1、2022-5-25药物分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析眠药物的分析第七章第七章2022-5-25药物分析 巴比妥类和苯并二氮杂卓类药物是巴比妥类和苯并二氮杂卓类药物是临床常用的镇静催眠药。由于这类药临床常用的镇静催眠药。由于这类药物应用广泛，容易因不合理使用而引物应用广泛，容易因不合理使用而引起中毒。因此，需要对本类药物的原起中毒。因此，需要对本类药物的原料、制剂进行分析，有时也需要对生料、制剂进行分析，有时也需要对生物样品中微量该类药物进行分析。物样品中微量该类药物进行分析。2022-5-25药物分析 本章要求：本章要求： 1、掌握巴比妥类药物的化学结
2、构与性质（化学性质与分析、掌握巴比妥类药物的化学结构与性质（化学性质与分析方法间的关系）方法间的关系） 2、掌握巴比妥类药物的鉴别试验、掌握巴比妥类药物的鉴别试验 3、了解巴比妥类药物的特殊杂质检查、了解巴比妥类药物的特殊杂质检查 4、熟悉巴比妥类药物的含量测定、熟悉巴比妥类药物的含量测定 5、了解、了解并二氮杂卓类药物的结构特点、鉴别、检查与含量并二氮杂卓类药物的结构特点、鉴别、检查与含量测定测定2022-5-25药物分析HHCCCONONC OR1R2巴比妥类药物的基本结构巴比妥类药物的基本结构 一、结构剖析一、结构剖析2022-5-25药物分析HHH2CCCONONC O丙二酸酯丙二酸酯
3、H2H2NNC O脲脲+环状丙二酰脲环状丙二酰脲H2CCCOHOHOOC2H5C2H5缩合缩合2022-5-25药物分析132HHCCNHOO1,3-二酰亚胺基团二酰亚胺基团2022-5-25药物分析HHCCCONONC OR1R21，3-二酰亚胺基团二酰亚胺基团 2022-5-25药物分析HHCCCONONC OR1R2HH互变异构为烯醇式结构互变异构为烯醇式结构 弱酸性弱酸性弱酸性弱酸性2022-5-25药物分析CCCONONC OHHHH515,5-取代取代1,5,5-取代取代R1R2R3S硫取代硫取代2022-5-25药物分析CCCONONC OH5C2HH亚硝基化反应亚硝基化反应甲醛
4、甲醛-硫酸反应硫酸反应苯巴比妥苯巴比妥 phenobarbital典型药物：2022-5-25药物分析HCCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7使碘、溴或高锰酸钾褪色使碘、溴或高锰酸钾褪色司可巴比妥钠司可巴比妥钠 Secobarbital sodium2022-5-25药物分析HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3硫喷妥钠硫喷妥钠Thiopental sodiumPbS2022-5-25药物分析 * 环状母核部分环状母核部分 * 取代基部分取代基部分 区别各种巴比妥类药物区别各种巴比妥类药物结构特征结构特征环状丙二酰脲环状丙二酰脲1,3-二酰亚胺基团二酰
5、亚胺基团决定巴比妥决定巴比妥类药物特性类药物特性2022-5-25药物分析二、巴比妥类药物的理化性质二、巴比妥类药物的理化性质 （一）物理性质（一）物理性质 1.白色结晶或结晶性粉末，具有固定的熔点。白色结晶或结晶性粉末，具有固定的熔点。 2.游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。于有机溶剂。2022-5-25药物分析1. 弱酸性弱酸性 * 酮式酮式-烯醇式互变异构烯醇式互变异构 * 在水溶液中可以发生两级电离在水溶液中可以发生两级电离 *可与碱成盐可与碱成盐（
6、二）（二） 化学性质化学性质2022-5-25药物分析CCCONONC OHR1R2HCCCONONC OR1R2HHCCCONONC OR1R2HCCCONONC OR1R2+ H+ H+pK1=8+ H+ H+pK2=12两级电离：2022-5-25药物分析与强碱成盐与强碱成盐CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O2022-5-25药物分析R2HHCCCONONC OR12. 水解反应水解反应 NaOH5共沸共沸2NH3具氨臭味，可使具氨臭味，可使红石蕊试纸变蓝红石蕊试纸变蓝2022-5-25药物分析3 3、与重金属离子反应、与重金属离子反应巴
7、比妥类药物的基本结构中含有巴比妥类药物的基本结构中含有丙二酰脲基团丙二酰脲基团(-CONHCONHCO-),(-CONHCONHCO-),在适宜的在适宜的pHpH液中液中, ,易与重金易与重金属离子，如银盐、铜盐、钴盐等络合而呈色属离子，如银盐、铜盐、钴盐等络合而呈色或产生有色沉淀。或产生有色沉淀。2022-5-25药物分析* 与银盐反应：碳酸钠溶液中，与硝酸银反应，与银盐反应：碳酸钠溶液中，与硝酸银反应，一银盐溶解，二银盐白色沉淀。一银盐溶解，二银盐白色沉淀。CCOR1R2CO NHNC-ONa+ AgNO3 + Na2CO3CCOR1R2CO NNC-ONaAg+ NaHCO3 + NaN
8、O3+ AgNO3CCOR1R2CO NNC=OAgAgCCOR1R2CO NNC-ONaAg+ NaNO3难溶性二银盐可溶性二银盐2022-5-25药物分析NNCuCR1R2COCONNHCOCR1R2COCONNHCOSS紫色紫色巴比妥类巴比妥类 绿色绿色硫喷妥钠硫喷妥钠 * 与铜盐反应：铜与铜盐反应：铜-吡啶溶液中与巴比妥类药物反吡啶溶液中与巴比妥类药物反应显应显紫色紫色；与硫喷妥钠反应显；与硫喷妥钠反应显绿色绿色。2022-5-25药物分析4. 紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征 巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其电离电离的程度的程度有关有关 。* 在酸
9、性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫在酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。外吸收。* 在在pH10的碱性溶液中，发生一级电离，的碱性溶液中，发生一级电离，240nm波长处有最大吸收。波长处有最大吸收。* 在在pH13的强碱性溶液中，发生二级电离，最的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至大吸收红移至255nm波长处波长处 2022-5-25药物分析 A. H2SO4溶液溶液(0.05mol/L)B. pH9.9缓冲缓冲溶液溶液C. NaOH溶液溶液(0.1mol/L) (pH 13)巴比妥类药物的紫外吸收光谱巴比妥类药物的紫外吸收光谱2022-5-25药物分析*硫代巴比妥类药物在酸性
10、或碱性溶硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中，均有较明显的紫外吸收液中，均有较明显的紫外吸收HCl 溶液溶液 (0.1mol/L) NaOH 溶液溶液 (0.1mol/L)硫喷妥的紫外吸收光谱硫喷妥的紫外吸收光谱2022-5-25药物分析5. 色谱行为特征色谱行为特征 巴比妥类药物具有不同的分子结构，其色谱巴比妥类药物具有不同的分子结构，其色谱行为亦不同，可用于鉴别。行为亦不同，可用于鉴别。（1）薄层色谱法）薄层色谱法 不同巴比妥类药物的不同巴比妥类药物的R Rf f值不一样。值不一样。（2）高效液相色谱法）高效液相色谱法 保留行为应与对照品一致保留行为应与对照品一致2022-5-25药物分析6
11、. 显微结晶显微结晶 巴比妥类药物可以根据其本身或与某种试剂巴比妥类药物可以根据其本身或与某种试剂的反应产物的特殊晶型进行同类或不同类药物的的反应产物的特殊晶型进行同类或不同类药物的鉴别。鉴别。（1）药物本身的晶型）药物本身的晶型 巴比妥为长方形结晶；苯巴比妥开始结晶时呈球巴比妥为长方形结晶；苯巴比妥开始结晶时呈球形，后变成花瓣状。形，后变成花瓣状。 （2）反应产物的晶型）反应产物的晶型 某些巴比妥类药物可与重金属离子生成具有特殊某些巴比妥类药物可与重金属离子生成具有特殊晶型的沉淀。晶型的沉淀。2022-5-25药物分析7. 与香草醛（与香草醛（Vanillin）的反应）的反应 分子结构中丙二
12、酰脲基团中的氢比较活泼，分子结构中丙二酰脲基团中的氢比较活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成生成棕红色产物棕红色产物。（。（P268） BP(2009)戊巴比妥采用此反应进行鉴别。戊巴比妥采用此反应进行鉴别。2022-5-25药物分析三、鉴别试验三、鉴别试验（一）丙二酰脲类（母核）鉴别反应（一）丙二酰脲类（母核）鉴别反应1. 与银盐的反应与银盐的反应（苯巴比妥）（苯巴比妥） 取供试品约取供试品约0.1g，加碳酸钠试液，加碳酸钠试液1ml与水与水10m1，振，振摇摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即白色，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，
13、即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。沉淀不再溶解。2022-5-25药物分析 3AgNO3AgNO白白二二银银盐盐可可溶溶性性一一银银盐盐32CONa32CONa5,5-取代取代二取代二取代CCCONONC OAgR1R2HCCCONONC OAgAgR1R22022-5-25药物分析可可溶溶性性一一银银盐盐3AgNO32CONa1 5 5 ，取 代 的 巴 比 妥 类 药 物CNOCNCH3OH3CCCOH2022-5-25药物分析2. 与铜盐的反应与铜盐的反应 铜铜吡吡啶啶试试液液巴巴比比妥妥类类药药物物吡
14、啶吡啶紫色溶液紫色溶液紫色紫色铜铜吡吡啶啶试试液液硫硫喷喷妥妥钠钠吡啶吡啶绿色绿色 取供试品约取供试品约50mg，加吡啶溶液（，加吡啶溶液（110）5m1，溶，溶解后，加铜吡啶试液（硫酸铜解后，加铜吡啶试液（硫酸铜4g，水，水90ml溶解后，加溶解后，加吡啶吡啶30m1，即得），即得）1m1，即显紫色或生成紫色沉淀。，即显紫色或生成紫色沉淀。2022-5-25药物分析（二）取代基的反应二）取代基的反应 1. 苯环取代基的反应苯环取代基的反应（1）与亚硝酸钠）与亚硝酸钠-硫酸反应硫酸反应紫红色紫红色其其他他巴巴比比妥妥苯苯巴巴比比妥妥橙红橙红橙黄橙黄 422SOHNaNO2022-5-25药物分
15、析（2）与甲醛）与甲醛-硫酸反应硫酸反应无此现象无此现象其他巴比妥其他巴比妥 42SOHHCHO玫瑰红玫瑰红接界面接界面苯巴比妥苯巴比妥2022-5-25药物分析（3）硝化反应）硝化反应324KNOH SO 黄色黄色芳香取代基巴比妥其他巴比妥无此现象无此现象2022-5-25药物分析2. 丙烯基的反应丙烯基的反应 碘碘液液的的黄黄棕棕色色褪褪去去司司可可巴巴比比妥妥碘碘试试液液2IHCCCONONCCH2CHCH2CHCH3C3H7ONaII2022-5-25药物分析3. 硫元素的反应硫元素的反应黑黑白白含硫的药物含硫的药物 2PbNaOHS2- + Pb2+PbS黑黑2022-5-25药物分
16、析（三）制备衍生物测定熔点（三）制备衍生物测定熔点 过过滤滤干干燥燥测测定定mp 游游离离巴巴比比妥妥巴巴比比妥妥类类钠钠盐盐H2022-5-25药物分析（四）钠盐的反应（四）钠盐的反应 ChP附录附录“一般鉴别试验一般鉴别试验” 1. 焰色反应焰色反应 2. 与醋酸氧铀锌反应与醋酸氧铀锌反应黄色黄色黄色黄色2022-5-25药物分析例例1、下列哪些性质适用于巴比妥类药物、下列哪些性质适用于巴比妥类药物 A、母核为、母核为7-ACA B、母核为、母核为1,3-二酰亚胺基团二酰亚胺基团 C、母核中含、母核中含2个氮原子个氮原子 D、与碱共热，有氨气放出、与碱共热，有氨气放出 E、水溶液呈弱碱性、
17、水溶液呈弱碱性 2022-5-25药物分析例例2、下列巴比妥类药物水溶液中酸性、下列巴比妥类药物水溶液中酸性 最小的药物是最小的药物是 A、苯巴比妥、苯巴比妥 B、巴比妥、巴比妥 C、异戊巴比妥、异戊巴比妥 D、异戊巴比妥钠、异戊巴比妥钠 E、以上都不对、以上都不对 2022-5-25药物分析四、特殊杂质的检查四、特殊杂质的检查(一一) 苯巴比妥的特殊杂质检查苯巴比妥的特殊杂质检查 1. 酸度酸度 2. 乙醇溶液的澄清度乙醇溶液的澄清度 3. 中性或碱性物质重量法中性或碱性物质重量法2022-5-25药物分析(二二) 司可巴比妥钠的特殊杂质检查司可巴比妥钠的特殊杂质检查 1溶液的澄清度溶液的澄
18、清度 2中性或碱性物质中性或碱性物质2022-5-25药物分析五、含量测定五、含量测定 1、苯巴比妥、苯巴比妥银量法银量法溶剂溶剂 甲醇甲醇 + 3%无水碳酸钠无水碳酸钠终点指示终点指示 自身指示终点自身指示终点 电位法指示终点电位法指示终点 二银盐二银盐一银盐一银盐苯巴比妥苯巴比妥3AgNONa2CO3反应摩尔比反应摩尔比1 1ChP 2022-5-25药物分析2、司可巴比妥钠、司可巴比妥钠溴量法溴量法 原理：原理： KBr2IKI2Br22 剩剩余余6423222OSNaNaI2OSNa2I 二二溴溴代代司司可可巴巴比比妥妥钠钠司司可可巴巴比比妥妥钠钠HCl2Br(定量过量定量过量)202
19、2-5-25药物分析3、UV(对照品法对照品法) %100WWAA 硫硫喷喷妥妥硫硫喷喷妥妥钠钠稀稀释释度度稀稀释释度度样样对对对对样样%100091. 15001W)ml/g(cAA)g( 样样对对对对样样1.091266244例：注射用硫喷妥钠例：注射用硫喷妥钠2022-5-25药物分析4 4、酸碱滴定法、酸碱滴定法在水在水- -乙醇混合溶剂中的滴定乙醇混合溶剂中的滴定在胶束水溶液中进行的滴定在胶束水溶液中进行的滴定非水滴定法非水滴定法2022-5-25药物分析5 5、高效液相色谱法、高效液相色谱法6、体内药物分析、体内药物分析 体内药物分析多采用HPLC法、GC-MS法，HPCE法（高效
20、毛细管电泳法） 巴比妥类药物均适用HPLC法测定含量，尤其适用于复方制剂中的巴比妥类药物的分析。2022-5-25药物分析一、苯并二氮杂卓类药物的结构与性质 苯并二氮杂卓类药物为苯环与1七元含氮杂环稠合而成的有机药物，其中1,4-苯并二氮杂卓类药物是目前临床上应用最广泛的抗焦虑、抗惊厥药。2022-5-25药物分析NNClCH3O地西泮NHNClOOH奥沙西泮NHNClOOHCl劳拉西泮NHNO2NOCl氯硝西泮NNClNHCH3O氯氮卓NNClNNClCH3三唑仑2022-5-25药物分析主要理化性质：主要理化性质：苯并二氮杂卓类药物通常为白色或微黄色结晶或结晶性粉末；具有一定的熔点。一般不
21、溶或微溶于水，溶于丙酮或三氯甲烷等有机溶剂。弱碱性弱碱性 七元环上的氮原子具有碱性。水解性水解性UVUV吸收特性吸收特性2022-5-25药物分析二、鉴别试验二、鉴别试验1、沉淀反应 苯并二氮杂卓类药物具有生物碱的性质，可与生物碱沉淀剂作用。氯氮卓橙红色沉淀HCl(9 1000)碘化铋钾阿普唑仑HCl(9 1000)硅钨酸白色沉淀白色沉淀2022-5-25药物分析2、硫酸-荧光反应 苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，显示不同颜色的荧光。3、氯化物鉴别反应4、芳伯胺的反应5、吸收光谱特征6、色谱法地西泮黄绿色氯氮卓为黄色2022-5-25药物分析三、含量测定三、含量测定1、
22、非水滴定2、紫外分光光度法3、高效液相色谱法2022-5-25药物分析本章小结本章小结1 1掌握巴比妥类药物的化学结构掌握巴比妥类药物的化学结构与分析方法间的关系：与分析方法间的关系：（1 1）弱酸性）弱酸性（2 2）水解性）水解性（3 3）与重金属离子的反应）与重金属离子的反应 2022-5-25药物分析2 2掌握巴比妥类药物的鉴别：掌握巴比妥类药物的鉴别：（1 1）与重金属的反应）与重金属的反应（2 2）特殊取代基（不饱和烃基取代、）特殊取代基（不饱和烃基取代、芳环取代）和硫元素的鉴别试验芳环取代）和硫元素的鉴别试验2022-5-25药物分析3 3掌握巴比妥类药物含量测定的原掌握巴比妥类药物含量测定的原理与方法：理与方法：（1 1）银量法测定的原理）银量法测定的原理（2 2）溴量法测定的原理）溴量法测定的原理
