(新教材)高中生物人教版选择性必修三学案+练习:4 阶段复习课 (含解析).doc
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1、知识整合思维脉图 主题归纳能力培优 主题一 基因工程的操作程序 典题示范 某种质粒上有 Sal、Hind、BamH三种限制酶切割位点,它们的 识别序列和黏性末端各不相同,该质粒同时含有抗四环素基因和抗氨 苄青霉素基因。科学家利用此质粒培育转基因抗盐作物,提高粮食种植 面积取得重大进展。其培育过程如图所示,请回答下列问题。 (1)在构建重组质粒时,应选用_两种酶对质粒和含抗盐基 因的 DNA 进行切割,以保证重组质粒序列的唯一性。 (2)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质 粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上 能出现相同菌落的一种接种培养方法)检
2、测重组质粒是否导入了土壤 农杆菌。 培养基除了含有土壤农杆菌生长繁殖必需的成分和琼脂外,培养基A和 培养基 B 分别还要含有_、_。从检测筛选 的结果分析,含有目的基因的是_(填数字)菌落中的细 菌。 (3)为了确定抗盐作物是否培育成功,要用_等方法在分子 水平进行检测,还要从个体水平用_(方法)鉴定 作物的耐盐性。 (4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整植株需要用组织培养技术, 组织培养技术依据的原理是_。 (5)将抗盐基因导入作物细胞内,使作物具有了抗盐性状,这种变异类 型属于_。 【解析】 (1)质粒和含有目的基因的外源 DNA 分子上都含有 Sal、 Hind 、 BamH三种限制酶
3、切割位点,其中 BamH的切割位点位于目的基因 上,用该酶切割会破坏目的基因;若只用 Sal一种限制酶切割可能会 导致目的基因与运载体反向连接;因此在构建重组质粒时,应选用 Sal和 Hind 两种限制酶对质粒和抗盐基因的 DNA 进行切割,以保证 重组质粒序列的唯一性。 (2)用Sal和Hind 两种限制酶对质粒进行切割时,会破坏四环素抗 性基因,但不会破坏氨苄青霉素抗性基因,因此导入重组质粒的农杆菌 能在含有氨苄青毒素的培养基上能生存,但不能在含有四环素培养基 上生存,所以培养基 A 和培养基 B 分别还含有氨苄青霉素、四环素,含 目的基因的是 4 和 6 菌落中的细菌。 (3)利用PCR
4、可在分子水平上进行检测,除了从分子水平上进行检测,还 可以从个体水平上进行鉴定,即用一定浓度的盐水浇灌作物来鉴定作 物的耐盐性。 (4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培 养技术,组织培养技术依据的原理是细胞的全能性。 (5)将抗盐基因导入作物细胞内,使作物具有了抗盐性状,这属于基因 工程技术,变异类型是基因重组。 答案:(1)Sal、Hind (2)氨苄青霉素 四环素 4 和 6 (3)PCR 一定浓度的盐水浇灌作物(将作物移栽到盐碱地中种植) (4)细胞的 全能性 (5)基因重组 【答题关键】 基因工程的原理和操作程序: 1.基因工程原理:基因重组。 2.操作程序:
5、类题精练 1.(2020烟台高二检测)某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩 增获得目的基因,构建转基因工程菌,下列有关 PCR 扩增过程相关叙述 不正确的是 ( ) A.为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的限制性内切核酸酶 位点 B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对,而造成引物自连 C.PCR 扩增时,复性时温度的设定与引物长度、碱基组成无关 D.如果PCR反应得不到任何扩增产物,则需要降低退火温度或重新设计 引物 【解析】选 C。构建重组质粒,首先要用限制性内切核酸酶切割含目的 基因的DNA片段和质粒,所以位于目的基因两端的引物中需要增加适当 的限制性内切核酸酶位点,
6、A 正确;设计的引物之间不能有碱基互补配 对,否则会导致引物自连,而不能与模板相连,B 正确;PCR 扩增时,复性 时温度的设定与引物长度、碱基组成有关,因为不同长度和碱基组成的 引物中氢键数量不同,C 错误;PCR 反应得不到任何扩增产物,可能是退 火温度过高,导致引物与模板不能相连;或引物间相互配对,引物自连, 不能与模板相连,可通过降低退火温度或重新设计引物进行改进,D 正 确。 2.B 基因存在于水稻基因组中,仅在体细胞和精子中正常表达,在卵细 胞中不转录。为研究 B 基因表达对卵细胞的影响,设计了如下实验来获 取能够在卵细胞中表达 B 基因的转基因植株。下列关于该实验的叙述, 不正确
7、的是 ( ) 注:启动子 指可在水稻卵细胞中启动转录的启动子; Luc 基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光。 A.B 基因在水稻卵细胞中不转录,可能是 B 基因的启动子在卵细胞中无 法启动转录 B.可从水稻体细胞和精子中提取 mRNA 构建 cDNA 文库,从中获得 B 基因 中编码蛋白的序列 C.过程在培养基中应加入卡那霉素以检测 T-DNA 是否整合到水稻细 胞染色体 DNA 上 D.在鉴定和筛选转基因植株时,可以检测加入荧光素的该植株卵细胞 中是否发出荧光 【解析】选 C。启动子是与 RNA 聚合酶结合并能启动 mRNA 合成的序列, 所以 B 基因在水稻卵细胞中不能转录,可能是 B
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