(新教材)高中生物人教版选择性必修三课件:2.2.1 动物细胞培养 .ppt
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1、第2节 动物细胞工程 一 动物细胞培养 必备知识必备知识素养奠基素养奠基 一、动物细胞培养概念一、动物细胞培养概念 从动物体中取出相关的组织从动物体中取出相关的组织, ,将它分散成将它分散成_,_,然后在适宜的培养条件下然后在适宜的培养条件下, , 让这些细胞让这些细胞_的技术。的技术。 二、动物细胞培养的条件二、动物细胞培养的条件 1.1.营养条件营养条件: : (1)(1)合成培养基合成培养基: :将细胞所需的营养物质按将细胞所需的营养物质按_严格配制而成。严格配制而成。 (2)(2)天然成分天然成分:_:_等。等。 (3)(3)一般使用一般使用_培养基培养基, ,即培养液。即培养液。 单
2、个细胞单个细胞 生长和增殖生长和增殖 种类和所需量种类和所需量 血清血清 液体液体 2.2.无菌、无毒的环境无菌、无毒的环境: : (1)(1)培养液和培养用具培养液和培养用具_处理。处理。 (2)_(2)_环境下操作。环境下操作。 (3)(3)培养液定期更换的目的培养液定期更换的目的: :清除代谢物清除代谢物, ,防止防止_ _。 3.3.温度、温度、pHpH和渗透压和渗透压: : (1)(1)适宜的温度适宜的温度: :哺乳动物多以哺乳动物多以_ 为宜。为宜。 (2)(2)适宜的适宜的pH:pH:多数细胞生存的适宜多数细胞生存的适宜pHpH为为_。 (3)(3)适宜的渗透压。适宜的渗透压。
3、灭菌灭菌 无菌无菌 细胞代谢物积累对细胞自身造细胞代谢物积累对细胞自身造 成危害成危害 36.536.50.50.5 7.27.27.47.4 【激疑激疑】动物细胞培养能否体现动物体细胞的全能性动物细胞培养能否体现动物体细胞的全能性? ?说明你的理由。说明你的理由。 提示提示: :不能。动物细胞培养只是细胞的增殖不能。动物细胞培养只是细胞的增殖, ,没有体现细胞的全能性。没有体现细胞的全能性。 4.4.气体环境气体环境:95%:95%空气和空气和5%CO5%CO2 2。 (1)O(1)O2 2作用作用:_:_。 (2)CO(2)CO2 2的主要作用的主要作用:_:_。 细胞代谢所必需的细胞代谢
4、所必需的 维持培养液的维持培养液的pHpH 三、动物细胞培养的过程三、动物细胞培养的过程 填一填填一填: :基于动物细胞培养的过程基于动物细胞培养的过程, ,完成下面的问题完成下面的问题: : (1)(1)过程处理方法有过程处理方法有:_:_。 (2)(2)过程为过程为_培养培养, ,培养的动物细胞有两类培养的动物细胞有两类: : 悬浮在悬浮在_中生长增殖中生长增殖; ; _生长增殖。生长增殖。 (3)(3)进行过程时进行过程时, ,悬浮培养的细胞直接用悬浮培养的细胞直接用_收集收集; ;贴壁细胞需要使用贴壁细胞需要使用 _等处理等处理, ,然后用然后用_收集。收集。 (4)(4)过程为过程为
5、_培养培养, ,进行过程的原因主要有进行过程的原因主要有: :细胞密度过大、细胞密度过大、_ 积累、积累、_缺乏和接触抑制等。缺乏和接触抑制等。 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法 原代原代 培养液培养液 贴附于某些基质表面贴附于某些基质表面 离心法离心法 胰蛋白酶胰蛋白酶 离心法离心法 传代传代 有害代谢物有害代谢物 营养物质营养物质 四、干细胞培养及其应用四、干细胞培养及其应用 1.1.干细胞分布干细胞分布: :早期胚胎、早期胚胎、_和脐带等。和脐带等。 2.2.种类种类: :胚胎干细胞和胚胎干细胞和_干细胞。干细胞。 3.3.判一判判一判:
6、:基于干细胞的类型和应用基于干细胞的类型和应用, ,判断下列说法的正误。判断下列说法的正误。 (1)(1)胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官, ,甚至个体的甚至个体的 潜能。潜能。 ( )( ) 提示提示: :成体干细胞具有组织特异性成体干细胞具有组织特异性, ,只能分化成特定的细胞或组织只能分化成特定的细胞或组织, ,不具有发育不具有发育 成完整个体的能力。成完整个体的能力。 骨髓骨髓 成体成体 (2)(2)造血干细胞是发现最早、研究最多、应用最为成熟的一种成体干细胞。造血干细胞是发现最早、研究最多、应用最为成熟的一种成体
7、干细胞。 ( )( ) (3)iPS(3)iPS细胞称为诱导多能干细胞细胞称为诱导多能干细胞, ,与胚胎干细胞类似与胚胎干细胞类似, ,也需从胚胎中获取。也需从胚胎中获取。 ( )( ) 提示提示: :iPSiPS细胞来源于自身的体细胞诱导细胞来源于自身的体细胞诱导, ,无须从胚胎中获取。无须从胚胎中获取。 (4)(4)不同类型的干细胞分化能力不同不同类型的干细胞分化能力不同, ,胚胎干细胞的分化能力最强。胚胎干细胞的分化能力最强。( )( ) (5)(5)干细胞将在再生医学、药物安全性、有效性检测、疾病治疗等领域发挥重干细胞将在再生医学、药物安全性、有效性检测、疾病治疗等领域发挥重 要作用。
8、要作用。 ( )( ) 关键能力关键能力素养形成素养形成 知识点知识点 动物细胞培养过程动物细胞培养过程 1.1.动物细胞培养过程动物细胞培养过程: : 2.2.动物细胞培养过程中酶的处理动物细胞培养过程中酶的处理: : (1)(1)用酶“两次”处理的目的用酶“两次”处理的目的: :第一次使用的目的是使组织细胞分散开第一次使用的目的是使组织细胞分散开; ;第二次第二次 使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来, ,便于分散后继续培养。便于分散后继续培养。 (2)(2)使细胞分散开的原因使细胞分散开的原因: :一是能保证细胞所需要的营养供应一是能保证细胞所需要的营养供
9、应; ;二是能保证细胞二是能保证细胞 内有害代谢物的及时排出。内有害代谢物的及时排出。 (3)(3)不能用胃蛋白酶处理不能用胃蛋白酶处理: :由于大多数动物细胞培养的适宜由于大多数动物细胞培养的适宜pHpH为为7.27.27.4,7.4,而胃而胃 蛋白酶发挥作用的最适蛋白酶发挥作用的最适pHpH为为2.02.0左右左右, ,因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。 3.3.有关动物细胞培养知识点可归纳为有关动物细胞培养知识点可归纳为4 4个“个“2”:2”: (1)(1)培养材料为“培养材料为“2”:2”:即动物胚胎、幼龄动物的组织和器官。即动物胚胎、幼龄动物的组织和器
10、官。 (2)(2)培养过程为“培养过程为“2”:2”:即原代培养、传代培养。即原代培养、传代培养。 (3)(3)胰蛋白酶使用“胰蛋白酶使用“2”2”次次: :即原代培养和传代培养中均使用即原代培养和传代培养中均使用, ,目的是使细胞分散目的是使细胞分散 开。开。 (4)(4)细胞生长特点有“细胞生长特点有“2”2”个个: :即贴壁生长和接触抑制。即贴壁生长和接触抑制。 4.4.植物组织培养与动物细胞培养的比较植物组织培养与动物细胞培养的比较: : 项目项目 植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养 原理原理 植物细胞的全能性植物细胞的全能性 细胞增殖细胞增殖 培养基培养基 ( (半半
11、) )固体培养基固体培养基 液体培养基液体培养基 过程过程 外植体外植体 脱分化脱分化 愈伤组织愈伤组织 再分化再分化 胚状体胚状体 植物体植物体 动物的组织动物的组织 机械法或酶机械法或酶 细胞悬液细胞悬液 原代培养原代培养 胰蛋白酶胰蛋白酶 传代培养传代培养 项目项目 植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养 结果结果 新的植株新的植株 新的细胞新的细胞 相同点相同点 两技术手段培养过程中都进行有丝分裂两技术手段培养过程中都进行有丝分裂, ,都是无都是无 性繁殖性繁殖, ,都可称为都可称为“克隆克隆”, ,都不涉及减数分裂都不涉及减数分裂 均需要无菌操作、无菌培养均需要无菌操作、
12、无菌培养, ,需要适宜的温度、需要适宜的温度、 pHpH等条件等条件 【素养案例素养案例】 如图所示是某动物细胞培养时如图所示是某动物细胞培养时, ,培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果, ,下列下列 相关叙述错误的是相关叙述错误的是 ( ( ) ) A.A.实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间, ,以免损伤细胞以免损伤细胞 B.B.培养液中应适当加入青霉素、链霉素培养液中应适当加入青霉素、链霉素, ,以避免杂菌污染以避免杂菌污染 C.C.曲线曲线bcbc段变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢物积累等段变化的
13、主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢物积累等 D.D.培养至第培养至第6 d6 d时时, ,新产生的细胞数等于死细胞数新产生的细胞数等于死细胞数 【解题导引解题导引】 【解析解析】选选D D。实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间。实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间, ,以免损伤细胞以免损伤细胞,A,A正正 确确; ;培养液中应适当加入青霉素、链霉素等一定量的抗生素培养液中应适当加入青霉素、链霉素等一定量的抗生素, ,以避免杂菌污染以避免杂菌污染,B,B 正确正确; ;曲线曲线bcbc段表示活细胞密度减少段表示活细胞密度减少, ,而此时间段内死细胞密度增加而此时间段内死细胞密度增加,
14、,产生这种产生这种 变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢物积累等变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢物积累等,C,C正确正确; ;培养至培养至 第第6 d6 d时时, ,活细胞数等于死细胞数活细胞数等于死细胞数,D,D错误。错误。 【素养素养探究探究母题追问母题追问】 (1)(1)科学探究科学探究结果的交流与讨论结果的交流与讨论 实验过程中用胰蛋白酶溶液处理时间过长或过短实验过程中用胰蛋白酶溶液处理时间过长或过短, ,会出现什么结果会出现什么结果? ? 提示提示: :处理时间过长处理时间过长, ,胰蛋白酶会破坏细胞膜胰蛋白酶会破坏细胞膜, ,即损伤细胞。处理时间过短即损伤细
15、胞。处理时间过短, ,组织组织 细胞不能充分分散开。细胞不能充分分散开。 (2)(2)科学思维科学思维演绎与推理演绎与推理 上题曲线上题曲线abab段产生的原因是什么段产生的原因是什么? ? 提示提示: :营养物质相对充足营养物质相对充足, ,有害代谢物较少。有害代谢物较少。 【素养素养迁移迁移】 20202020年初年初, ,荷兰某研究所利用蛇干细胞培养出可分泌毒液的蛇毒腺微型组织荷兰某研究所利用蛇干细胞培养出可分泌毒液的蛇毒腺微型组织, , 让毒素的获取途径更加安全和简单。下列叙述正确的是让毒素的获取途径更加安全和简单。下列叙述正确的是 ( ( ) ) A.A.培养蛇干细胞时培养蛇干细胞时
16、O O2 2的作用是维持培养液的作用是维持培养液pHpH的稳定的稳定 B.B.蛇毒腺微型组织基因的表达与蛇干细胞不完全相同蛇毒腺微型组织基因的表达与蛇干细胞不完全相同 C.C.利用蛇干细胞的大量增殖即可获得大量分泌毒液的细胞利用蛇干细胞的大量增殖即可获得大量分泌毒液的细胞 D.D.培养蛇毒腺微型组织与哺乳动物细胞培养的条件完全相同培养蛇毒腺微型组织与哺乳动物细胞培养的条件完全相同 【解析解析】选选B B。培养蛇干细胞时。培养蛇干细胞时, ,二氧化碳的作用是维持培养液二氧化碳的作用是维持培养液pHpH的稳定的稳定,A,A错误错误; ; 蛇毒腺微型组织已经分化蛇毒腺微型组织已经分化, ,具有特定的
17、形态具有特定的形态, ,与蛇干细胞的一些基因的表达相同与蛇干细胞的一些基因的表达相同, , 如呼吸酶基因如呼吸酶基因, ,与一些特定基因的表达不同与一些特定基因的表达不同, ,如与毒素合成有关的基因的表达如与毒素合成有关的基因的表达,B,B 正确正确; ;蛇干细胞没有分化成腺细胞蛇干细胞没有分化成腺细胞, ,不能合成大量毒素不能合成大量毒素, ,不能增殖得到大量分泌不能增殖得到大量分泌 毒液的细胞毒液的细胞,C,C错误错误; ;蛇属于变温动物蛇属于变温动物, ,培养时需要的温度低于哺乳动物培养时需要的温度低于哺乳动物,D,D错误。错误。 【补偿训练补偿训练】 下列关于动物细胞培养的叙述中下列关
18、于动物细胞培养的叙述中, ,不正确的是不正确的是 ( ( ) ) A.A.传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞 B.B.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 C.C.癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象 D.D.动物细胞培养一般需要使用动物细胞培养一般需要使用COCO2 2培养箱培养箱 【解析解析】选选B B。由原代培养分瓶进行传代培养时。由原代培养分瓶进行传代培养时, ,需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理贴壁生长的细胞处理贴壁生长
19、的细胞,A,A项正确项正确; ;细胞的癌变一般发生于细胞的癌变一般发生于5050代后的细胞培养过程代后的细胞培养过程 中中,B,B项错误项错误; ;癌细胞膜上糖蛋白减少癌细胞膜上糖蛋白减少, ,细胞间的黏着性降低细胞间的黏着性降低, ,失去了接触抑制失去了接触抑制, ,容容 易扩散和转移易扩散和转移,C,C项正确项正确; ;动物细胞培养的场所是动物细胞培养的场所是COCO2 2培养箱培养箱, ,培养箱内含有培养箱内含有95%95%的的 空气和空气和5%5%的的COCO2 2的混合气体的混合气体, ,为动物细胞提供适宜的气体环境为动物细胞提供适宜的气体环境,D,D项正确。项正确。 【课堂回眸课堂
20、回眸】 课堂检测课堂检测素养达标素养达标 【概念概念诊断诊断】 1.1.动物细胞培养是动物细胞工程的基础动物细胞培养是动物细胞工程的基础, ,下列有关动物细胞培养的描述合理的下列有关动物细胞培养的描述合理的 是是_。 动物细胞培养要定期更换培养液动物细胞培养要定期更换培养液, ,其目的是便于清除代谢物其目的是便于清除代谢物, ,防止代谢物积累。防止代谢物积累。 多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜多数动物细胞培养过程中其培养液所需的适宜pHpH为为6.86.87.07.0。 培养动物细胞的第一代培养动物细胞的第一代( (即第一次细胞增殖即第一次细胞增殖) )被称为原代培养。被称为原代培养。
21、 动物细胞培养过程中需要充足的氧气环境动物细胞培养过程中需要充足的氧气环境, ,二氧化碳可有可无二氧化碳可有可无, ,影响不大。影响不大。 培养瓶中的细胞通常需要定期使用胰蛋白酶处理培养瓶中的细胞通常需要定期使用胰蛋白酶处理, ,分瓶后继续培养。分瓶后继续培养。 【解析解析】选。动物细胞培养要定期更换培养液选。动物细胞培养要定期更换培养液, ,其目的是便于清除代谢物其目的是便于清除代谢物, , 防止代谢物积累对细胞的毒害防止代谢物积累对细胞的毒害, ,正确正确; ;多数动物细胞培养过程中其培养液所需多数动物细胞培养过程中其培养液所需 的适宜的适宜pHpH为为7.27.27.4,7.4,错误错误
22、; ;细胞分裂多次后细胞分裂多次后, ,细胞数目增多出现接触抑制细胞数目增多出现接触抑制, ,停停 止增殖然后进行分瓶止增殖然后进行分瓶, ,分瓶处理前的培养为原代培养分瓶处理前的培养为原代培养, ,错误错误; ;动物细胞培养需动物细胞培养需 要氧气和二氧化碳要氧气和二氧化碳, ,错误错误; ;培养瓶中的细胞通常需要定期使用胰蛋白酶处理培养瓶中的细胞通常需要定期使用胰蛋白酶处理, , 分瓶后继续培养才能保持继续增殖分瓶后继续培养才能保持继续增殖, ,正确。正确。 2.2.在动物细胞工程中在动物细胞工程中, ,最基础的一项技术是最基础的一项技术是 ( ( ) ) A.A.动物细胞培养技术动物细胞
23、培养技术 B.B.细胞核移植技术细胞核移植技术 C.C.动物细胞融合技术动物细胞融合技术 D.D.干细胞的培养干细胞的培养 【解析解析】选选A A。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 3.3.下列动物细胞培养过程中下列动物细胞培养过程中, ,属于原代培养的是属于原代培养的是 ( ( ) ) A.A.用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程 B.B.从机体取得细胞后立即进行培养的过程从机体取得细胞后立即进行培养的过程 C.C.出现接触抑制现象后接下来的细胞培养过程出现接触抑制现象后接下来的细胞培养过程 D.D.哺乳动物细胞在培养基
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