有的情况下，血清中冷反应性自身凝集素具有Pr特异性或其他特异性。?阵发性寒冷性血红蛋白尿（阵发性寒冷性血红蛋白尿（PCH）是DAT阳性的自身免疫性溶血性贫血症最少见的类型，成人中很少见，儿童中占32%。较为 常 见PCH是急性暂时的情况，继发于病毒感染症，尤其在幼童当中。它也能出现在老年人中，为一特发性的慢性病。PCH典型的血清学特征1 、直接抗球蛋白试验PCH中的自身抗体是IgG，它和IgM冷自身凝集素一样，在身体较冷的部位，PCH的IgG自身抗体与红细胞起反应，使补体成分（C3及C4）与红细胞发生不可逆的结合，

7、然后在较温暖的部位IgG分离。所以直抗阳性是补体造成的。2 、血清免疫球蛋白类型在PCH中IgG自身抗体，习惯上称为 双相性溶血素，因为它在低温与红细胞相结合，在37 时 使 致 敏 红 细 胞 溶 血 。Donath Landsteiner (DL)试验是诊断这种疾病的基础。3 、释放液免疫球蛋白类型由于补体成分是循环红细胞上唯一存在的球蛋白，因此从PCH病人红细胞上得到的洗脱液一般是没有活性的。4 、自身抗体的特异性PCH的自身抗体大部分呈现抗- P特异性，与所有的红细胞（包括病人自己的红细胞）起反应，与罕见p或Pk表现型不反应。亦有例子报告具有抗- I、抗- i和抗- Pr等特异性。?病

8、人的红细胞是抗体还是补体致敏？病人的红细胞是抗体还是补体致敏？?血清中有抗体吗？如果有，这些抗体是凝集还是非凝集性抗体？体外溶血吗？最适反应温度是暖（37 ）还是冷（4 ）？是自身抗体还是同种抗体？?洗脱液中有抗体活性吗？四、具有自身抗体的患者的血清学检查四、具有自身抗体的患者的血清学检查（一）、输血前试验中可能存在的问题输血前试验中可能存在的问题1、 冷型反应性自身抗体能引起自身凝集反应，致使ABO及Rh分型试验结果发生矛盾。自身抗体亦凝集血清分型试验所用的A型和B型试剂红细胞。2、 被球蛋白致敏的红细胞在接触到高蛋白含量的商品化的抗- Rh血清试剂时，可发生自发性的凝集反应，致使Rh定型试

9、验的结果发生矛盾。3、血清里存在游离的自身抗体时，不可能获得在血清学上完全相配合的血液。这种情况下要考虑自身抗体可能掩盖有临床意义的同种抗体的存在 。倘若时间允许，在输血前应测定是否存在同种抗体解决ABO定型中的问题1 、采集标本后，立即将标本放入37 并在试验前用温盐水（37 45 ）洗涤红细胞。2、用硫醇类试剂（2-Me、DTT等）处理红细胞。3、反定型中，可将血清和A、B红细胞在37预热进行试验。4、用吸收后血清进行试验（自身吸收的或用纯合子O型红细胞吸收的解决Rh定型中的问题1、由冷自身抗体造成可用解决ABO定型问题的方法来避免。2、由IgG致敏的红细胞，试验必须要进行适当的对照试验。

10、 或使用使用有盐水反应活性的试剂。（二）在有自身抗体存在时检测同种抗体1 、有温型反应性抗体存在时检测同种抗体?自身吸收?异体吸收法?稀释技术2 、有冷型反应性抗体存在时检测同种抗体?用病人本身红细胞在4吸收血清?试验应严格掌握在37?禁止使用小牛白蛋白和其它增强介质?使用EDTA抗凝血浆或加EDTA的血清?使用抗-IgG试剂，不用多特异性抗蛋白血清五、自身免疫溶血性贫血病人的输血指南五、自身免疫溶血性贫血病人的输血指南?为患WAIHA病人选择血液?为患CAS病人选择血液?为患PCH病人选择血液hc72)$XSNIDytoje94+&#VQLGBwrmhc72)$XSNIDytoje94+*#

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