(新教材)高中生物人教版选择性必修三课件:2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体 .ppt
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1、二 动物细胞融合技术与单克隆 抗体 必备知识必备知识素养奠基素养奠基 一、动物细胞融合技术一、动物细胞融合技术 1.1.概念概念: :使使_动物细胞结合形成动物细胞结合形成_细胞的技术。细胞的技术。 2.2.原理原理:_:_。 3.3.诱导融合常用的方法诱导融合常用的方法: : (1)(1)物理物理:_:_。 (2)(2)化学化学:_:_。 (3)(3)生物生物:_:_。 两个或多个两个或多个 一个一个 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 电融合法电融合法 PEGPEG融合法融合法 灭活病毒诱导法灭活病毒诱导法 4.4.判一判判一判: :基于细胞融合的技术及其应用基于细胞融合的技术及其应用, ,判断
2、下列说法的正误判断下列说法的正误: : (1)(1)在动物细胞融合过程中在动物细胞融合过程中, ,既有细胞膜的融合既有细胞膜的融合, ,也有细胞核的融合过程。也有细胞核的融合过程。 ( )( ) (2)(2)细胞融合突破物种间的生殖隔离细胞融合突破物种间的生殖隔离, ,实现了远缘杂交。实现了远缘杂交。 ( )( ) (3)(3)目前细胞融合只能在动物和动物之间、植物和植物之间进行目前细胞融合只能在动物和动物之间、植物和植物之间进行, ,不能实现动不能实现动 物和植物的细胞融合。物和植物的细胞融合。 ( )( ) 提示提示: :至今至今, ,动物和植物之间的细胞融合也获得了成功。动物和植物之间的
3、细胞融合也获得了成功。 (4)(4)动物细胞融合为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等提供重要的手段。动物细胞融合为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等提供重要的手段。 ( )( ) (5)(5)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。 ( )( ) 提示提示: :杂交细胞具有杂交细胞具有4 4个染色体组个染色体组, ,应该是四倍体细胞。应该是四倍体细胞。 【激疑激疑】诱导动物细胞融合与植物体细胞杂交融合的方法有什么不同诱导动物细胞融合与植物体细胞杂交融合的方法有什么不同? ? 提示提示: :动物细胞融合能用灭活的病毒进行诱导动物细胞融合能用灭活的病
4、毒进行诱导, ,植物体细胞杂交融合不能采用植物体细胞杂交融合不能采用 此方法。此方法。 二、单克隆抗体及其应用二、单克隆抗体及其应用 1.1.制备原理制备原理: : (1)B(1)B淋巴细胞的特点淋巴细胞的特点: :一种一种B B淋巴细胞只分泌一种淋巴细胞只分泌一种_抗体抗体,B,B淋巴细胞在体淋巴细胞在体 外外_(_(填“能”或“不能”填“能”或“不能”) )无限增殖。无限增殖。 (2)(2)骨髓瘤细胞的特点骨髓瘤细胞的特点:_:_。 (3)(3)杂交瘤细胞的特点杂交瘤细胞的特点: :既能大量既能大量_,_,又能产生又能产生_抗体。抗体。 特异性特异性 不能不能 能无限增殖能无限增殖 增殖增
5、殖 特异性特异性 2.2.制备过程制备过程: : 填一填填一填: :基于单克隆抗体制备的过程基于单克隆抗体制备的过程, ,完成下列问题。完成下列问题。 (1)A(1)A操作注射特定的抗原操作注射特定的抗原, ,目的是可以从小鼠的脾中得到目的是可以从小鼠的脾中得到_ _细胞。细胞。 (2)(2)杂交瘤细胞技术选择融合的两种细胞杂交瘤细胞技术选择融合的两种细胞: :细胞细胞_,_,细胞细胞_ _。 (3)(3)过程过程B B和和C C为诱导细胞融合的过程为诱导细胞融合的过程, ,获得的细胞是获得的细胞是_(_(填“一种”或“多填“一种”或“多 种”种”) )。 (4)(4)细胞到细胞的过程使用特定
6、的选择培养基进行筛选细胞到细胞的过程使用特定的选择培养基进行筛选, ,只有细胞只有细胞 _细胞才能生长细胞才能生长, ,其他细胞不能生长。其他细胞不能生长。 产生特定抗体的产生特定抗体的B B淋淋 巴巴 多种多种B B淋巴细胞淋巴细胞 骨髓骨髓 瘤细胞瘤细胞 多种多种 杂交瘤杂交瘤 (5)(5)细胞来源于细胞细胞来源于细胞_(_(填数字序号填数字序号),),细胞为抗体检测呈阳性的杂交瘤细细胞为抗体检测呈阳性的杂交瘤细 胞胞, ,其分泌的抗体其分泌的抗体_。 (6)(6)培养杂交瘤细胞的方法是注射到小鼠腹腔和培养杂交瘤细胞的方法是注射到小鼠腹腔和D_,D_,从培养液或小鼠腹从培养液或小鼠腹 水中
7、可提取水中可提取_。 3.3.应用应用: : (1)(1)诊断试剂。如诊断试剂。如: :利用同位素或荧光标记的单克隆抗体利用同位素或荧光标记的单克隆抗体, ,定位诊断肿瘤、心血定位诊断肿瘤、心血 管畸形。管畸形。 (2)(2)治疗疾病。治疗疾病。 能与特定的抗原结合能与特定的抗原结合 体外培养体外培养 单克隆抗体单克隆抗体 关键能力关键能力素养形成素养形成 知识点一知识点一 动物细胞融合动物细胞融合 1.1.动物细胞融合过程解读动物细胞融合过程解读: : (1)(1)操作过程操作过程: :细胞膜融合细胞膜融合细胞质融合细胞质融合细胞核融合细胞核融合( (实质实质) )。 (2)(2)筛选意义筛
8、选意义: :诱导融合的手段只是促使细胞间的融合诱导融合的手段只是促使细胞间的融合, ,不能保证所有的细胞都不能保证所有的细胞都 发生融合发生融合, ,形成的融合细胞也有多种。形成的融合细胞也有多种。 (3)(3)融合细胞特点融合细胞特点: :具有两个细胞的遗传信息具有两个细胞的遗传信息, ,通过动物细胞的培养通过动物细胞的培养, ,杂交细胞表杂交细胞表 现出两个亲本的特点。现出两个亲本的特点。 2.2.植物体细胞杂交与动物细胞融合植物体细胞杂交与动物细胞融合: : 项目项目 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合 原理原理 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞全能性细胞全能性 细
9、胞的增殖细胞的增殖 融合融合 过程过程 酶解法除去细胞壁酶解法除去细胞壁 注射特定的抗原注射特定的抗原 原生质体融合原生质体融合 动物细胞融合动物细胞融合 杂种细胞的筛选杂种细胞的筛选 杂交瘤细胞的筛选杂交瘤细胞的筛选 培养获得杂种植株培养获得杂种植株 提取提纯单克隆抗体提取提纯单克隆抗体 融合融合 方法方法 物理法物理法: :电融合法、离心法电融合法、离心法 化学法化学法:PEG:PEG、高、高CaCa2+ 2+高 高pHpH融合融合 法法 物理法物理法: :电融合法电融合法 化学法化学法:PEG:PEG融合法融合法 生物法生物法: :灭活病毒诱导法灭活病毒诱导法 实例实例 番茄番茄马铃薯植
10、株马铃薯植株 单克隆抗体单克隆抗体 用途用途 培育作物新品种培育作物新品种 疾病的诊断和治疗疾病的诊断和治疗 【素养案例素养案例】 如图是两种生物细胞融合技术的示意图如图是两种生物细胞融合技术的示意图, ,关于该图的有关叙述关于该图的有关叙述, ,完全正确的一组完全正确的一组 是是 ( ( ) ) a a过程必须除去细胞膜过程必须除去细胞膜;b;b过程需要通过细胞识别过程需要通过细胞识别 若若X X是抗体是抗体, ,则甲、乙细胞是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的则甲、乙细胞是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的B B淋巴细胞淋巴细胞 若若X X是苹果梨幼苗是苹果梨幼苗, ,则则c c过程是细胞分裂、分化过程是
11、细胞分裂、分化 细胞融合技术的缺点是不能克服远缘不亲和性细胞融合技术的缺点是不能克服远缘不亲和性 A.A. B.B. C.C. D.D. 【解题导引解题导引】解答本题思维流程如下解答本题思维流程如下: : 【解析解析】选选C C。动物细胞融合不需要去除细胞膜。动物细胞融合不需要去除细胞膜, ,两个细胞的细胞膜融合可以不两个细胞的细胞膜融合可以不 需要识别需要识别, ,错误错误; ;若若X X是抗体是抗体, ,则甲、乙细胞是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的则甲、乙细胞是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的B B 淋巴细胞淋巴细胞, ,二者融合后的杂交瘤细胞既能无限增殖二者融合后的杂交瘤细胞既能无限增殖, ,又能
12、产生专一抗体又能产生专一抗体, ,正确正确; ; 若若X X是苹果梨幼苗是苹果梨幼苗, ,则甲、乙细胞是苹果细胞和梨细胞则甲、乙细胞是苹果细胞和梨细胞,c,c过程是细胞分裂、分化过程是细胞分裂、分化, , 正确正确; ;细胞融合技术打破了生殖隔离细胞融合技术打破了生殖隔离, ,克服了远缘杂交不亲和的障碍克服了远缘杂交不亲和的障碍, ,错误。错误。 【素养素养探究探究母题追问母题追问】 (1)(1)科学思维科学思维演绎与推理演绎与推理 若该图为植物体细胞杂交若该图为植物体细胞杂交, ,细胞甲有细胞甲有2 2个染色体组个染色体组, ,细胞乙有细胞乙有4 4个染色体组个染色体组, ,那么那么X X
13、个体含有几个染色体组个体含有几个染色体组? ? 提示提示: :X X个体含有个体含有6 6个染色体组。个染色体组。 (2)(2)科学思维科学思维批判性思维批判性思维 某同学为了保证融合不会出现其他情况某同学为了保证融合不会出现其他情况, ,只选用一个甲细胞和一个乙细胞进行只选用一个甲细胞和一个乙细胞进行 融合融合, ,你认为他的做法是否合理你认为他的做法是否合理? ?说出你的理由。说出你的理由。 提示提示: :不合理。因为细胞融合成功率较低不合理。因为细胞融合成功率较低, ,只选用两个细胞可能无法获得融合的只选用两个细胞可能无法获得融合的 细胞。细胞。 【素养素养迁移迁移】 下列关于动物细胞融
14、合的说法下列关于动物细胞融合的说法, ,错误的是错误的是 ( ( ) ) A.A.动物细胞融合也称细胞杂交动物细胞融合也称细胞杂交, ,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的 过程过程 B.B.动物细胞融合需要用纤维素酶处理动物细胞融合需要用纤维素酶处理 C.C.动物细胞融合时需人工诱导动物细胞融合时需人工诱导 D.D.常用的诱导动物细胞融合的因素有常用的诱导动物细胞融合的因素有: :聚乙二醇、灭活的病毒等聚乙二醇、灭活的病毒等 【解析解析】选选B B。动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过。动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一
15、个细胞的过 程。动物细胞无细胞壁程。动物细胞无细胞壁, ,所以诱导融合前不需要用纤维素酶处理。动物细胞融所以诱导融合前不需要用纤维素酶处理。动物细胞融 合需要人工诱导融合合需要人工诱导融合, ,诱导因素包括聚乙二醇、灭活的病毒等。诱导因素包括聚乙二醇、灭活的病毒等。 【补偿训练补偿训练】 如图为细胞融合的示意图如图为细胞融合的示意图, ,下列叙述正确的是下列叙述正确的是 ( ( ) ) A.A.若若a a细胞和细胞和b b细胞是植物细胞细胞是植物细胞, ,需先去分化再诱导融合需先去分化再诱导融合 B.aB.a细胞和细胞和b b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现细胞之间的融合需要促融处理后才能
16、实现 C.cC.c细胞的形成与细胞的形成与a a、b b细胞膜的流动性无关细胞膜的流动性无关 D.cD.c细胞将同时表达细胞将同时表达a a细胞和细胞和b b细胞中的所有基因细胞中的所有基因 【解析解析】选选B B。本题考查细胞工程相关知识。本题考查细胞工程相关知识。a a、b b如果为植物细胞如果为植物细胞, ,则需要去细则需要去细 胞壁胞壁, ,但不需要去分化但不需要去分化,A,A项错误项错误; ;两细胞融合需要用物理或化学等方法使其融合两细胞融合需要用物理或化学等方法使其融合, , 其融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性其融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性,B,B项正确项正确,C,C项
17、错误项错误; ;融合后的杂种融合后的杂种 细胞中的基因仍是选择性表达细胞中的基因仍是选择性表达, ,不会表达全部的基因不会表达全部的基因,D,D项错误。项错误。 知识点二知识点二 单克隆抗体单克隆抗体 1.1.制备流程制备流程: : 【特别提醒特别提醒】如果仅考虑两个细胞融合如果仅考虑两个细胞融合, ,那么单克隆抗体制备的过程中获得那么单克隆抗体制备的过程中获得3 3种种 融合细胞融合细胞, ,即骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、即骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B B淋巴细胞与淋巴细胞与B B淋巴细胞融合、淋巴细胞融合、B B淋淋 巴细胞与骨髓瘤细胞融合。巴细胞与骨髓瘤细胞融合。 2.2.两次筛选两次
18、筛选: : 项目项目 第一次筛选第一次筛选 第二次筛选第二次筛选 筛选筛选 原因原因 诱导融合后得诱导融合后得 到多种杂交细到多种杂交细 胞胞, ,另外还有未另外还有未 融合的细胞融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺 激激, ,所以经选择性培养获得的杂交瘤细所以经选择性培养获得的杂交瘤细 胞中有能产生其他抗体的细胞胞中有能产生其他抗体的细胞 3.3.三种细胞的比较三种细胞的比较: : 细胞类型细胞类型 来来 源源 特特 点点 已免疫的已免疫的 B B淋巴细胞淋巴细胞 由由B B淋巴细胞受抗原淋巴细胞受抗原 刺激后增殖分化而刺激后增殖分化而 来来 能产
19、生单一抗体能产生单一抗体, ,但不能但不能 无限增殖无限增殖 骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 从骨髓肿瘤中提取从骨髓肿瘤中提取 能无限增殖能无限增殖, ,但不能产生但不能产生 抗体抗体 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 浆细胞与骨髓瘤细浆细胞与骨髓瘤细 胞融合而成胞融合而成 既能产生抗体既能产生抗体, ,又能无限又能无限 增殖增殖 【素养案例素养案例】 甘草酸是中药甘草中的主要活性成分甘草酸是中药甘草中的主要活性成分, ,为了快速检测甘草酸为了快速检测甘草酸, ,科研人员利用细胞科研人员利用细胞 工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体, ,其基本操作过程如图所示其基本操作过程如图所示,
20、 ,相关叙述正相关叙述正 确的是确的是 ( ( ) ) A.A.过程注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲过程注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲 B.B.过程诱导细胞融合过程诱导细胞融合, ,利用了细胞膜的选择透过性利用了细胞膜的选择透过性 C.C.过程的筛选方法相同过程的筛选方法相同, ,细胞丙、丁遗传物质相同细胞丙、丁遗传物质相同 D.D.过程无论在体内还是体外进行过程无论在体内还是体外进行, ,细胞丁都可大量增殖细胞丁都可大量增殖 【解题导引解题导引】明确两次筛选的目的和方法不同明确两次筛选的目的和方法不同: : 【解析解析】选选D D。过程注射相应抗原后。过程注射相应抗原后
21、, ,需要机体进行免疫需要机体进行免疫, ,产生具有免疫能力产生具有免疫能力 的的B B淋巴细胞后淋巴细胞后, ,才可以从小鼠脾脏中提取细胞甲才可以从小鼠脾脏中提取细胞甲, ,选项选项A A错误错误; ;过程诱导细胞过程诱导细胞 融合融合, ,利用了细胞膜的流动性利用了细胞膜的流动性, ,选项选项B B错误错误; ;过程用选择培养基获得杂交瘤细胞过程用选择培养基获得杂交瘤细胞, , 过程用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞过程用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞, ,选项选项C C错误错误; ; 杂种细胞既能够增殖又能产生抗体杂种细胞既能够增殖又能产生抗体, ,过程
22、无论在体内还是体外进行过程无论在体内还是体外进行, ,细胞丁都细胞丁都 可大量增殖可大量增殖, ,选项选项D D正确。正确。 【素养素养探究探究母题追问母题追问】 (1)(1)社会责任社会责任关注社会热点问题关注社会热点问题 新型冠状病毒导致的全球疫情新型冠状病毒导致的全球疫情, ,如果你是一个研究员如果你是一个研究员, ,请从单克隆抗体的角度进请从单克隆抗体的角度进 行药物研发行药物研发, ,过程注射的抗原是什么过程注射的抗原是什么? ? 提示提示: :减毒或灭活的新型冠状病毒。减毒或灭活的新型冠状病毒。 (2)(2)科学思维科学思维演绎与推理演绎与推理 已知小鼠的体细胞含已知小鼠的体细胞含
23、2 2N N=40=40条染色体条染色体, ,那么融合的杂交瘤细胞中染色体和染色体那么融合的杂交瘤细胞中染色体和染色体 组数分别是多少组数分别是多少? ? 提示提示: :8080条染色体条染色体,4,4个染色体组。个染色体组。 【素养素养迁移迁移】 将小鼠骨髓瘤细胞与一种将小鼠骨髓瘤细胞与一种B B淋巴细胞融合淋巴细胞融合, ,可使融合的细胞经培养产生单克隆可使融合的细胞经培养产生单克隆 抗体抗体, ,其依据是其依据是 ( ( ) ) A.BA.B淋巴细胞可产生抗体淋巴细胞可产生抗体, ,但不能无限增殖但不能无限增殖; ;骨髓瘤细胞不产生抗体骨髓瘤细胞不产生抗体, ,但能无限增但能无限增 殖殖
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