3 微生物的选择培养和计数 课后作业-（新教材）2019新人教版高中生物选择性必修三.doc

1、1/8课时分层作业课时分层作业(三三)(建议用时：建议用时：40 分钟分钟)题组一题组一微生物的选择培养微生物的选择培养1下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()AKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水BKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水、葡萄糖、琼脂、蒸馏水CKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、琼脂、蒸馏水、尿素、琼脂、蒸馏水DKH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水A

2、在在 A 项的培养基中既有尿素作为唯一氮源，又有其他各种成分，可以项的培养基中既有尿素作为唯一氮源，又有其他各种成分，可以选择出分解尿素的细菌，而选择出分解尿素的细菌，而 B 项中无尿素作氮源，项中无尿素作氮源，C 项中缺少碳源，项中缺少碳源，D 项中有项中有牛肉膏可提供氮源。牛肉膏可提供氮源。2选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物，通过不含通过不含有机物的培养基有机物的培养基、缺氮培养基缺氮培养基、含尿素含尿素(不含其他氮源不含其他氮源)的培养基的培养基，可从土壤中分可从土壤中分离出的微生物依次是离出的微生物依次是()A硝化

3、细菌、放线菌、根瘤菌硝化细菌、放线菌、根瘤菌B根瘤菌、青霉菌、固氮菌根瘤菌、青霉菌、固氮菌C异养型细菌、放线菌、硝化细菌异养型细菌、放线菌、硝化细菌D自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌D选择培养基是根据不同微生物的代谢特点，通过改变培养基的成分，选择培养基是根据不同微生物的代谢特点，通过改变培养基的成分，以达到选择某种微生物的目的的以达到选择某种微生物的目的的。不含有机物的培养基可以选择自养型微生物不含有机物的培养基可以选择自养型微生物，缺少氮元素的培养基可以培养固氮微生物缺少氮元素的培养基可以培养固氮微生物，含尿素含尿素(不含其他氮源不含其他氮源)的培养基可

4、以的培养基可以选择能分解尿素的微生物。选择能分解尿素的微生物。3 下列关于分离尿素分解菌和纤维素分解菌实验的叙述下列关于分离尿素分解菌和纤维素分解菌实验的叙述， 错误的是错误的是()A前者需要以尿素为唯一的氮源前者需要以尿素为唯一的氮源B尿素分解菌能产生脲酶，纤维素分解菌能产生纤维素酶尿素分解菌能产生脲酶，纤维素分解菌能产生纤维素酶C两个过程中都需要梯度稀释两个过程中都需要梯度稀释D刚果红染色法也可以用于鉴定尿素分解菌刚果红染色法也可以用于鉴定尿素分解菌D两种细菌的分离都用到选择培养基，分离尿素分解菌的培养基以尿素两种细菌的分离都用到选择培养基，分离尿素分解菌的培养基以尿素2/8为唯一氮源，分

5、离纤维素分解菌的培养基以纤维素为主要碳源；两种细菌能分为唯一氮源，分离纤维素分解菌的培养基以纤维素为主要碳源；两种细菌能分别产生脲酶和纤维素酶；由于在样品中细菌的浓度较大，所以都要进行梯度稀别产生脲酶和纤维素酶；由于在样品中细菌的浓度较大，所以都要进行梯度稀释；刚果红染色法仅用于纤维素分解菌的鉴定。释；刚果红染色法仅用于纤维素分解菌的鉴定。4下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是()A筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养B可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌可从富含腐殖质

6、的林下土壤中筛选产纤维素酶菌C在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力D用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值A应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌，应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌，A 错误；木错误；木材材、秸秆中富含纤维素秸秆中富含纤维素，故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，B 正确正确； 用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌后用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌后，

7、为了确定得到的为了确定得到的是纤维素分解菌是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验还需要进行发酵产纤维素酶的实验，C 正确正确；用产纤维素酶菌用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆发酵处理农作物秸秆，可以把纤维素分解成葡萄糖可以把纤维素分解成葡萄糖，提高饲用价值提高饲用价值，D 正确正确。故故选选 A。5漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，下列相关叙述错误的是下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，下列相关叙述错误的是()A生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样

8、品生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品B筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化D在适宜温度下在适宜温度下，接种后的斜面培养基上菌落长成后接种后的斜面培养基上菌落长成后，可在低温下临时保可在低温下临时保存菌株存菌株A生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，A 错误；错误；筛选培养基中需要加入漆酶的底物，只有产漆酶的微生物才能在该培养基上生筛选培养基

9、中需要加入漆酶的底物，只有产漆酶的微生物才能在该培养基上生长长，进而通过菌落特征挑出产漆酶的菌落进而通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，B 正确正确；由图可知由图可知，在涂布平板上长在涂布平板上长出的菌落出的菌落，再通过划线进一步纯化再通过划线进一步纯化，C 正确正确；在适宜温度下在适宜温度下，接种后的斜面培养接种后的斜面培养基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株，基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株，D 正确。正确。3/86尿素是一种重要的农业肥料尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解但若不经细菌的分解，就不能更好地被植就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图

10、探究土壤中微生物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌细菌(目的菌目的菌)。 培养基成分如下表所示培养基成分如下表所示， 实验步骤如下图所示实验步骤如下图所示。 请分析回答问题请分析回答问题。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖葡萄糖尿素尿素琼脂琼脂1.4 g2.1 g0.2 g10 g1 g15 g将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL。(1)按物理性质分，此培养基属于

11、按物理性质分，此培养基属于_。(2)培养基中加入尿素的目的是培养基中加入尿素的目的是_，这种培养基属于，这种培养基属于_培培养基。养基。(3)“目的菌目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_和和_，实验需要振荡培养，原因是，实验需要振荡培养，原因是_。(4)在进行分离分解尿素的细菌实验时，在进行分离分解尿素的细菌实验时，A 同学从培养基上筛选出大约同学从培养基上筛选出大约 150个菌落，而其他同学只选择出大约个菌落，而其他同学只选择出大约 50 个菌落。个菌落。A 同学的实验结果产生的原因可同学的实验结果产生的原因可能有能有_(填序号填序号)。土样

12、不同土样不同培养基污染培养基污染操作失误操作失误没有设置对照没有设置对照(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行实验结束后，使用过的培养基应该进行_处理后，才能倒掉。处理后，才能倒掉。解析解析(1)由于该培养基中含有凝固剂由于该培养基中含有凝固剂琼脂琼脂， 所以该培养基为固体培养所以该培养基为固体培养4/8基。基。(2)由于尿素是该培养基的唯一氮源，只有能分解尿素的微生物在该培养基由于尿素是该培养基的唯一氮源，只有能分解尿素的微生物在该培养基上才能在该培养基上生存，因此该培养基具有选择作用。上才能在该培养基上生存，因此该培养基具有选择作用。(3)尿素为该细菌提供尿素为该细菌提供氮源，葡萄糖为该

13、细菌提供碳源。振荡培养基可溶入氧气，为培养的目的菌提氮源，葡萄糖为该细菌提供碳源。振荡培养基可溶入氧气，为培养的目的菌提供必需的氧气。供必需的氧气。(4)培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。(5)为了避为了避免微生物污染，需要将使用过的培养基灭菌后再倒掉。免微生物污染，需要将使用过的培养基灭菌后再倒掉。答案答案(1)固体培养基固体培养基(2)筛选目的菌筛选目的菌选择选择(3)尿素尿素葡萄糖葡萄糖目的菌的生长需要氧气目的菌的生长需要氧气(4)(5)灭菌灭菌题组二题组二微生物数量的测定微生物数量的测定7 某同学在稀释倍数为某同学在稀释倍数为 11

14、06的培养基上测得平板上的菌落数的平均值的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为为234， 那么每毫升样品中菌落数是那么每毫升样品中菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积涂布平板时所用稀释液的体积为为0.1 mL)()A2.34108个个B2.34109个个C234 个个D23.4 个个B平板上菌落的平均数平板上菌落的平均数稀释倍数稀释倍数体积每毫升样品中的菌落数，体积每毫升样品中的菌落数，即即234101062.34109(个个)。8某同学对某同学对 1101、1102、1103倍稀释液计数的平均菌落数分别是倍稀释液计数的平均菌落数分别是 2760、295 和和 16，则菌落总数为，则菌落总数为

15、(所用稀释液体积为所用稀释液体积为 0.1 mL)()A2.76104个个/mLB2.95105个个/mLC4.6104个个/mLD3.775104个个/mLB为保证结果准确，一般选择菌落数在为保证结果准确，一般选择菌落数在 30300 的平板进行计数，因此的平板进行计数，因此只有只有 295 符合要求。其稀符合要求。其稀释释倍数为倍数为 1102，所用稀释液体积为，所用稀释液体积为 0.1 mL，从而从而得得菌落总数为菌落总数为 2.95105个个/mL。9下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验，请回答下列请回答下列问题。问题。实

16、验原理：农田的表层土壤中自生固氮菌的数量比较多。将用表层土壤制实验原理：农田的表层土壤中自生固氮菌的数量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离。才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离。5/8材料用具：农田的表层土壤、配制无氮培养基和牛肉膏蛋白胨培养基的材材料用具：农田的表层土壤、配制无氮培养基和牛肉膏蛋白胨培养基的材料料、 盛有盛有 9 mL 无菌水的试管无菌水的试管、 无菌吸管无菌吸管、 无菌涂布器无

17、菌涂布器、 无菌培养皿无菌培养皿、 盛有盛有 90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱等。无菌水的锥形瓶、恒温箱等。(1)方法步骤方法步骤培养基的制备：分别配制无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板应培养基的制备：分别配制无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板应在在_操作。操作。制备土壤稀释液：取土样制备土壤稀释液：取土样 10 g 加入盛有加入盛有 90 mL 无菌水的锥形瓶中，充分无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液摇匀。用无菌吸管吸取上清液 1 mL，转至盛有，转至盛有 9 mL 无菌水的试管中，依次稀无菌水的试管中，依次稀释到释到 1107稀释度。稀释度。涂布平板操作涂布平板操作：

18、按照由按照由 11071103稀释度的顺序分别吸取稀释度的顺序分别吸取 0.1 mL 进进行涂布平板操作，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布行涂布平板操作，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布_个平板，牛个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布肉膏蛋白胨培养基涂布_个。个。培养：放入恒温箱内，在培养：放入恒温箱内，在 2830 下培养下培养 34 d。计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在_的平板进行计数。如的平板进行计数。如果在稀释倍数为果在稀释倍数为 1105的平板上测定的平均值为的平板上测定的平均值为 50，则每克样品中的菌体数是，则每克样品中的菌体数是_。(2)预

19、期结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数预期结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数_(填填“多于多于”或或“少于少于”)无氮培养基上的数目。原因是无氮培养基上的数目。原因是_。解析解析(1)在酒精灯火焰旁倒平板在酒精灯火焰旁倒平板，可以减少杂菌的污染可以减少杂菌的污染。为了保证结果准为了保证结果准确，一般每个稀释度下设置确，一般每个稀释度下设置 3 个或个或 3 个以上平板，选择菌落数在个以上平板，选择菌落数在 30300 的平的平板进行计数板进行计数，并取平均值并取平均值，则每克样品中的菌体数为则每克样品中的菌体数为(500.1)1055107。(2)可用牛肉膏蛋白胨培养

20、基作为对照组来说明无氮培养基的选择作用，牛肉膏蛋可用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组来说明无氮培养基的选择作用，牛肉膏蛋白胨培养基适合其他细菌生存，所以它比无氮培养基上的菌落数目多。白胨培养基适合其他细菌生存，所以它比无氮培养基上的菌落数目多。答案答案(1)酒精灯火焰附近酒精灯火焰附近31303005107(2)多于多于无无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生长繁殖，而牛肉膏蛋白胨培养基上几氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生长繁殖，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有微生物生长乎允许土壤中所有微生物生长10下列有关稀释涂布平板法操作的叙述，不正确的是下列有关稀释涂布平板法操作的叙述，不正确的

21、是()A若稀释梯度以若稀释梯度以 10 倍为单位，当用移液管取倍为单位，当用移液管取 1 mL 原始菌液进行稀释时原始菌液进行稀释时，6/8其余试管内的无菌水应为其余试管内的无菌水应为 9 mLB每次用灭菌后的移液管取菌液前，要先将菌液混匀每次用灭菌后的移液管取菌液前，要先将菌液混匀C在涂布过程中在涂布过程中，每次变换涂布的方向和位置时每次变换涂布的方向和位置时，应对涂布器进行灼烧灭应对涂布器进行灼烧灭菌菌D将菌液涂布在培养基表面时，为涂布均匀，应及时转动培养皿将菌液涂布在培养基表面时，为涂布均匀，应及时转动培养皿C稀释梯度以稀释梯度以 10 倍为单位时，如果溶液总量为倍为单位时，如果溶液总量

22、为 10 mL，需用移液管将，需用移液管将 1mL 原始菌液移入盛原始菌液移入盛有有 9 mL 无菌水的试管中无菌水的试管中，依次类推即可得到所需稀释倍数依次类推即可得到所需稀释倍数的菌液，的菌液，A 正确。每次用灭菌后的移液管取菌液前，要先将菌液混匀，正确。每次用灭菌后的移液管取菌液前，要先将菌液混匀，B 正确正确。在涂布前在涂布前，应将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧应将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧，待酒精燃尽后冷却待酒精燃尽后冷却 810s，用涂布器将菌液均匀涂布在培养基的表面，涂布结束后，应对涂布器进行灼，用涂布器将菌液均匀涂布在培养基的表面，涂布结束后，应对涂布器进行灼烧灭菌烧灭

23、菌，以防污染环境和感染操作者以防污染环境和感染操作者，C 错误错误。涂布时涂布时，可转动培养皿可转动培养皿，使菌液使菌液分布均匀，分布均匀，D 正确。正确。11(不定项不定项)生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒入平板，然后在平板上划分数区，将含有其他必需营养物质的培养基混合后倒入平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养

24、结果如图所示。下列说法甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法正确的是正确的是()A倒入平板后直接培养可判断培养基有无污染倒入平板后直接培养可判断培养基有无污染B倒入平板后培养基需要进行灭菌处理倒入平板后培养基需要进行灭菌处理C图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙D生长图形法还可用于某些菌种的筛选生长图形法还可用于某些菌种的筛选AD平板上不含任何生长因子平板上不含任何生长因子，若倒入平板后直接培养若倒入平板后直接培养，出现菌落说明培出现菌落说明培养基已被杂菌感染养基已被杂菌感染， 因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长因为该嗜热

25、菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长， A 正确正确；制备培养基时制备培养基时，先灭菌再倒平板先灭菌再倒平板，B 错误错误；图中菌落生活在乙图中菌落生活在乙、丙区域之间丙区域之间，说说明同时需要乙和丙明同时需要乙和丙，C 错误错误；不同菌种所需生长因子不同不同菌种所需生长因子不同，可利用生长图形法筛可利用生长图形法筛选菌种，选菌种，D 正确。正确。7/812筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉细菌能分解淀粉， 培养平板经稀碘液处理培养平板经稀碘液处理， 会出现以菌落为中心的透明圈会出现以菌落为中心的

26、透明圈(如图如图)，实验结果见下表实验结果见下表:菌种菌种菌落直径：菌落直径：C(mm)透明圈直径：透明圈直径：H(mm)H/C细菌细菌5.111.22.2细菌细菌8.113.01.6有关本实验的叙述，错误的是有关本实验的叙述，错误的是()A培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布C以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外DH/C 值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异C培养基一般含有碳源、氮源、水和无机盐等成分，培

27、养基一般含有碳源、氮源、水和无机盐等成分，A 正确；筛选淀粉正确；筛选淀粉分解菌时，需要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂分解菌时，需要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养布到固体培养基上进行培养，B 正确正确；由题意可知由题意可知，两种菌均会产生透明圈两种菌均会产生透明圈，说说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉，C 错误错误；H/C 值越大值越大，说说明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，D 正确。正确。13已知一种有机物已知一种有机物 X(仅

28、含有仅含有 C、H 两种元素两种元素)不易降解不易降解， 会造成环境污染会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解 X 的细菌的细菌(目标菌目标菌)。号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入 X(5 g/L)。号培养基号培养基：氯化钠氯化钠(5 g/L)，硝酸铵硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐其他无机盐(适量适量)，X(15 g/L)。号培养基号培养基：氯化钠氯化钠(5 g/L)，硝酸铵硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐其他无机盐(适量适量)，X(45 g/L)。回答下列问题回答下列问题:(1)在在号培养基中，为微

29、生物提供氮源的是号培养基中，为微生物提供氮源的是_。、号培养基中号培养基中为微生物提供碳源的有机物是为微生物提供碳源的有机物是_。(2)若将土壤悬浮液接种在若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中，培养一段时间后，不能降号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解解8/8X 的细菌比例会的细菌比例会_，其原因是，其原因是_。(3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是_。(4)假设从假设从号培养基中得到了能高效降解号培养基中得到了能

30、高效降解 X 的细菌的细菌，且该菌能将且该菌能将 X 代谢为代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_和和_。解析解析(1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源，而而号、号、号培养基中除号培养基中除 X 外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源的有机物是的有机物是 X。(2)因为因为号培养基中碳源只有号培养基中碳源只有 X，相当于是选择培养基，只有，相当于是选择培养基，只有能降解能降解 X 的细菌才能增殖的细菌才能

31、增殖，而不能降解而不能降解 X 的细菌因缺乏碳源不能增殖的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要对要对菌落进行计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。菌落进行计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸参在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。与细菌的有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。答案答案(1)牛肉膏牛肉膏、 蛋白胨蛋白胨X(2)下降下降不能降解不能降解 X 的细菌因缺乏碳源不的细菌因缺乏碳源不能增殖能增殖，而能降解而能降解 X 的细菌能够增殖的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法稀释涂布平板法(4)能量能量合成其他合

32、成其他物质的原料物质的原料对选择培养基筛选的原理及实验操作不清对选择培养基筛选的原理及实验操作不清14分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是单菌落影响最大的是()A制备浸出液的土壤取自土壤的表层制备浸出液的土壤取自土壤的表层B涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒C制备浸出液的土壤取自土壤的表层制备浸出液的土壤取自土壤的

33、表层对对纯化的尿素分解菌的单菌落影响纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大不大，A 不符合题意不符合题意；涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染，但对但对纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大， B 不符合题意不符合题意； 该培养基必须以尿素为唯该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，该操作一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，该操作对实验影响最大对实验影响最大，C 符合题意符合题意；接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会可能会造成污染，造成污染，但对但对纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大，纯化的尿素分解菌的单菌落影响不大，D 不符合题意。不符合题意。