高压脉冲电场杀菌课件.ppt
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1、第十三章第十三章高压脉冲电场杀菌高压脉冲电场杀菌定义定义脉冲电场脉冲电场(Pulsed Electric Fields, PEF)处理是处理是一种新型的非热食品杀菌技术一种新型的非热食品杀菌技术它是以较高的电场强度它是以较高的电场强度(10-50kV/cm)、较短、较短的脉冲宽度(的脉冲宽度(0-100s)和较高的脉冲频率)和较高的脉冲频率(0-2000Hz)对液体、半固体食品进行处)对液体、半固体食品进行处理,并且可以组成连续杀菌和无菌灌装的理,并且可以组成连续杀菌和无菌灌装的生产线。生产线。高压脉冲电场技术的发展历程高压脉冲电场技术的发展历程上个世纪上个世纪 60 年代,年代,Sale 和
2、和 Hamilton 等学者率先等学者率先对对 PEF 灭菌技术进行了研究,并通过实验证明了灭菌技术进行了研究,并通过实验证明了 PEF 的非热效应。的非热效应。80 年代以后,年代以后,Hulsheger、Zimmermann 等学者等学者对对 PEF灭菌机理做了进一步探讨,并研制出了小灭菌机理做了进一步探讨,并研制出了小型试验设备。型试验设备。90 年代后,华盛顿州立大学研制出了较为成熟的年代后,华盛顿州立大学研制出了较为成熟的设备,并获得了专利。设备,并获得了专利。Zimmermann 等人还对指等人还对指数衰减脉冲波、振荡脉冲波和矩形脉冲波的灭菌数衰减脉冲波、振荡脉冲波和矩形脉冲波的灭
3、菌效果做了对比研究,发现矩形脉冲波的作用效果效果做了对比研究,发现矩形脉冲波的作用效果最好。最好。目前较为成熟的是华盛顿州立大学食品非热研究目前较为成熟的是华盛顿州立大学食品非热研究中心利用脉冲电容储能,触发放电产生指数衰减中心利用脉冲电容储能,触发放电产生指数衰减型高压脉冲研制的型高压脉冲研制的 PEF 处理实验系统,以及随后处理实验系统,以及随后利用脉冲成型网络(利用脉冲成型网络(PFN)研制的高压方波)研制的高压方波 PEF 处理实验系统。处理实验系统。2000 年美国年美国 DTI 公司为俄亥俄州立大学食品技术公司为俄亥俄州立大学食品技术系设计制造了第一台商用系设计制造了第一台商用 P
4、EF 处理系统处理系统PEF 技术是近年来研究最多的食品非热处理技术技术是近年来研究最多的食品非热处理技术之一。之一。国内状况l与国外相比,国内有关非热加工技术的研究起步晚、研究与国外相比,国内有关非热加工技术的研究起步晚、研究少。少。l国内在上世纪国内在上世纪 90 年代后期开始进行年代后期开始进行 PEF 杀菌方面的研究,杀菌方面的研究,目前主要有江南大学、中国农业大学、清华大学、华南理目前主要有江南大学、中国农业大学、清华大学、华南理工大学、吉林大学、浙江大学和大连理工大学等高校在开工大学、吉林大学、浙江大学和大连理工大学等高校在开展展 PEF 技术的相关研究技术的相关研究l江南大学从美
5、国俄亥俄州立大学购置一套江南大学从美国俄亥俄州立大学购置一套 OSU-4L 型型 PEF 杀菌设备,并进行了较为基础性的研究和设备改造杀菌设备,并进行了较为基础性的研究和设备改造l中国农业大学、吉林大学和华南理工大学等机构对中国农业大学、吉林大学和华南理工大学等机构对 PEF 对果蔬汁中杀菌钝酶效果及机理研究做了许多基础工作对果蔬汁中杀菌钝酶效果及机理研究做了许多基础工作l浙江大学、清华大学在浙江大学、清华大学在 PEF 设备和处理腔设计方面取得设备和处理腔设计方面取得了一定成果了一定成果国内状况与国外相比,国内有关非热加工技术的研究起步晚、研究少。与国外相比,国内有关非热加工技术的研究起步晚
6、、研究少。国内在上世纪国内在上世纪 90 年代后期开始进行年代后期开始进行 PEF 杀菌方面的研究,杀菌方面的研究,目前主要有江南大学、中国农业大学、清华大学、华南理目前主要有江南大学、中国农业大学、清华大学、华南理工大学、吉林大学、浙江大学和大连理工大学等高校在开工大学、吉林大学、浙江大学和大连理工大学等高校在开展展 PEF 技术的相关研究技术的相关研究江南大学从美国俄亥俄州立大学购置一套江南大学从美国俄亥俄州立大学购置一套 OSU-4L 型型 PEF 杀菌设备,并进行了较为基础性的研究和设备改造杀菌设备,并进行了较为基础性的研究和设备改造中国农业大学、吉林大学和华南理工大学等机构对中国农业
7、大学、吉林大学和华南理工大学等机构对 PEF 对对果蔬汁中杀菌钝酶效果及机理研究做了许多基础工作果蔬汁中杀菌钝酶效果及机理研究做了许多基础工作浙江大学、清华大学在浙江大学、清华大学在 PEF 设备和处理腔设计方面取得了设备和处理腔设计方面取得了一定成果一定成果l近年来,我国学术期刊上出现少量关于 PEF 在食品保藏中应用的报导,但远没有国外研究的深入l可以说,我国对 PEF 技术的研究方兴未艾,但与国外相比尚存在较大差距。高压脉冲电场杀菌机理高压脉冲电场杀菌机理l目前目前 PEF 对微生物的作用机理尚不完全清楚对微生物的作用机理尚不完全清楚l多数学者认为多数学者认为 PEF 是通过外部电场与微
8、生物细胞是通过外部电场与微生物细胞膜直接作用,从而破坏细胞膜的结构,形成膜直接作用,从而破坏细胞膜的结构,形成“电穿电穿孔孔”而导致微生物灭活而导致微生物灭活l微生物细胞和外环境之间进行着活跃的物质交换,微生物细胞和外环境之间进行着活跃的物质交换,细胞膜的完整性对保证细胞生命活动的正常进行有细胞膜的完整性对保证细胞生命活动的正常进行有着极其重要的作用着极其重要的作用lPEF 的杀菌作用与其对微生物细胞膜的影响密切相的杀菌作用与其对微生物细胞膜的影响密切相关关l当微生物被置于高压脉冲电场中时,细胞膜会被破当微生物被置于高压脉冲电场中时,细胞膜会被破坏,从而导致细胞内容物外渗,引起细胞死亡。坏,从
9、而导致细胞内容物外渗,引起细胞死亡。 (一)细胞膜的电穿孔(一)细胞膜的电穿孔(electroporation) 电穿孔现象是指细胞暴露在电穿孔现象是指细胞暴露在 PEF 作用下出现的细胞作用下出现的细胞膜失稳并在细胞膜上形成小孔的现象。细胞质膜通透性大膜失稳并在细胞膜上形成小孔的现象。细胞质膜通透性大幅增加,胞内的渗透压高于细胞外,最终导致细胞膜的破幅增加,胞内的渗透压高于细胞外,最终导致细胞膜的破损。损。其基本原理如下:其基本原理如下: 设细胞为球形,其所处外电场诱导的膜电位可由下式设细胞为球形,其所处外电场诱导的膜电位可由下式表示:表示: 式中,式中,r是细胞的半径,是细胞的半径,E是外
10、加电场强度,是外加电场强度,是电场是电场方向与指定点法线之间的夹角,方向与指定点法线之间的夹角,是外加交流电场的角频是外加交流电场的角频率,率,t是细胞膜电介质的弛豫时间常数。是细胞膜电介质的弛豫时间常数。PEF 杀菌效果杀菌效果 lPEF 杀菌实验的指示微生物包括枯草芽抱杀菌实验的指示微生物包括枯草芽抱杆菌、德氏乳杆菌、单核细胞增生李斯特杆菌、德氏乳杆菌、单核细胞增生李斯特氏菌、荧光假单孢菌、啤酒酵母、金黄色氏菌、荧光假单孢菌、啤酒酵母、金黄色葡萄球菌、嗜热链球菌、大肠杆菌、大肠葡萄球菌、嗜热链球菌、大肠杆菌、大肠杆菌杆菌 O157、霉菌和酵母等、霉菌和酵母等l研究结果表明研究结果表明 PE
11、F 处理对这些微生物的营处理对这些微生物的营养体细胞均有较好的杀灭作用,但芽孢表养体细胞均有较好的杀灭作用,但芽孢表现出较强的耐受性。现出较强的耐受性。影响高压脉冲电场杀菌的因素影响高压脉冲电场杀菌的因素 影响影响PEF杀菌的因素有很多,它们严重影响着杀菌效杀菌的因素有很多,它们严重影响着杀菌效果,基本上分为加工因素,产品因素和微生物特征因素。果,基本上分为加工因素,产品因素和微生物特征因素。高压脉冲电场对食品组分的影响高压脉冲电场对食品组分的影响 1、PEF 对食品蛋白质组分的影响对食品蛋白质组分的影响 酶是一种具有催化活力的特殊蛋白质,酶是一种具有催化活力的特殊蛋白质,PEF 处理可以钝化
12、酶活和改变酶的结构处理可以钝化酶活和改变酶的结构那么那么 PEF 也必然会对食品蛋白质组分的结构与功能也必然会对食品蛋白质组分的结构与功能产生影响产生影响而且从原理上讲,脉冲电场会影响蛋白质基团间的而且从原理上讲,脉冲电场会影响蛋白质基团间的静电相互作用和带电基团的定位,扰乱蛋白质氨静电相互作用和带电基团的定位,扰乱蛋白质氨基酸残基间的电场分布和静电相互作用,导致电基酸残基间的电场分布和静电相互作用,导致电荷分离,从而影响蛋白质的结构(二级和三级)荷分离,从而影响蛋白质的结构(二级和三级)另外,电极周围的电化学反应也可能会对包括蛋白另外,电极周围的电化学反应也可能会对包括蛋白质在内的食品组分产
13、生一定的影响。质在内的食品组分产生一定的影响。Barsotti等报道,等报道,PEF 处理不会引起卵球蛋白的明显变性,处理不会引起卵球蛋白的明显变性,而而 PEF 处理过的蛋清蛋白的热凝胶性能稍有下降,但还处理过的蛋清蛋白的热凝胶性能稍有下降,但还是明显好于热处理的蛋清;是明显好于热处理的蛋清;Li 等报道,在使微生物数目等报道,在使微生物数目减少减少5.3 个对数值的作用强度下,个对数值的作用强度下,PEF 对牛奶免疫球蛋白对牛奶免疫球蛋白(IgG)的活性和结构的影响不显著)的活性和结构的影响不显著 ;Fernandea-Diaz 等用等用 31.5KV/cm 左右的指数衰减脉冲电左右的指数
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