1、免疫诊断与治疗免疫诊断与治疗Immune Diagnosis&Therapy免疫诊断(Immune diagnosis)n概念概念 利用免疫学原理进行临床疾病的诊断利用免疫学原理进行临床疾病的诊断或辅助诊断或辅助诊断 1）抗原或抗体的检测）抗原或抗体的检测n利用已知抗体检测病人的未知抗原，如利用已知抗体检测病人的未知抗原，如HBVsAgn利用已知抗原检测病人的抗体，如抗利用已知抗原检测病人的抗体，如抗HIV抗体、抗核抗体等抗体、抗核抗体等4）同位素标记抗体的体内显像）同位素标记抗体的体内显像例如:同位素标记的抗肿瘤抗体的体内显像n概念概念 免疫治疗：免疫治疗：通过改变机体免疫应答，通过改变机体
2、免疫应答，治疗临床免疫相关疾病的方法。治疗临床免疫相关疾病的方法。n包括：免疫抑制包括：免疫抑制、免疫增强。免疫增强。免疫治疗免疫治疗（Immunotherapy）免疫分子有关的治疗n抗体n细胞因子及其拮抗分子一、抗体为基础的免疫治疗抗体药物发展历程n已经经过了3代：n第一代抗体药物源于动物多价抗血清，主要用于一些感染性疾病的早期被动免疫治疗；n第二代抗体药物是利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体及其衍生物。1986年，美国FDA批准了世界上第一个单抗治疗性药物抗CD3单抗OKT3上市，用于器官移植时的抗排斥反应。n第三代抗体药物，即基因工程抗体时代。随着免疫学和分子生物学技术的发展以及抗体基因结构
3、的阐明，DNA重组技术开始用于抗体的改造。（一）、免疫血清：n抗毒素血清(antitoxic serum)n胎盘（丙种）球蛋白(placental globulin)n抗菌免疫血清(antibacterial immune serum)n抗病毒免疫血清(antiviral immune serum)n抗淋巴细胞丙种球蛋白(anti-lymphocyte globulin)（二）、单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)：单抗制备原理鼠单抗药物用于人体的缺陷：n主要体现在两方面：n激活相应的人的效应系统缺陷：n抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)；n补体依赖的细胞毒作用(
4、CDC)；n鼠抗体作为外源蛋白刺激人体免疫系统产生应答，产生人抗鼠抗体，影响疗效，半衰期缩短。（三）、基因工程抗体：n嵌合抗体n人源化抗体n完全人源抗体n嵌合抗体嵌合抗体：在基因水平上将小鼠的Ig可变区与人的Ig恒定区嵌合在一起，人Ig分子的序列占70-80%，减少了单克隆抗体的免疫原性。n人源化抗体人源化抗体：将针对某种抗原的鼠源特异性抗体的CDR基因代替人的Ig的CDR基因，所产生的抗体几乎为人源的（90%），减少了单克隆抗体的免疫原性。抗体药物临床应用领域n抗癌：应用最多，EGF、VEGF、靶向药物载体n乳腺癌n卵巢癌n非小细胞肺癌n直结肠癌n急性白血病、非何杰金氏淋巴瘤n肝癌n抗自身免
5、疫病n抗感染n抗心血管疾病n抗器官移植排斥反应批批准准上上市市的的抗抗体体药药物物抗体药物作用机制n封闭靶点功能：如：anti-IL-2R,anti-EGFR；n中和作用：如：anti-TNF;n靶向载体：如：Zevalin,利卡汀；n诱导免疫应答：具ADCC,CDC效应，如：Rituximab(anti-CD20)。抗细胞表面分子的单抗抗细胞表面分子的单抗抗细胞因子的单抗抗细胞因子的单抗抗体导向药物抗体导向药物n抗细胞表面分子的单抗：n抗CD3 McAb：n主要通过细胞清除、功能性受体封阻，杀伤成熟T细胞或阻断机体细胞免疫反应达到抗排斥目的。n1986年美国FDA已批准应用小鼠抗CD3 Mc
6、Ab治疗急性肾移植排斥反应，是世界上第一个单抗治疗性药物。1993年又被FDA批准用于逆转心脏移植和肝移植排斥反应。抗细胞表面分子的单抗抗细胞表面分子的单抗抗细胞因子的单抗抗细胞因子的单抗抗体导向药物抗体导向药物n抗细胞因子的单抗：抗细胞因子的单抗：抗抗IL1、TNF McAb：抗炎：抗炎抗抗VEGF：抗癌：抗癌n抗体导向药物治疗：抗体导向药物治疗：放射免疫疗法放射免疫疗法抗体导向化学疗法：甲氨蝶呤、长春新碱、阿霉素抗体导向化学疗法：甲氨蝶呤、长春新碱、阿霉素免疫毒素疗法：蓖麻毒素、白喉毒素免疫毒素疗法：蓖麻毒素、白喉毒素（链亲和素）抗体药物的发展趋势n抗体药物是目前国际生物医药的研究与开发的
7、最热点；n人源抗体，将是今后治疗性抗体的主流：n人源抗体制备技术包括：n人-人杂交瘤技术；nEB病毒转化人B淋巴细胞；n抗体库技术；抗体库技术；n转基因鼠技术；转基因鼠技术；n根据抗原-抗体复合物的晶体结构设计人源抗体。二、细胞因子及其拮抗分子为基础的免疫治疗n细胞因子：n恶性肿瘤；n感染；n促进造血功能恢复；n细胞因子拮抗剂：n自身免疫病；n移植排斥；n感染性休克;n炎症；n肿瘤。（一）、细胞因子补充和添加疗法：n重组细胞因子：应用重组细胞因子作为药物用于疾病的治疗n干扰素：n抗肿瘤细胞因子：IL-2、IFNn促进造血的细胞因子：G-CSF、GM-CSF、EPO、IL-11n细胞因子基因疗法
8、：名称名称适应症适应症IFN白血病、白血病、Kaposi肉瘤、肝炎、癌症、肉瘤、肝炎、癌症、AIDS、黑色素瘤、肾细胞癌、黑色素瘤、肾细胞癌IFN慢性肉芽肿、生殖器疣、过敏性皮炎、感染性疾病、类风湿关节炎慢性肉芽肿、生殖器疣、过敏性皮炎、感染性疾病、类风湿关节炎G-CSF自身骨髓移植、化疗导致的粒细胞减少症、自身骨髓移植、化疗导致的粒细胞减少症、AIDS、白血病、再生障碍性贫血、白血病、再生障碍性贫血GM-CSF自身骨髓移植、化疗导致的血细胞减少症、自身骨髓移植、化疗导致的血细胞减少症、AIDS、再生障碍性贫血、再生障碍性贫血、Epo慢性肾衰导致的贫血、癌症或癌症化疗导致的贫血、失血后贫血慢性
9、肾衰导致的贫血、癌症或癌症化疗导致的贫血、失血后贫血IL-2癌症、免疫缺陷、疫苗佐剂癌症、免疫缺陷、疫苗佐剂IFN多发性硬化症多发性硬化症IL-11放化疗所致血小板减少症放化疗所致血小板减少症干细胞因子干细胞因子SCF与与G-CSF联合应用于外周血干细胞移植联合应用于外周血干细胞移植EGF外用药治疗烧伤、溃疡外用药治疗烧伤、溃疡bFGF外用药治疗烧伤、外周神经炎外用药治疗烧伤、外周神经炎PEG-IFN 长半衰期的长半衰期的IFN PEG-G-CSF长半衰期的长半衰期的G-CSF 已批准上市的已批准上市的重组重组细胞因子药物细胞因子药物n细胞因子基因疗法：n特点：n体内持续表达；n克服细胞因子药
10、物半衰期短，需反复高剂量注射，易产生副作用；n应用：n恶性肿瘤；n感染；n自身免疫病。表达细胞因子VEGF的腺病毒或裸DNA直接体内注射治疗梗塞性血管病基因修饰瘤苗：n细胞因子（TNF-、GM-CSF、IL-2、IFN-，免疫调节杀瘤）。（二）、细胞因子阻断和拮抗疗法：n抗体、受体拮抗剂、可溶性细胞因子受体、小分子化合物CKCKCKCKAbCKCKraSoluble receptorReceptor细胞因子抑制剂的不同形式细胞因子抑制剂的不同形式受体拮抗剂受体拮抗剂可溶性细胞因子受体可溶性细胞因子受体细胞因子阻断和拮抗机制：TNF嵌合抗体嵌合抗体溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎溃疡性结肠炎、类风湿
11、性关节炎IL-1受体拮抗剂受体拮抗剂类风湿性关节炎类风湿性关节炎人人TNF的单抗的单抗类风湿性关节炎类风湿性关节炎TNF受体受体-Ig融合蛋白融合蛋白类风湿性关节炎类风湿性关节炎DAB389-IL-2(IL-2免疫毒素免疫毒素)T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤人源化抗人源化抗HER2(EGFR2)单抗单抗乳腺癌转移乳腺癌转移人源化抗人源化抗EGFR1抗体抗体晚期肠癌晚期肠癌人源化抗人源化抗VEGF抗体抗体晚期肠癌晚期肠癌FDAFDA批准上市的细胞因子批准上市的细胞因子抑制剂抑制剂 美国FDA2001年11月批准上市的IL-1ra（Kineret），治疗类风湿关节炎批准上市的重组可溶性受体药物n可溶性TN
12、F受体-Ig（Enbrel）：治疗类风湿关节炎(Amgen)，2007年在北美销售额超过32亿美元n可溶性CD152-Ig（CTLA4-Ig）：商品名Abatacept，治疗自身免疫病（Bristol-Myers Squibb），2005年12月批准上市。免疫细胞有关的治疗n将免疫细胞输入病人体内进行治疗的方法1）造血细胞输入治疗，包括：骨髓移植(自体或异体）脐带血移植 外周血干细胞移植等n2）免疫效应细胞输入治疗，即过继性免疫（Adoptive immunity）LAK（Lymphokine activated killer）细胞 CIK（Cytokine induced killer）细胞
13、 TIL（Tumor infiltrating lymphocyte）DC（Dendritic cell）治疗等LAK或TIL的肿瘤免疫治疗3）治疗性肿瘤疫苗）治疗性肿瘤疫苗荷载肿瘤抗原的肿瘤疫苗免疫分子基因转染的肿瘤疫苗免疫细胞治疗的主要问题n疗效不稳定，不同个体反应不同n只能采取个体化治疗，不能工业生产，质量控制有难度n成本高，价格昂贵化学药物和微生物制剂1）具有免疫抑制效应的化学药物）具有免疫抑制效应的化学药物环孢菌素环孢菌素A（Cyclosporin A）、）、FK506等等 主要用于移植排斥和自身免疫病主要用于移植排斥和自身免疫病2）具有免疫增强效应的药物）具有免疫增强效应的药物 如左旋咪唑（如左旋咪唑（Levamisole）、）、卡介苗卡介苗（BCG）、）、胞壁酰二肽（胞壁酰二肽（MDP）等，用等，用于非特异性提高免疫应答。于非特异性提高免疫应答。思考题n试举例说明免疫分子治疗的机制及临床应用。
