药物分析学课件：第六章维生素类药物的分析.pptx

1、u药物分析教研室 徐新军uE-mail: uTEL:13924061779第六章 维生素类药物的分析 Analysis of Vitamin Drugs2目的和要求（目的和要求（Objectives）1 1、掌握维生素类药物的结构特征与性质及分析、掌握维生素类药物的结构特征与性质及分析方法间的关系！方法间的关系！2 2、熟悉维生素类药物的鉴别试验、杂质检查和、熟悉维生素类药物的鉴别试验、杂质检查和含量测定的方法原理与结果计算。含量测定的方法原理与结果计算。3 3、了解维生素类药物分析方法的操作要点。、了解维生素类药物分析方法的操作要点。3成分相互配合，协同作用，能够促进人体新陈代谢，吸收与分解

2、糖分，迅速补充大量的能量物质，并调节神经系统功能，从而取得提神醒脑、补充体力、抗疲劳的卓越功效牛磺酸 （125mg）、肌醇 （50mg）、赖氨酸（50mg） 、咖啡因 （50mg）、维生素PP（10mg） 、维生素B6（1mg） 、维生素B12（3ug）。牛磺酸牛磺酸 : 125mg赖氨酸赖氨酸： 50mg咖啡因咖啡因： 50mg肌醇：肌醇： 50mg维生素维生素B6：1mg维生素维生素B12：3ug烟酰胺：烟酰胺： 10mg45维生素（维生素（vitamin）：维生素是维持人体正常生理机能所必需的维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质，生物活性物质，人体不能合成维生素人体不能合成维

3、生素。如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。缺乏症，而影响人体的正常生理机能。例如：维生素例如：维生素A 缺乏缺乏夜盲症夜盲症维生素维生素B1缺乏缺乏脚气病脚气病维生素维生素C 缺乏缺乏？6A、D2、D3、 E、K1 等等 脂溶性脂溶性水溶性水溶性 B族族 (B1、B2、B6、B12)C、叶酸（叶酸（B9）、）、烟酸、泛酸烟酸、泛酸维生素的分类维生素的分类:7CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3-H 维生素维生素A醇醇-COCH3 维生素维生素A醋酸酯醋酸酯-COC15H31 维生素维生素A棕榈酸酯棕榈酸酯R :第一节

4、 维生素A共轭多烯醇侧链的环己烯共轭多烯醇侧链的环己烯8溶溶解度解度1、不溶于不溶于水，乙醇中微溶。水，乙醇中微溶。易溶于易溶于乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油等乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油等结构结构与理化性与理化性质质一、一、CH3CH3CH2ORCH3CH3CH39酸酸醛醛环氧化物环氧化物、氧化剂、氧化剂紫外线、紫外线、VitAVitAVitAOO2加热或有金属离子存在时氧化加热或有金属离子存在时氧化易氧化易氧化性性（1）2、聚多烯结构、聚多烯结构CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3共轭多烯醇侧链的环己烯共轭多烯醇侧链的环己烯避光保存，加入合适的抗氧剂避光保存，加入合适的抗

5、氧剂10环氧化物环氧化物OCH2OHVitA醛醛HOCVitA酸酸COOH11（2 2）形成二聚体）形成二聚体CH2OHCH2OHCH3鲸醇鲸醇（3 3）异构化）异构化v 存在多种立体异构化合存在多种立体异构化合物（物（1616）12v 共轭多烯醇侧链，共轭多烯醇侧链，最最大吸收波长在大吸收波长在325328nm）3、具有、具有紫外紫外吸收吸收维生素维生素A 325.5 100% 全反式全反式新维生素新维生素Aa 328 75%-顺顺新维生素新维生素Ab 320.5 24% -顺顺新维生素新维生素Ac 310.5 15% , 4-二顺二顺异维生素异维生素Aa 323 21% -顺顺异维生素异维

6、生素Ab 324 24% ,6-二顺二顺max 相对生物效价相对生物效价13二、鉴别试验二、鉴别试验CHCl31、与三氯化锑发生呈色反应与三氯化锑发生呈色反应紫红紫红蓝色蓝色3SbClVitA维生素维生素A或其制剂的氯仿溶液加三氯化锑或其制剂的氯仿溶液加三氯化锑TI，产生不稳定的蓝色。无水下进行，产生不稳定的蓝色。无水下进行14-RCOOSbCl5+CH2蓝色蓝色紫红紫红+CH2-RCOOSbCl515VitAVitAHCl去水去水无水乙醇无水乙醇max为为326nm一个吸收峰一个吸收峰UV法法2、max为为350390nm三个吸收峰三个吸收峰CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3CH2Vi

7、tA去水去水VitA（VitA3）163、薄层色谱法、薄层色谱法n因因VA有多种的异构体、混合物等，用有多种的异构体、混合物等，用TLC可以同时分离分析多种成分。可以同时分离分析多种成分。n采用对照采用对照品对照法。品对照法。 显显色剂色剂 磷钼酸磷钼酸 规定斑点颜规定斑点颜色（绿色）色（绿色） 和和Rf值值维生素A醇及其乙酸酯、棕榈酸酯的Rf值分别为0.1、0.45及0.717UV法法（一）（一）含量测定含量测定三、三、三点校正法三点校正法测定测定VA的酯类含量。的酯类含量。同时含如下同时含如下杂质杂质：立体异构体立体异构体氧化产物及光照产物氧化产物及光照产物合成中间体合成中间体去氢维生素去

8、氢维生素A（ VitA2）去水维生素去水维生素A（ VitA3）消除不相关杂质的干扰消除不相关杂质的干扰18三点校正法三点校正法1. 条件：条件：（1）杂质的吸收在）杂质的吸收在310340nm波长波长范围内呈一条直线，且随波长的范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。）物质对光的吸收具有加和性。192. 波长的选择：波长的选择：（1） 1 VitA的的 max（328nm）（2） 2 3 分别在分别在 1的两侧各选一点的两侧各选一点20测定对象测定对象 VitA醋酸酯醋酸酯328340316328 第一法第一法 等波长差法等波长差法 340

9、3163283282523AAA.A 校正校正21第二法第二法 等吸收度法等吸收度法(皂化法皂化法)测定对象测定对象 VitA醇醇32176 AAA 334310325325260455528156A.A.A.A 校正校正22 方法：方法：第一法第一法酯式维生素酯式维生素AiAnm360340328316300ml/IU159S处测处测、分别于分别于溶液溶液环己烷环己烷23 判断判断 是否在是否在326329nm之间之间max max 在在326329nm之间之间改用第二改用第二法法“其其他维生素他维生素A”是是否否 求算求算 并与规定值比较并与规定值比较328iA/A24 299.0AA81

10、1.0AA0000.1AA907.0AA555.0AA328360328340328328328316328300 规定值规定值 差值差值328iA/A25 判断差值是否超过规定值的判断差值是否超过规定值的02. 0 有一个以上有一个以上超过超过02. 0 无超过无超过02. 0 计算计算 A328（校正）（校正） 用用A328计算计算26%100AAAf328328)(328 校正校正 3403163283282523AAA.A 校正校正2728 VitAD胶丸中胶丸中VitA的含量测定的含量测定 精密称取本品精密称取本品(规格规格10000VitAIU/丸丸)装量差异项下（平均装量装量差异

11、项下（平均装量0.08262g/丸）的丸）的内容物内容物 0.2399g 至至250ml量瓶中，用环己量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置，置另一另一20 ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为长为328nm，并在下列波长处测得吸收度，并在下列波长处测得吸收度为为29A300 ：0.354A316 ：0.561A328 ：0.628A340 ：0.523A360 ：0.216A300 /A328 ：0.555A316/A328 ：0.907A328/

12、A328 ：1.000A340/A328 ：0.811A360/A328 ：0.299 求本品中维生素求本品中维生素A的含量？的含量？30A300 /A328 ：0.564A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.833A360/A328 ：0.344 0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 + 0.010.01 0 + 0.02 + 0.04 605052305610628025232523340316328328.AAA.A 校正校正=31 %0 .99%1001000008262. 010020125022399. 01

13、900605. 0%100)ml100/g(C1900A%328 标示量标示量平均丸重平均丸重标示量标示量校正校正32适用于维生素适用于维生素A醇醇（等吸收度法）（等吸收度法） 第一法无法消除杂质干扰时用此法第一法无法消除杂质干扰时用此法 皂化法、皂化法、6/7A法法 （3）其他维生素）其他维生素A测定法测定法33i/KOHAnm334325310300ml/IU159VitAVitAS处测处测、于于稀释至稀释至溶解溶解异丙醇异丙醇除去植物油的干扰除去植物油的干扰甘油和脂肪酸盐甘油和脂肪酸盐植物油植物油醇醇醋酸酯醋酸酯皂化液皂化液挥干乙醚挥干乙醚乙醚提取乙醚提取乙醇乙醇 水溶性水溶性脂溶性脂溶

14、性34 判断判断 max是否在是否在323327nm之间之间取未皂化样品取未皂化样品采用色谱法纯采用色谱法纯化后再测定化后再测定 计算计算325300AA是是否否35 判断判断 A300 /A325 是否大于是否大于0.73是是否否取未皂化样品取未皂化样品采用色谱法纯采用色谱法纯化后再测定化后再测定 计算计算A325(校正校正)36%100AAAf325325)(325 校正校正 334310325325260455528156A.A.A.A 校正校正3703%3% 校正校正325A325A 校正校正325A382、高效液相色谱法、高效液相色谱法 正相色谱，硅胶为固定相，正己烷正相色谱，硅胶为

15、固定相，正己烷-异丙醇为异丙醇为流动相测定。流动相测定。3、三氯化锑比色法、三氯化锑比色法 蓝色蓝色 3SbClVitAmax 618nm620nm39第二节第二节 维生素维生素B1NSCH3CH2CH2OHNNH3CNH2CH2+氨基嘧啶环氨基嘧啶环CH2噻唑环噻唑环(季铵碱季铵碱)HClCl-存在于米糠、麦麸、酵母中，治疗脚气病、多发性神经炎和胃肠道疾病40（1） 溶解性溶解性1、易溶于水、易溶于水2、水溶液呈酸性、水溶液呈酸性结构结构与理化性与理化性质质一、一、（2） 噻唑环反应噻唑环反应开环开环-环合环合-显显色色 硫色素硫色素41（3） UV芳杂环，共芳杂环，共轭双键轭双键max =

16、 246nm（4）含氮杂环反应含氮杂环反应生物碱沉淀反应生物碱沉淀反应（5）氯化物的反应氯化物的反应42荧光消失荧光消失蓝色荧光蓝色荧光硫色素硫色素正丁醇正丁醇）（环合环合 HCNFeKOHNaOHVitB6321O OH鉴别试验鉴别试验二、二、1硫色素反应硫色素反应43噻唑环在碱性介质中开环，再与嘧啶环上氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素44正丁醇或异丁醇中显蓝色荧光正丁醇或异丁醇中显蓝色荧光45 4242HgIHBHgIK 淡黄淡黄H+ 2KIIIHIB2 红色红色H+白白色色硅硅钨钨酸酸 H+ OH4WO12OHSiOB23222 白色扇形白色扇形苦酮酸苦酮酸 H+2、沉

17、淀反应沉淀反应VitB1生物碱沉淀反应生物碱沉淀反应463、氯化物反应、氯化物反应4、硝酸铅反应、硝酸铅反应 与与NaOH共热，分解生成共热，分解生成Na2S，可与硝酸铅生成黑色沉淀。，可与硝酸铅生成黑色沉淀。47三、三、 含量测定含量测定 HClOClOBHClOHClClBAcHg）（喹那啶红亚甲蓝喹那啶红亚甲蓝 （紫红（紫红天蓝）天蓝）（一）（一）非水溶液滴定法非水溶液滴定法维生素B1含两个碱性的已成盐胡伯胺和季铵基团，均可与高氯酸反应48 ml/mg.nMcT861622733710 %WFTVV% 空空样样含量含量49UV法法（二）（二）片剂和注射剂采用UV法246nm50片剂、注射

18、剂片剂、注射剂= 421%cmE11（每片）相当于标示量的（每片）相当于标示量的%=%WEA%cm100110011 标示量标示量平均片重平均片重稀释度稀释度A = ECL规格规格g/片片g/100ml稀释度稀释度稀释倍数稀释倍数1 gChP51荧光荧光硫色素硫色素异丁醇异丁醇铁氰化钾铁氰化钾 VitBNaOH（ 三）三）硫色素荧光法硫色素荧光法1、52激发波长激发波长365nm发射波长发射波长435nm2、53+ NaOH + 铁氰化钾铁氰化钾 + 异丁醇异丁醇+ NaOH + 异丁醇异丁醇+ NaOH + 铁氰化钾铁氰化钾 + 异丁醇异丁醇+ NaOH + 异丁醇异丁醇SdAb%WWdSb

19、A%VitB1001 稀释度稀释度稀释度稀释度样样对对对照液对照液供试液供试液543、（1）灵敏度高，线性范围宽）灵敏度高，线性范围宽（2）操作繁琐，荧光受干扰因素多）操作繁琐，荧光受干扰因素多（3）代）代谢产物不干扰，适用于谢产物不干扰，适用于 体液分析体液分析55654321OOHHOO C OHHCH2OHL抗坏血酸抗坏血酸第三节第三节 维生素维生素C（Vitamin C）56易易溶于水溶于水结构结构与理化性质与理化性质一、一、（1） 溶解性溶解性654321OOHHOO C OHHCH2OH57OOHHOO C OHHCH2OH123456C3OH的的pKa = 4.17C2OH的的p

20、Ka = 11.57酸性酸性（2）一元酸一元酸58O二烯醇结构二烯醇结构二酮基结构二酮基结构二烯醇结构二烯醇结构（3）、）、 还还原性原性OHOHCCOOCC5960OOHHOO C OHHCH2OH123456L(+)抗坏血酸抗坏血酸活性最强活性最强手性手性C（C4、C5）（4） 旋光性旋光性*61与碱反应与碱反应单钠盐单钠盐32CONa酮酸盐酮酸盐水解水解 NaOH（5）、）、 水水解性解性62OHOO C OHHCH2OHHOOHOO C OHHCH2OHNaOCOONaOCOCCHOHHOCHCH2OHNa2CO3NaOH63显色显色糠醛衍生物糠醛衍生物糠醛糠醛酚类酚类脱水脱水 H糖类

21、的显色反应糖类的显色反应蓝色蓝色糠醛糠醛吡咯吡咯脱水脱水 HVitC50结构与糖类相似结构与糖类相似（6）糖类性糖类性质质64nmnmmaxOHmaxH （7）UV特征特征OHOO C OHHCH2OHHO65去氢抗坏血酸去氢抗坏血酸OVitC利用还原性利用还原性1、鉴别试验鉴别试验二、二、CH2OHOOOO C OHH O6667NClHOClONClHOClOHH（玫瑰色）玫瑰色）（无色）（无色）682、利用糖的性质、利用糖的性质蓝色蓝色糠醛糠醛戊糖戊糖脱水脱水三氯醋酸三氯醋酸 VitC或盐酸或盐酸50吡咯吡咯69OO C OHHCH2OHHOOHCH2OHOO C OHHHHOOCCOH

22、O OCHOH3CH2OHH2O7071UV 30.01mol/L HClnmmax243 58554511E%cm 72三、杂质检查（三、杂质检查（Purity）1、溶液澄清度与颜色检查、溶液澄清度与颜色检查2、铜、铁离子的检查、铜、铁离子的检查73 IIVitCH去氢抗坏血酸去氢抗坏血酸2指示剂指示剂 淀粉指示液淀粉指示液原理原理（1）、）、碘量法碘量法1含量测定含量测定四、四、74OO C OHHOOCH2OHHI2+OHOO C OHHCH2OHHOH+ I75 取本品约取本品约0.2g，精密称定，加新，精密称定，加新沸过的冷水沸过的冷水100ml与稀醋酸与稀醋酸10ml使溶使溶解，加

23、淀粉指示液解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴，立即用碘滴定液（定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝）滴定，至溶液显蓝色，在色，在30秒内不褪。每秒内不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/L)相当于相当于8.806mg的的C6H8O6方法方法（2）、）、76）（ml/mg.nMCT806821317610 77（1）酸性环境）酸性环境（2）新沸冷新沸冷H2O减慢减慢VitC被被O2氧化速度氧化速度讨论讨论（3）立即滴定）立即滴定 赶走水中赶走水中O2减少减少O2的干扰的干扰782，6 - 二氯靛酚钠滴定法法二氯靛酚钠滴定法法（二）（二）酚亚胺酚亚胺二氯靛酚二氯靛酚， VitCUSPJ

24、P原理原理1、79空空样样二氯靛酚液二氯靛酚液空白空白样品样品VVHAcHPO 3自身指示终点法自身指示终点法蓝色蓝色玫瑰红玫瑰红 OHH无无色色还还原原 方法方法2、80（2）快速滴定）快速滴定 2min内内 （1）酸性环境）酸性环境 HPO3-HAc 稳定稳定VitC防止其他还原性物质干扰防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定）剩余比色测定 AVitC测测二氯靛酚二氯靛酚 （定量过量）（定量过量）（测剩余染料）（测剩余染料）讨论讨论3、81（4）缺点）缺点 需经常标定需经常标定贮存贮存一周一周不稳定不稳定干扰多干扰多 氧化力较强氧化力较强82n是一类抗佝偻病维生素的总称是一类抗佝偻病维生

25、素的总称n目前已知的维生素目前已知的维生素D D类物质至少有十类物质至少有十种之多，它们都是甾醇的衍生物。种之多，它们都是甾醇的衍生物。 第四节第四节 维生素维生素D83HOHCH2CH3HCH3HHCH3CH3HCH3l维生素D2（C28H44O，396.66） 结构与理化性质一、84HOHCH2CH3HCH3HHCH3CH3123456789101112131415161718192021222325262724维生素D3（C27H44O，384.65） 85n1 1性状性状 均为无色针状结晶或白色结晶性粉末；无均为无色针状结晶或白色结晶性粉末；无臭，无味；遇光或空气均易变质。臭，无味；遇

26、光或空气均易变质。n2 2溶解性溶解性 维生素维生素D2D2在氯仿中极易溶解，在乙醇、在氯仿中极易溶解，在乙醇、丙酮或乙醚中易溶；丙酮或乙醚中易溶； 维生素维生素D3D3在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中极易溶解；二者均在植物油中略溶，在水极易溶解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。中不溶。86n3 3不稳定性不稳定性 维生素维生素D2D2、D3D3因含有多个烯键，所以极不因含有多个烯键，所以极不稳定，遇稳定，遇光光或或空气及其他氧化剂空气及其他氧化剂均发生氧均发生氧化而变质，使效价降低，毒性增强。本品化而变质，使效价降低，毒性增强。本品对对酸酸也不稳定。也不稳定。n4 4旋

27、光性旋光性 维生素维生素D D2 2具有具有 6 6个手性碳原子，个手性碳原子， 维生素维生素D D3 3有有5 5个手性碳原子个手性碳原子87n5 5显色反应显色反应 本品的氯仿溶液，加醋酐与硫酸，初显本品的氯仿溶液，加醋酐与硫酸，初显黄黄色，色，渐变渐变红红色，迅即变为色，迅即变为紫紫色，最后变为色，最后变为绿绿色。本色。本反应为甾类化合物的共有反应。反应为甾类化合物的共有反应。n6 6紫外吸收特性紫外吸收特性 在在265nm265nm的波长的波长 维生素维生素D D2 2的吸收系数为的吸收系数为460-490460-490； 维生素维生素D D3 3的吸收系数为的吸收系数为465-495

28、465-495。88二二、1 1与与醋酐醋酐-浓硫酸反应浓硫酸反应 维生素维生素D2或或D3，加氯仿溶解后，加醋酐与硫酸，加氯仿溶解后，加醋酐与硫酸 维生素维生素D2初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后成绿色。最后成绿色。 维生素维生素D3初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、蓝绿色，最后变为绿色。蓝绿色，最后变为绿色。鉴 别 试 验(一) 显色反应892 2与三氯化锑反应与三氯化锑反应n溶液显橙红色，逐渐变为粉红色。溶液显橙红色，逐渐变为粉红色。3 3其它显色反应其它显色反应n维生素维生素D + D + 三氯化铁三氯化铁 橙黄

29、色橙黄色n维生素维生素D + D + 二氯丙醇和乙酰氯试剂二氯丙醇和乙酰氯试剂 绿色，绿色，均可用于鉴别，但专属性不强。均可用于鉴别，但专属性不强。90n维生维生素素D2，在无水乙醇中。比旋度为，在无水乙醇中。比旋度为102.5107.5；n维生素维生素D3，比旋度为比旋度为105112 2、比旋度鉴别比旋度鉴别91n可用薄层色谱法、可用薄层色谱法、HPLC法和制备衍生物测法和制备衍生物测熔点进行鉴别。熔点进行鉴别。n此外，亦可通过其红外、紫外吸收光谱的此外，亦可通过其红外、紫外吸收光谱的特征加以鉴别。特征加以鉴别。3、其它鉴别方法其它鉴别方法92n取维生素取维生素D10mg，溶于，溶于96乙

30、醇乙醇10ml中。取中。取此液此液0.1ml，加乙醇，加乙醇1ml和和85硫酸硫酸5ml。维生维生素素D2显红色，显红色，在在570nm波长处波长处有最大吸收；有最大吸收；维生素维生素D3显黄色，在显黄色，在495nm波长波长处有最大吸处有最大吸收。此反应用于收。此反应用于D2和和D3的含量测定。的含量测定。（四）（四） 维生素维生素D2、D3的的区别反应区别反应93三三nChP（2010年版）规定维生素年版）规定维生素D2检查麦角甾检查麦角甾醇，而维生素醇，而维生素D3则不作要求。则不作要求。杂杂 质质 检检 查查1、 麦角甾醇的检查2、 前维生素D的光照产物nD族维生素都是甾醇的衍生物，只

31、是侧链有族维生素都是甾醇的衍生物，只是侧链有所不同。所不同。9495四四可采用可采用HPLCHPLC法法无无维生素维生素A醇及其他杂质干扰的供试品可用醇及其他杂质干扰的供试品可用第一第一法法测定，否则应按测定，否则应按第二法第二法处理后测定；处理后测定；n如果按第二法处理后，前维生素如果按第二法处理后，前维生素D峰仍受杂质峰仍受杂质干扰，仅有维生素干扰，仅有维生素D峰可以分离时，则应按峰可以分离时，则应按第第三法三法测定。测定。n具体具体过程自学。过程自学。含含 量量 测测 定定96苯并二氢吡喃醇苯并二氢吡喃醇OHO第五节第五节 维生素维生素E97生物效价生物效价 右旋体右旋体 ：消旋体：消旋

32、体 = 1.4 ：10（天然品）（合成品）CH3COOCH3CH3CH3CH3CH3CH3H3CH3COdl生育酚醋酸酯*98OR1HOR2CH3名名 称称R1R2相对活性相对活性-生育酚生育酚-生育酚生育酚 -生育酚生育酚 -生育酚生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1*99结构结构与与理化理化性质性质一、一、苯环苯环 + 二氢吡喃环二氢吡喃环 + 饱和烃链饱和烃链1、易溶于有机溶剂，不溶于水、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV3、酯键、酯键 易水解易水解 OorOHHVitE醌型化合物醌型化合物生育酚生育酚100OHNO3VitE生育红生育红生育酚生育酚75151、硝

33、酸反应硝酸反应橙红色橙红色鉴别试验鉴别试验二、二、101OOCH3C16H33H3CCH3O（橙红色）（橙红色）生育红生育红CH3HOOCH3C16H33CH3H3C生育酚生育酚HNO3强氧化剂强氧化剂102三三氯化铁反应氯化铁反应红色红色生育醌生育醌对对生育酚生育酚联吡啶联吡啶 2FeKOHFeVitE3O2、103OOH3CCH3OHCH3C16H33CH3CH3HOOCH3C16H33CH3H3C生育酚生育酚对对-生育醌生育醌+3FeO弱氧化弱氧化剂剂104红色红色+23Fe3+2FeNNNN105 = 41.045.5%cmE11max = 284nmmin = 254nm0.01%无

34、水乙醇中无水乙醇中UV法法3、106107薄层板薄层板 硅胶硅胶G展开剂展开剂 环己烷环己烷 -乙醚（乙醚（4 ：1）显色剂显色剂 硫酸（硫酸（105 5） VitE Rf = 0.7TLC法法4、108游离生育酚游离生育酚 硫酸铈滴定液（硫酸铈滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黄二苯胺（亮黄灰紫）灰紫）生育醌生育醌对对生育酚生育酚 3422CeCe 利用游离生育酚的还原性，利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈将硫酸铈还原成硫酸亚铈 杂质检查杂质检查 三、三、原理原理（一）（一）试剂试剂（二）（二）109四、四、 含量测定含量测定GC法法1、选择性好选择性好灵敏度高灵敏度高速度快

35、速度快分离效能好分离效能好挥发性低、不挥发性低、不稳定、极性强稳定、极性强衍生化易受衍生化易受样品蒸气压限样品蒸气压限制制RP - HPLC法法2、110思考题思考题n平时吃混合维生素好，还是单一维生素好？平时吃混合维生素好，还是单一维生素好？n挑食或偏食的人容易缺少哪种维生素？挑食或偏食的人容易缺少哪种维生素？n城里和农村比较，哪种维生素的摄取有区别？城里和农村比较，哪种维生素的摄取有区别？111重点重点n结构、性质与分析方法间的关系。结构、性质与分析方法间的关系。n维生素维生素A的三点校正法的三点校正法n维生素维生素B的硫色素反应（特征）的硫色素反应（特征）n维生素维生素C结构、性质、分析方法结构、性质、分析方法n维生素维生素D2和和D3的区别的区别n维生素维生素E有关生育酚的部分有关生育酚的部分112 Thank You for Your Attention! 2016-5-14